La presente invención se refiere a un procedimiento de obtención del compuesto (-)- englerina A y de compuestos análogos del mismo. Asimismo, la presente invención se refiere a los compuestos análogos mencionados y a su uso en el tratamiento del cáncer, así como a los intermedios de reacción.
ESTADO DE LA TÉCNICA
A lo largo de los últimos años, el sesquiterpeno (-)-englerina A (EA, figura 1) ha atraído la atención de los químicos, biólogos y físicos por su potente y actividad selectiva como inhibidor del crecimiento de las células cancerígenas renales (GI de 20 nM) (ver R. Ratnayake, D. Covell, T. T. Ransom, K. R. Gustafson, J. A. Beutler, Org. Lett. 2009, 11, 57).
**(Ver fórmula)**
Desde el aislamiento del compuesto EA en 2009 (ver referencia anterior) se han descrito diferentes síntesis formales y totales.
WO 2009/088854 describe el aislamiento de Englerin A y Englerin B mediante extracción y purificación por HPLC. Este documento también describe una ruta hemisintética para la preparación de varios derivados del grupo éster del compuesto natural a partir de cinamoilo.
Willot ha descrito una síntesis total de (+)-englerina A a partir del monoterpeno trans, cis-nepelactona (ver M. Willot et al. Anqewandte Chemie. International Edition, 2009, vol. 48, pp. 9105-9108).
Por otro lado, Echavarren ha descrito la síntesis de (-)-englerina A mediante una epoxidación asimétrica de Sharpless a partir de geraniol (Echavarren et al WO 2011/120886). En esta síntesis se emplea una cicloisomerización de cetoeninos catalizada por oro para obtener el bicarbobiclo de EA de forma directa.
Esta y otras síntesis tienen el inconveniente de que para generar los centros resultantes de la fusión de los anillos con la estereoquímica correcta se han de llevar a cabo isomerizaciones que implican la destrucción y generación de estereocentros y la necesidad de separar isómeros.
Además, las síntesis que se han descrito hasta la fecha cuentan con numerosos inconvenientes. Algunas de ellas son largas (más de 20 etapas sintéticas) y en consecuencia presentan rendimientos globales bajos. Otras, a pesar de ser más cortas tienen igualmente rendimientos globales bajos o no constituyen un método eficiente para sintetizar análogos estructurales de la englerina A ya que parten de productos naturales quirales a partir de los que se elabora la (-) englerina. Particularmente, ninguna de las síntesis descritas hasta la fecha permite obtener una amplia gama de derivados de EA con distintas modificaciones en el anillo de cinco miembros.
Por tanto, sería deseable disponer de un procedimiento de preparación de EA que permita superar esas limitaciones.
DESCRIPCIÓN DE LA INVENCIÓN
En un primer aspecto, la presente invención se refiere a un procedimiento de obtención de un compuesto de fórmula I:
**(Ver fórmula)**
cada - independientemente representa un enlace sencillo o doble con la condición de que ambas - no representan un enlace doble simultáneamente;
R1 representa H, OH, -OP1, =O, -CN, halógeno, -NR7R7, -N3, C1-6 alquilo, C2-6 alquenilo, C2-6 alquinilo o Cy1;
cada R2 y R3 independientemente representan H o C1-6 alquilo;
R4 representa H o P2;
R5 representa C1-6 alquilo;
R6 representa Cy2-C1-6 alquil-CO-, Cy2-C2-6 alquenil-CO-, Cy2-C1-6 o Cy2OCO-, donde el resto alquilo o alquenilo de cada uno de los grupos R6 están opcionalmente e independientemente sustituidos por uno o más grupos halógeno o -OH; cada R7 independientemente representa H, C1-6 alquilo o bien dos grupos R7 sobre un átomo de N se unen para formar un grupo Cy3; y
cada Cy1 y Cy2 independientemente representan un anillo aromático carbocíclico de 6 a 10 miembros o bien cada Cy1 y Cy2 independientemente representan un anillo heteroaromático de 5 ó 6 miembros que contiene de 1 a 3 heteroátomos seleccionados de N, O y S, donde cada Cy1 y Cy2 independientemente está unidos al resto de la molécula a través de cualquier átomo de N o C disponible, y donde cada Cy1 y Cy2 independientemente está opcionalmente sustituidos por uno o más grupos halógeno, -C1-6 alquilo , -OC1-6 alquilo o halo-C1-6 alquilo;
Cy3 representa un heteroarilo de 5 ó 6 miembros que contiene de 1 a 3 átomos de N, donde Cy3 está unido al resto de la molécula a través del átomo de N del grupo -NR7R7 y donde Cy3 está opcionalmente sustituido por uno o más grupos R8; cada R8 independientemente representa hidrógeno, C1-6 alquilo o Cy2; cada P1 y P2 independientemente representan -Si(R9)3, metoximetilo (MOM), tetrahidropiranilo (THP), bencilo (Bn), -COR10, -COCy1, -SO2R11, -SO2Cy1,
benciloximetiléter, metiltiometiléter, trimetilsilietoximetiléter o para-metoxibencilo (PMB);
cada R9 independientemente representa fenilo o C1-6 alquilo,
R10 representa C1-6 alquilo, halo C1-6 alquilo, -CH2OH, -CH2OC1-6 alquilo o -CH2OP1; y R11 representa C1-6 alquilo o halo-C1-6 alquilo,
que comprende la reacción entre un compuesto de fórmula II y un catalizador de PtCl2
y P(C6F 5)3:
¡Pr
**(Ver fórmula)**
II
donde:
P3 representa -Si(R9)3, metoximetilo (MOM), tetrahidropiranilo (THP), bencilo
(Bn), -COR10, -COCy1, -SO2R11, -SO2Cy o para-metoxibencilo (PMB); y
Cy1, R2, R3 y R5 R9 y R10 tienen el significado descrito para un compuesto de fórmula I.
En otra realización la invención se refiere al procedimiento definido anteriormente, donde P3 se selecciona de ferc-butildimetilsililo (TBS), trimetilsililo (TMS), trietilsililo (TES), ferc-butildifenilsililo (TBDPS) y triisopropilsilil (TIPS), y preferiblemente donde P3 representa ferc-butildimetilsililo (TBS).
En otra realización la invención se refiere al procedimiento definido anteriormente, donde la relación molar entre PtCl2 y P(C6F5)3 es de entre 2:1 y 1:2, y preferiblemente es 1:1.
En otra realización la invención se refiere al procedimiento definido anteriormente, donde la relación molar entre el compuesto de fórmula II, PtCl2 y P(C6F5)3 es de entre 100: 1:1 y 10: 1:1 respectivamente, y preferiblemente de 20:1:1 respectivamente.
En otra realización la invención se refiere al procedimiento definido anteriormente, que además comprende la etapa de dihidroxilación de un compuesto de fórmula IV, y opcionalmente reacciones de protección y/o desprotección, para la obtención de un compuesto de fórmula V:
PiO |_| ¡Pr
**(Ver fórmula)**
R120 |-| ¡Pr
'3 r5 IV Rs ^5 OH \
donde:
R12 representa hidrógeno o P1, y
P1, R2, R3, R4 y R5 tienen el significado descrito para un compuesto de fórmula I.
**(Ver fórmula)**
En otra realización la invención se refiere a procedimiento definido anteriormente, que además comprende las etapas:
a) epoxidación de un compuesto de fórmula V; y
b) transanulación, y opcionalmente protección y/o desprotección, para la obtención de un compuesto de fórmula la.
**(Ver fórmula)**
H | OR4 *5 la
donde P3, R2-R6 tienen el significado descrito para un compuesto de fórmula I.
En otra realización la invención se refiere al procedimiento definido anteriormente, que además comprende una reacción adicional seleccionada de entre las siguientes:
a) reacción de un compuesto de fórmula la con un compuesto de fórmula (R13)2CuM para obtener un compuesto de fórmula Ib:
**(Ver fórmula)**
R13 representa halógeno, C1-6 alquilo, C2-6 alquenilo, C2-6 alquinilo o Cy1;
M representa Li o MgX; y
X representa halógeno, -OSO2R11 o -CN; y
R11 tiene el significado descrito para un compuesto de fórmula I; o
b) oxidación de un compuesto de fórmula la, para obtener un compuesto de fórmula lc,
O H ?Re ¡Pr
**(Ver fórmula)**
Ic
donde R2-R6 tienen el significado descrito para un compuesto de fórmula I; y
opcionalmente, reacción con una base y un agente triflante para la obtención de un compuesto de fórmula Id:
ORr ,r
**(Ver fórmula)**
3 R5 Id
donde R2-R6 tienen el significado descrito para un compuesto de fórmula I; y
opcionalmente, reacción de un compuesto de fórmula Id de "cross-coupling" de Suzuki, preferiblemente con un compuesto organometálico de fórmula R14B(OH)2, mediante catálisis por un complejo de Pd o Ni, para obtener un compuesto de fórmula Ie,
**(Ver fórmula)**
or4
r5 Ie
donde R2-R6 tienen el significado descrito para un compuesto de fórmula I; y R14 representa C1-6 alquilo, C2-6 alquenilo y C2-6 alquinilo o Cy1; o
c) reacción de un compuesto de fórmula Ia con un cianuro para obtener un compuesto 20 de fórmula I donde R1 representa un grupo ciano; o
d) reacción de un compuesto de fórmula Ia con una azida, para obtener el compuesto de fórmula I donde R1 representa azida; o
e) fluoración de un compuesto de fórmula la, para obtener el compuesto de fórmula I, donde R1 representa flúor.
Otro aspecto de la invención se refiere a un compuesto de fórmula NI:
**(Ver fórmula)**
III
donde:
R1 representa -OH, -OP1, =O, -CN, halógeno, -NR7R7, -N3, -C2-6 alquilo, C2-6 alquenilo, C2-6 alquinilo o Cy1; y
R2 a R7, Cy1, y ---- tienen el significado descrito para un compuesto de fórmula I.
En otra realización la invención se refiere a un compuesto de fórmula III, que es un compuesto de fórmula IIIa:
**(Ver fórmula)**
Illa
donde R1 a R5 y - tienen el significado descrito para un compuesto de fórmula III.
En otra realización la invención se refiere a un compuesto de fórmula III, donde cada ---- representa un enlace sencillo.
En otra realización la invención se refiere a un compuesto de fórmula NI, que es un compuesto de fórmula IIIb:
R6O
**(Ver fórmula)**
IIIb
5 donde -, R1-R6 tienen el significado descrito para un compuesto de fórmula III.
En otra realización la invención se refiere a un compuesto de fórmula III, que es un compuesto de fórmula IIIc:
**(Ver fórmula)**
IIIc
donde R1-R6 tienen el significado descrito para un compuesto de fórmula III.
En otra realización la invención se refiere a un compuesto de fórmula III, que es un compuesto de fórmula IIId:
RrO
**(Ver fórmula)**
IIId
donde R1-R6 tienen el significado descrito para un compuesto de fórmula III.
En otra realización la invención se refiere a un compuesto de fórmula NI, que es un compuesto de fórmula IIIe:
**(Ver fórmula)**
donde R2-R6 tienen el significado descrito para un compuesto de fórmula III.
En otra realización la invención se refiere a un compuesto de fórmula III, donde:
cada ---- representa un enlace sencillo; y
R1 representa F, Cl, I, isobutilo, n-butilo, n-hexilo, -N3, =O o -OTs.
En otra realización la invención se refiere a un compuesto de fórmula III, donde cada R2 y R3 representan H.
En otra realización la invención se refiere a un compuesto de fórmula III, donde: cada ---- representa un enlace sencillo;
R1 representa F, Cl, I, isobutilo, n-butilo, n-hexilo, -N3, =O o -OTs; y cada R2 y R3 representan H.
En otra realización la invención se refiere a un compuesto de fórmula III, donde R4 representa P2.
En otra realización la invención se refiere a un compuesto de fórmula III, donde R4 representa -COCH2OH.
En otra realización la invención se refiere a un compuesto de fórmula III, donde: cada ---- representa un enlace sencillo;
R1 representa F, Cl, I, isobutilo, n-butilo, n-hexilo, -N3, =O o -OTs; cada R2 y R3 representan H; y
R4 representa P2, y preferiblemente R4 representa -COCH2OH.
En otra realización la invención se refiere a un compuesto de fórmula III, donde:
R4 representa P2; y
P2 representa -COR10, -COCy1, -SO2R11, -SO2Cy1, benciloximetiléter, metiltiometiléter, trimetilsilietoximetiléter o para-metoxibencilo (PMB),
preferiblemente -COR10, -COCy1, -SO2R11, -SO2Cy1 o para-metoxibencilo (PMB), más preferiblemente -COR10, -COCy1, -SO2R11o -SO2Cy1, aún más
preferiblemente -COR10 o -COCy1, y todavía más preferiblemente -COR10.
En otra realización la invención se refiere a un compuesto de fórmula III, donde:
R4 representa P2; y
P2 representa -COR10, -COCy1, -SO2R11, -SO2Cy1, benciloximetiléter, metiltiometiléter, trimetilsilietoximetiléter o para-metoxibencilo (PMB),
preferiblemente -COR10, -COCy1, -SO2R11, -SO2Cy1 o para-metoxibencilo (PMB), más preferiblemente -COR10, -COCy1, -SO2R11o -SO2Cy1, aún más
preferiblemente -COR10 o -COCy1, y todavía más preferiblemente -COR10; y R10 representa -CH2OH, -CH2OC1-6 alquilo o -CH2OP1, y preferiblemente -CH2OH.
En otra realización la invención se refiere a un compuesto de fórmula III, donde R5 representa metilo.
En otra realización la invención se refiere a un compuesto de fórmula III, donde: cada ---- representa un enlace sencillo;
R1 representa F, Cl, I, isobutilo, n-butilo, n-hexilo, -N3, =O o -OTs; y R5 representa metilo.
En otra realización la invención se refiere a un compuesto de fórmula III, donde: cada R2 y R3 representan H; y R5 representa metilo.
En otra realización la invención se refiere a un compuesto de fórmula III, donde:
R4 representa P2, y preferiblemente R4 representa -COCH2OH; y R5 representa metilo.
En otra realización la invención se refiere a un compuesto de fórmula III, donde:
cada - representa un enlace sencillo;
R1 representa F, Cl, I, isobutilo, n-butilo, n-hexilo, -N3, =O o -OTs; cada R2 y R3 representan H; y R5 representa metilo.
En otra realización la invención se refiere a un compuesto de fórmula III, donde: cada ---- representa un enlace sencillo;
R1 representa F, Cl, I, isobutilo, n-butilo, n-hexilo, -N3, =O o -OTs; cada R2 y R3 representan H;
R4 representa P2, y preferiblemente R4 representa -COCH2OH; y R5 representa metilo.
En otra realización la invención se refiere a un compuesto de fórmula III, donde R6 representa cinamoilo, cinamilo, 3-fenilpropilo, 3-fenilpropanoilo, benciloxicarbonilo, N- bencilaminocarbonilo, N-bencilaminotiocarbonilo, donde el resto fenilo de cada uno de los grupos R6 está opcionalmente sustituido por uno o más grupos C1-6 alquilo, -OC1-6 alquilo o halógeno, y donde el resto alquilo o alquenilo de cada uno de los grupos R6 están opcionalmente e independientemente sustituidos por uno o más grupos halógeno o -OH.
En otra realización la invención se refiere a un compuesto de fórmula III, donde: cada ---- representa un enlace sencillo;
R1 representa F, Cl, I, isobutilo, n-butilo, n-hexilo, -N3, =O o -OTs; y R6 representa cinamoilo, cinamilo, 3-fenilpropilo, 3-fenilpropanoilo, benciloxicarbonilo, N-bencilaminocarbonilo, N-bencilaminotiocarbonilo, donde el resto fenilo de cada uno de los grupos R6 está opcionalmente sustituido por uno o más grupos C1-6 alquilo, - OC1-6 alquilo o halógeno, y donde el resto alquilo o alquenilo de cada uno de los grupos R6 están opcionalmente e independientemente sustituidos por uno o más grupos halógeno o -OH.
En otra realización la invención se refiere a un compuesto de fórmula III, donde: cada R2 y R3 representan H; y
R6 representa cinamoilo, cinamilo, 3-fenilpropilo, 3-fenilpropanoilo, benciloxicarbonilo, N-bencilaminocarbonilo, N-bencilaminotiocarbonilo, donde el resto fenilo de cada uno de los grupos R6 está opcionalmente sustituido por uno o más grupos C1-6 alquilo, - OC1-6 alquilo o halógeno, y donde el resto alquilo o alquenilo de cada uno de los
grupos R6 están opcionalmente e independientemente sustituidos por uno o más grupos halógeno o -OH.
En otra realización la invención se refiere a un compuesto de fórmula III, donde:
R4 representa P2, y preferiblemente R4 representa -COCH2OH;
R5 representa metilo; y
R6 representa cinamoilo, cinamilo, 3-fenilpropilo, 3-fenilpropanoilo, benciloxicarbonilo, N-bencilaminocarbonilo, N-bencilaminotiocarbonilo, donde el resto fenilo de cada uno de los grupos R6 está opcionalmente sustituido por uno o más grupos C1-6 alquilo, - OC1-6 alquilo o halógeno, y donde el resto alquilo o alquenilo de cada uno de los grupos R6 están opcionalmente e independientemente sustituidos por uno o más grupos halógeno o -OH.
En otra realización la invención se refiere a un compuesto de fórmula III, donde:
R5 representa metilo; y
R6 representa cinamoilo, cinamilo, 3-fenilpropilo, 3-fenilpropanoilo, benciloxicarbonilo, N-bencilaminocarbonilo, N-bencilaminotiocarbonilo, donde el resto fenilo de cada uno de los grupos R6 está opcionalmente sustituido por uno o más grupos C1-6 alquilo, - OC1-6 alquilo o halógeno, y donde el resto alquilo o alquenilo de cada uno de los grupos R6 están opcionalmente e independientemente sustituidos por uno o más grupos halógeno o -OH.
En otra realización la invención se refiere a un compuesto de fórmula III, donde: cada ---- representan un enlace sencillo;
R1 representa F, Cl, I, isobutilo, n-butilo, n-hexilo, -N3, =O o -Ots; cada R2 y R3 representan H;
R4 representa P2, y preferiblemente R4 representa -COCH2OH;
R5 representa metilo; y
R6 representa cinamoilo, cinamilo, 3-fenilpropilo, 3-fenilpropanoilo, benciloxicarbonilo, N-bencilaminocarbonilo, N-bencilaminotiocarbonilo, donde el resto fenilo de cada uno de los grupos R6 está opcionalmente sustituido por uno o más grupos C1-6 alquilo, - OC1-6 alquilo o halógeno, y donde el resto alquilo o alquenilo de cada uno de los grupos R6 están opcionalmente e independientemente sustituidos por uno o más grupos halógeno o -OH.
En otra realización la invención se refiere a un compuesto de fórmula NI, donde cada R7 independientemente representa H o C1-6 alquilo.
En otra realización la invención se refiere a un compuesto de fórmula III, donde:
R1 representa -NR7R7;
dos grupos R7 sobre un átómo de N se unen para formar un grupo Cy3.
En otra realización la invención se refiere a un compuesto de fórmula III, donde:
R1 representa -NR7R7;
dos grupos R7 sobre un átomo de N se unen para formar un grupo Cy3; y Cy3 representa triazol.
En otra realización la invención se refiere a un compuesto de fórmula III, donde R10 representa -CH2OH.
En otra realización la invención se refiere a un compuesto de fórmula III, donde Cy1 representa un heteroarilo de 5 miembros que contiene de 1 a 3 átomos de N, donde Cy1 está unido al resto de la molécula a través del átomo de N del grupo -NR7R7 y donde Cy1 está opcionalmente sustituido por uno o más grupos R8, y preferiblemente donde Cy1 representa un anillo de triazol.
En otra realización la invención se refiere a un compuesto de fórmula III seleccionado de:
**(Ver fórmula)** **(Ver fórmula)**
1b;
**(Ver fórmula)**
OH ic;
iBu
O \^^Ph
**(Ver fórmula)**
OH id;
**(Ver fórmula)**
OH ie;
OH ig;
O,
**(Ver fórmula)** **(Ver fórmula)**
1h;
TsO HQ /i
**(Ver fórmula)**
OPMB 11b;
12f;
**(Ver fórmula)**
12g;
OPMB i3h;
H OPiv
15i;
**(Ver fórmula)**
I5g; y
I5h.
Otro aspecto de la invención se refiere a una composición farmacéutica que comprende al menos una cantidad terapéuticamente efectiva de un compuesto de fórmula III y uno o más excipientes o vehículos farmacéuticamente aceptables.
Otro aspecto de la invención se refiere al uso de un compuesto de fórmula III o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo para la fabricación de un medicamento.
Otro aspecto de la invención se refiere al uso de un compuesto de fórmula III o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo para la fabricación de un medicamento para el tratamiento del cáncer y VIH, y preferiblemente para el tratamiento del cáncer renal.
Otro aspecto de la presente invención se refiere al compuesto de fórmula II:
**(Ver fórmula)**
II
donde:
P3 representa -Si(R9)3, metoximetilo (MOM), tetrahidropiranilo (THP), bencilo
(Bn), -COR10, -COCy1, -SO2R11, -SO2Cy o para-metoxibencilo (PMB); y
Cy1, R2, R3 y R5 R9 y R10 tienen el significado descrito para un compuesto de fórmula I.
Otro aspecto de la invención se refiere al compuesto de fórmula IV:
**(Ver fórmula)**
donde P1, R1, R3 y R5 tienen el significado descrito para un compuesto de fórmula I.
Otro aspecto de la invención se refiere al compuesto de fórmula V:
iPr
**(Ver fórmula)**
donde:
R12 representa hidrógeno o P1, y
P1, R2, R3, R4 y R5 tienen el significado descrito para un compuesto de fórmula I.
A lo largo de la invención el término C1-6 alquilo, como grupo o parte de un grupo, significa un grupo alquilo de cadena lineal o ramificada que contiene de 1 a 6 átomos de C e incluye, entre otros, los grupos metilo, etilo, propilo, isopropilo, butilo, isobutilo, sec-butilo y ferc-butilo, pentilo, isopentilo y n-hexilo.
Análogamente, el término C2-6 alquilo, como grupo o parte de un grupo, significa un grupo alquilo de cadena lineal o ramificada que contiene de 2 a 6 átomos de carbono e incluye, entre otros, los grupos etilo, propilo, isopropilo, butilo, isobutilo y n-hexilo.
Un grupo C2-6 alquenilo significa una cadena alquílica lineal o ramificada que contiene de 2 a 6 átomos de C, y que además contiene uno o más dobles enlaces, preferiblemente uno o dos dobles enlaces. Ejemplos incluyen los grupos etenilo, 1- propenilo, 2-propenilo, isopropenilo, 1-butenilo, 2-butenilo, 3-butenilo, 1,3-butadienilo, 1-pentenilo, 2-pentenilo, 2,4-pentadienilo y 1-hexenilo.
Un grupo C2-6 alquinilo significa una cadena alquílica lineal o ramificada que contiene de 2 a 6 átomos de C, y que además contiene uno o más dobles enlaces, preferiblemente uno o dos triples enlaces. Ejemplos incluyen los grupos etinilo, 1-
propinilo, 2-propinilo, 1-butinilo, 2-butinilo, 3-butinilo, 1,3-butadiinilo, 1-pentinilo, 3- pentinilo, 2,4-pentadiinilo, 1-hexinilo, 2-hexinilo y 2,4-hexadiinilo.
Un radical halógeno o su abreviatura halo significa fluoro, cloro, bromo o yodo.
Un grupo "halo C1-6 alquilo", como grupo o parte de un grupo, significa un grupo resultante de la sustitución de uno o más átomos de hidrógeno de un grupo C1-6 alquilo por uno o más átomos de halógeno (es decir, fluoro, cloro, bromo o yodo), que pueden ser iguales o diferentes. Ejemplos incluyen, entre otros, los grupos trifluorometilo, fluorometilo, 1-cloroetilo, 2-cloroetilo, 1 -fluoroetilo, 2-fluoroetilo, 2-bromoetilo, 2- yodoetilo, 2,2,2-trifluoroetilo, pentafluoroetilo, 3-fluoropropilo, 3-cloropropilo, 2,2,3,3- tetrafluoropropilo, 2,2,3,3,3-pentafluoropropilo, heptafluoropropilo, 4-fluorobutilo y nonafluorobutilo
Cada Cy1 y Cy2 independientemente representan un anillo aromático carbocíclico de 6 a 10 miembros o bien Cy1 y Cy2 independientemente representan un anillo heteroaromático de 5 ó 6 miembros que contiene de 1 a 3 heteroátomos seleccionados de N, O y S, donde cada Cy1 y Cy2 independientemente está unido al resto de la molécula a través de cualquier átomo de N o C disponible, y donde cada Cy1 y Cy2 independientemente está opcionalmente sustituidos por uno o más grupos -C1-6 alquilo o -OC1-6 alquilo o halo-C1-6 alquilo. Ejemplos incluyen entre otros fenilo, naftilo, piridilo, pirazolilo, triazolilo, pirimidilo,, isoxazolilo, indolilo imidazoilo y tiazolilo.
Cy3 representa un heteroarilo de 5 ó 6 miembros que contiene de 1 a 3átomos de N, donde Cy3 está unido al resto del a molécula a través del átomo de N del grupo -NR7R7 y donde Cy3 está opcionalmente sustituido por uno o más grupos R8; y cada R8 independientemente representa hidrógeno, C1-6 alquilo o Cy2. Ejemplos de Cy3 incluyen entre otros, triazol, pirrolilo y piridinilo.
"-OC1-6 alquilo" y "-OCy1", como grupo o parte de un grupo, significa un grupo resultante de la sustitución de un átomo de hidrógeno de un grupo C1-6 alquilo por un grupo alcoxilo o cicloxilo donde la parte C1-6 alquilo y Cy1 tienen el mismo significado descrito anteriormente. Ejemplos incluyen metoxi, etoxi, propoxi, isopropoxi, butoxi, isobutoxi, sec-butoxi, ferc-butoxi y fenoxi
"-SO2Cy1", como grupo o parte de un grupo, significa un grupo resultante de la sustitución de un átomo de hidrógeno de un grupo Cy1 por un grupo -SO2-, donde la parte Cy1 tiene el mismo significado descrito anteriormente. Ejemplos incluyen entre otros fenilsulfonilo, para-tolylsulfonilo, naftilsulfonilo y piridilsulfonilo.
Cuando en las definiciones usadas a lo largo de la presente descripción para grupos cíclicos los ejemplos especificados se refieren a un radical de un anillo en términos generales, por ejemplo triazol, se incluyen todas las posiciones de unión posibles.
La expresión "opcionalmente sustituido por uno o más" significa la posibilidad de un grupo de estar sustituido por uno o más, preferiblemente por 1, 2, 3 ó 4 sustituyentes, más preferiblemente por 1, 2 ó 3 sustituyentes y aún más preferiblemente por 1 ó 2 sustituyentes, siempre que dicho grupo disponga de suficientes posiciones disponibles susceptibles de ser sustituidas. Si están presentes, dichos sustituyentes pueden ser iguales o diferentes y pueden estar situados sobre cualquier posición disponible.
Cuando en una definición de un sustituyente aparecen dos o más grupos con la misma numeración (por ejemplo -NR7R7), esto no significa que tengan que ser idénticos. Cada uno de ellos se selecciona independientemente de la lista de posibles significados dada para dicho grupo, y por tanto pueden ser iguales o diferentes.
En la presente invención el "compuesto organometálico" de fórmula "(R13)2CuM" (donde R13 significa C1-6 alquilo, C2-6 alquenilo y C2-6 alquinilo o Cy1, tal y como se ha definido anteriormente, M significa Li o MgX, y donde X significa halógeno, -OSO2R11 o -CN, donde R11 representa C1-6 alquilo o halo-C1-6 alquilo,). Donde dicho compuesto organometálico se obtiene mediante la reacción del compuesto organolítico de fórmula R13Li o de un reactivo de Grignard de fórmula R13MgX, con una sal de Cu(I) (tal como CuCl, CuF, CuBr, CuBrSMe2, Cul, CuCN, CuOTf) en una proporción de R13Li o R13MgX/ Cu(l) de entre 1:1 y 2:1, preferiblemente de 2:1.
"Agente triflante" se refiere a un compuesto tal como como TfCl, NPhTf2 o Tf2O, donde Tf representa el grupo CF3SO2-.
En la presente invención grupo protector se refiere a un grupo que bloquea la funcionalidad de un grupo orgánico y que puede ser eliminado mediante unas condiciones controladas. Los grupos protectores, sus reactividades relativas y las
condiciones bajo las cuales permanecen inertes son conocidos por una persona con conocimientos en la materia. Un grupo protector de un hidroxilo (OH) es un grupo que bloquea la función OH para futuras reacciones y que puede ser eliminado de manera controlada. Los grupos protectores de hidroxilos son bien conocidos en el estado de la técnica de la síntesis orgánica, si bien algunos ejemplos representativos son silil éteres (tales como terc-butildimetilsililo (TBS), trimetilsililo (TMS), terc-butildifenilsililo (TBDPS) y triisopropilsilil (TIPS), tetrahidropiranilo (THP), bencilo (Bn), para- metoxibencilo (PMB), metoximetilo (MOM), acetilo (Ac), pivaloilo (Piv), benciloximetiléter, metiltiometiléter, trimetilsilietoximetiléter, metanosulfonilo (Ms), benzoato, p-nitrobenzoato, para-toluensulfonilo (Ts) y trifluorometanosulfonilo (Tf). Ejemplos adicionales de grupos protectores de hidroxilos se pueden encontrar en el libro Greene and Wuts' "Protective Groups in Organic Synthesis", John Wiley & Sons, Inc., New York, 4th Ed., 2007.
A lo largo de la presente descripción, las expresiones "tratamiento" de una enfermedad, "tratar" una enfermedad u otras expresiones gramaticalmente relacionadas se refieren tanto a tratamiento curativo como tratamiento paliativo o tratamiento profiláctico de dicha enfermedad.
Los compuestos de la presente invención contienen uno o más nitrógenos básicos y podrían por tanto formar sales con ácidos, tanto orgánicos como inorgánicos. Ejemplos de dichas sales incluyen: sales con ácidos inorgánicos como ácido clorhídrico, ácido bromhídrico, ácido yodhídrico, ácido nítrico, ácido perclórico, ácido sulfúrico o ácido fosfórico; y sales con ácidos orgánicos, como ácido metanosulfónico, ácido trifluorometanosulfónico, ácido etanosulfónico, ácido bencenosulfónico, ácido p- toluenosulfónico, ácido fumárico, ácido oxálico, ácido acético, ácido maleico, ácido ascórbico, ácido cítrico, ácido láctico, ácido tartárico, ácido malónico, ácido glicólico, ácido succínico y ácido propiónico, entre otros. Algunos compuestos de la presente invención podrían contener uno o más protones ácidos y por tanto podrían formar también sales con bases. Ejemplos de dichas sales incluyen: sales con cationes inorgánicos como sodio, potasio, calcio, magnesio, litio, aluminio, zinc, etc.; y sales formadas con aminas farmacéuticamente aceptables como amoníaco, alquilaminas, hidroxialquilaminas, lisina, arginina, W-metilglucamina, procaína y similares.
No hay limitación en el tipo de sal que se puede utilizar, con la condición de que cuando se usen con fines terapéuticos sean farmacéuticamente aceptables. Se
entiende por sales farmacéuticamente aceptables aquellas sales que, a criterio médico, son adecuadas para el uso en contacto con los tejidos de seres humanos u otros mamíferos sin provocar una toxicidad indebida, irritación, respuesta alérgica o similar. Las sales farmacéuticamente aceptables son ampliamente conocidas por cualquier experto en la materia.
Las sales de un compuesto de fórmula I-III pueden obtenerse durante el aislamiento final y purificación de los compuestos de la invención o bien pueden prepararse por tratamiento de un compuesto de fórmula I-III con una cantidad suficiente del ácido o la base deseados para dar la sal de una forma convencional. Las sales de los compuestos de fórmula I-III se pueden transformar a su vez en otras sales de compuestos de fórmula I-III por intercambio de iones mediante una resina de intercambio iónico.
Los compuestos de fórmula I-III y sus sales pueden diferir en ciertas propiedades físicas, pero son equivalentes a efectos de la invención. Todas las sales de los compuestos de fórmula I-III quedan incluidas dentro del ámbito de la invención.
Los compuestos de la presente invención pueden formar complejos con disolventes en los que se hacen reaccionar o desde los que se hacen precipitar o cristalizar. Estos complejos se conocen como solvatos. Tal como se utiliza aquí, el término solvato se refiere a un complejo de estequiometría variable formado por un soluto (un compuesto de fórmula I-III o una sal del mismo) y un disolvente. Ejemplos de disolventes incluyen los disolventes farmacéuticamente aceptables como agua, etanol y similares. Un complejo con agua se conoce como hidrato. Los solvatos de los compuestos de la invención (o sus sales), incluyendo hidratos, quedan incluidos dentro del ámbito de la invención.
Los compuestos de fórmula I-III pueden existir en diferentes formas físicas, es decir en forma amorfa y formas cristalinas. Asimismo, los compuestos de la presente invención pueden tener la capacidad de cristalizar de más de una forma, una característica que se conoce como polimorfismo. Los polimorfos se pueden diferenciar por varias propiedades físicas bien conocidas por los entendidos en la materia como por ejemplo sus difractogramas de rayos X, puntos de fusión o solubilidad. Todas las formas físicas de los compuestos de fórmula I-III, incluyendo todas sus formas polimórficas ("polimorfos"), quedan incluidas dentro del ámbito de la presente invención.
Algunos compuestos de la presente invención podrían existir en forma de varios diastereoisómeros y/o varios isómeros ópticos. Los diastereoisómeros pueden separarse mediante técnicas convencionales como la cromatografía o la cristalización fraccionada. Los isómeros ópticos pueden ser resueltos mediante el uso de técnicas convencionales de resolución óptica, para dar los isómeros ópticamente puros. Esta resolución puede realizarse sobre los intermedios de síntesis que sean quirales o bien sobre los productos de fórmula I-III. Los isómeros ópticamente puros también pueden ser obtenidos individualmente empleando síntesis enantioespecíficas. La presente invención cubre tanto los isómeros individuales como sus mezclas (por ejemplo mezclas racémicas o mezclas de diastereoisómeros), tanto si se obtienen por síntesis como mezclándolos físicamente.
La presente invención también se refiere a una composición farmacéutica que comprende un compuesto de la invención (o una sal o solvato farmacéuticamente aceptable del mismo) y uno o más excipientes farmacéuticamente aceptables. Los excipientes deben ser "aceptables" en el sentido de ser compatibles con los demás ingredientes de la composición y de no ser perjudiciales para quien tome dicha composición.
Los compuestos de la presente invención pueden ser administrados en forma de cualquier formulación farmacéutica, la naturaleza de la cual, como es bien sabido, dependerá de la naturaleza del principio activo y de su vía de administración. En principio se puede utilizar cualquier vía de administración, por ejemplo oral, parenteral, nasal, ocular, rectal y tópica.
Las composiciones sólidas para la administración oral incluyen comprimidos, granulados y cápsulas. En cualquier caso el método de fabricación está basado en una mezcla simple, granulación seca o granulación húmeda del principio activo con excipientes. Estos excipientes pueden ser, por ejemplo, diluyentes tales como lactosa, celulosa microcristalina, manitol o hidrogenofosfato cálcico; agentes aglutinantes como por ejemplo almidón, gelatina o polivinilpirrolidona; disgregantes como carboximetilalmidón sódico o croscarmelosa sódica; y agentes lubricantes como por ejemplo estearato magnésico, ácido esteárico o talco. Los comprimidos pueden ser además recubiertos con excipientes adecuados y mediante técnicas conocidas con el objeto de retrasar su disgregación y absorción en el tracto gastrointestinal y así
conseguir una acción sostenida durante un mayor período de tiempo, o simplemente para mejorar sus propiedades organolépticas o su estabilidad. El principio activo puede también ser incorporado por recubrimiento sobre pellets inertes mediante el uso de polímeros filmógenos naturales o sintéticos. También es posible la realización de cápsulas de gelatina blanda, en las que el principio activo se mezcla con agua o con medio oleoso, por ejemplo aceite de coco, parafina líquida o aceite de oliva.
Se pueden obtener polvos y granulados para la preparación de suspensiones orales mediante la adición de agua, mezclando el principio activo con agentes dispersantes o humectantes; suspensantes y conservantes. También pueden añadirse otros excipientes, por ejemplo edulcorantes, aromatizantes y colorantes.
Como formas líquidas para la administración oral se pueden incluir emulsiones, soluciones, suspensiones, jarabes y elixires que contienen diluyentes inertes comúnmente utilizados, tales como agua destilada, etanol, sorbitol, glicerol, polietilenglicoles (macrogoles) y propilenglicol. Dichas composiciones pueden también contener coadyuvantes como agentes humectantes, suspensantes, edulcorantes, aromatizantes, conservantes y reguladores de pH.
Preparaciones inyectables, de acuerdo con la presente invención, para la administración parenteral, comprenden soluciones, suspensiones o emulsiones estériles, en un solvente acuoso o no acuoso como propilenglicol, polietilenglicol o aceites vegetales. Estas composiciones pueden también contener coadyuvantes, como humectantes, emulsionantes, dispersantes y conservantes. Podrían ser esterilizadas por cualquiera de los métodos conocidos o preparadas como composiciones sólidas estériles que serán disueltas en agua o cualquier otro medio inyectable estéril inmediatamente antes de uso. También es posible partir de materias primas estériles y mantenerlas en estas condiciones durante todo el proceso de fabricación.
Para la administración rectal, el principio activo puede ser formulado preferentemente como supositorio en una base oleosa, como por ejemplo aceites vegetales o glicéridos semisintéticos sólidos, o en una base hidrófila como polietilenglicoles (macrogol).
Los compuestos de la invención pueden también ser formulados para su aplicación tópica para el tratamiento de patologías en zonas o órganos accesibles por esta vía, como ojos, piel y tracto intestinal. Las formulaciones incluyen cremas, lociones, geles,
polvos, soluciones y parches en las que el compuesto se encuentra dispersado o disuelto en excipientes adecuados.
Para la administración nasal o por inhalación, el compuesto puede presentarse formulado en forma de aerosol de dónde es convenientemente liberado con el empleo de propelentes adecuados.
La dosificación y la frecuencia de las dosis variarán en función de la naturaleza y gravedad de la enfermedad a tratar, la edad, la condición general y el peso del paciente, así como también del compuesto particular administrado y la vía de administración, entre otros factores. A título de ejemplo, un rango adecuado de dosificación oscila entre alrededor de 0,01 mg/Kg y alrededor de 100 mg/Kg por día, que pueden administrarse como dosis única o en varias tomas.
A lo largo de la descripción y las reivindicaciones la palabra "comprende" y sus variantes no pretenden excluir otras características técnicas, aditivos, componentes o pasos. Para los expertos en la materia, otros objetos, ventajas y características de la invención se desprenderán en parte de la descripción y en parte de la práctica de la invención. Los siguientes ejemplos se proporcionan a modo de ilustración, y no se pretende que sean limitativos de la presente invención.
EJEMPLOS
A continuación se ilustrará la invención mediante unos ensayos realizados por los inventores, que pone de manifiesto la efectividad del producto de la invención.
Cicloaducto 3:
**(Ver fórmula)**
adicionado sobre una suspensión de PtCl2 (83,0 mg, 0,312 mmol, 5 mol%) tris(pentafluorofenil)fosfina (166 mg, 0,312 mmol, 5 mol%) en o-xileno (52 mL)
previamente calentada a 150 °C. La mezcla fue agitada durante 30 minutos y después de completarse la reacción, esta fue enfriada a temperatura ambiente y filtrada sobre Florisil® usando Et2O como eluyente. El filtrado es concentrado a vacío y purificado mediante cromatografía en gel de sílice (SiO2 15-40 pm, 0,1 a 5% Et2O/hexano) para dar el cicloaducto 3 (1,42 g, 71% de rendimiento) y el trieno 4 (100 mg, 5% de rendimiento).
Compuesto 3: Aceite incoloro. Rf = 0,41 (1% Et2O/hexano). [a]D20,1= -24,39 (c 1,0 CHCl3). 1H RMN (500 MHz, CDCl3) 5 5,50 (d, J = 4,8 Hz, 1H), 5,36 (ddt, J = 7,6; 3,9 y
1,9 Hz, 1H), 3,97 (td, J = 8,7 y 6,0 Hz, 1H), 2,94 (d, J = 17,2 Hz, 1H), 2,52 - 2,42 (m, 2H), 2,22 - 2,09 (m, 2H), 1,94 (dtd, J = 12,9; 8,8 y 7,2 Hz, 1H), 1,87 - 1,79 (m, 1H), 1,62 (s, 3H), 1,61 - 1,56 (m, 1H), 1,56 - 1,46 (m, 1H), 0,98 (d, J = 6,7 Hz, 6H), 0,90 (s, 9H), 0,074 (s, 3H), 0,068 (s, 3H). 13C RMN (126 MHz, CDCh) 5 147,45 (C), 139,14 (C), 123,39 (CH), 120,86 (CH), 79,26 (CH), 50,56 (CH), 44,02 (CH), 36,36 (CH), 32,40 (CH2), 29,85 (CH2), 27,79 (CH2), 26,11 (CH3), 23,10 (CH3), 21,56 (CH3), 21,30 (CH3), 18,38 (C), -4,21 (CH3), -4,35 (CH3). EMBR-EI (m/z, I): 307 (M+, 6), 263 (100), 187 (39), 145 (75), 75 (98). EMAR-EI Calculado para C20^aOSi [M]+: 320,2535, encontrado 320,2541. El análisis por cromatografía de gases en Chiraldex G-TA 30 m x 0,25 mm mostró un exceso enantiomérico de 99,1%.
Compuesto 4: Aceite amarillo. Rf = 0,50 (1% Et2O/hexano). [a]D21,5= +76,66 (c 0,97 CHCh). 1H RMN (400 MHz, CDCfe) 5 6,66 (dd, J = 17,3 y 10,8 Hz, 1H), 5,33 (dd, J =
15,1 y 6,9 Hz, 1H), 5,19 (dd, J = 15,5 y 6,9 Hz, 1H), 5,03 (d, J = 17,9 Hz, 1H), 4,87 (d, J = 10,8 Hz, 1H), 3,98 (q, J = 3,7 Hz, 1H), 3,19 (d, J = 7,1 Hz, 1H), 2,53 (dt, J = 17,0 y 8,3 Hz, 1H), 2,40 - 2,27 (m, 1H), 2,27 - 2,19 (m, 1H), 1,85 - 1,80 (m, 1H), 1,77 (s, 3H), 1,64 - 1,59 (m, 1H), 0,95 (s, 3H), 0,94 (s, 3H), 0,86 (s, 9H), 0,04 (s, 6H). 13C RMN (101 MHz, CDCl3) 5 143,56 (C), 138,44 (CH), 137,22 (CH), 127,56 (CH), 126,77 (C), 109,71 (CH2), 79,75 (CH), 54,74 (CH), 32,60 (CH2), 31,06 (CH), 28,84 (CH2), 25,89 (CH3), 22,57 (CH3), 18,17 (C), 14,45 (CH3), -4,56 (CH3), -4,59 (CH3). EMBR (m/z, ESI): 321,26 [M+H]+, 261,18 y 247,16. EMAR-ESI Calculado para C20^?OSi [M+H]+: 321,2608, encontrado 321,2609.
Diol 5:
**(Ver fórmula)**
Una disolución del cicloaducto 3 (564 mg, 1,76 mmol, 1,0 eq.) y NMO (412 mg, 3,52 mmol, 2,0 eq.) en acetona (5 mL) fueron adicionadas sobre una disolución de K2OsO42H2O (194 mg, 0,528 mmol, 30 mol%) y MsNH2 (251 mg, 2,64 mmol, 1,5 eq.) en acetona (35 mL) y agua (4 mL) a temperatura ambiente. La mezcla fue agitada durante 12h, luego Na2SO3 (sat.) (20 mL) fue adicionado y agitado durante 30 min adicionales. La acetona de la mezcla fue concentrada a vacío y la fase acuosa extraída con EtOAc (3* 50 mL). Las fases orgánicas combinadas fueron lavadas con NaCl (sat.), secadas sobre Na2SO4 y filtrado. El filtrado es concentrado a vacío y purificado mediante cromatografía en gel de sílice (SiO2, 10 a 50% EtOAc/hexano) para dar el diol 5 (455 mg, 73% de rendimiento) y el isómero 6 (12 mg, 2% de rendimiento).
Compuesto 5: Espuma blanca. Rf = 0,46 (50% EtOAc/hexano). [a]D21,2 = +52,79 (c 0,99 CHCl3). 1H RMN (500 MHz, CDCh) 5 5,63 (dt, J = 2,8 y 1,3 Hz, 1H), 3,84 (td, J = 8,3 y 6,5 Hz, 1H), 3,58 (t, J = 7,8 Hz, 1H), 2,48 (ddd, J = 16,0; 8,5 y 1,6 Hz, 1H), 2,28 (s, 1H), 2,25 (d, J = 1,5 Hz, 1H), 2,23 - 2,18 (m, 1H), 2,02 - 1,94 (m, 1H), 1,93 - 1,77 (m, 3H), 1,68 (ddd, J = 12,2; 8,2 y 4,1 Hz, 1H), 1,59 (s, 1H), 1,52 - 1,45 (m, 1H), 1,23 (s, 3H), 1,01 (d, J = 4,8 Hz, 3H), 0,99 (d, J = 4,7 Hz, 3H), 0,90 (s, 9H), 0,08 (s, 3H), 0,07 (s, 3H). 13C RMN (126 MHz, CDCh) 5 143,15 (C), 126,58 (CH), 79,81 (CH), 76,40 (C),
75.29 (CH), 48,83 (CH), 45,60 (CH), 37,28 (CH), 33,68 (CH2), 33,19 (CH2), 26,18 (CH3), 22,11 (CH2), 21,78 (CH3), 21,61 (CH3), 19,24 (CH3), 18,42 (C), -4,02 (CH3), -
4.29 (CH3). EMBR (m/z, ESI): 377,24 [M+Na]+, 319,24 y 245,07. EMAR-ESI Calculado para C20H38NaO3Si [M+Na]+: 377,2482, encontrado 377,2484.
Compuesto 6: Espuma café claro. Rf = 0,52 (50% EtOAc/hexano). [a]D21,3= -31,25 (c 0,94 CHCh). 1H RMN (300 MHz, CDCfe) 5 5,58 (d, J = 3,4 Hz, 1H), 3,89 - 3,74 (m, 1H), 3,32 (t, J = 8,6 Hz, 1H), 2,71 (dd, J = 15,0 y 10,0 Hz, 1H), 2,47 - 2,33 (m, 1H), 2,32 (s, 1H), 2,20 (dt, J = 13,2 y 6,6 Hz, 1H), 2,11 (t, J = 3,3 Hz, 1H), 1,98 - 1,75 (m, 2H), 1,67 (s, 1H), 1,64 - 1,57 (m, 2H), 1,50 - 1,42 (m, 1H), 1,20 (s, 3H), 1,00 (d, J = 1,4 Hz, 3H), 0,98 (s, 3H), 0,89 (s, 9H), 0,07 (s, 3H), 0,05 (s, 3H). 13C RMN (126 MHz, CDCl3) 5 143,65 (C), 126,79 (CH), 79,68 (CH), 75,35 (CH), 74,80 (C), 48,18 (CH), 46,31 (CH), 36,67 (CH), 34,39 (CH2), 32,63 (CH2), 26,02 (CH3), 25,76 (CH3), 22,08 (CH2), 21,48 (CH3), 21,09 (CH3), 18,26 (C), -4,18 (CH3), -4,44 (CH3). EMBR (m/z, ESI): 377,24 [M+Na]+, 319,24 y 205,16. EMAR-ESI Calculado para CMH38NaO3Si [M+Na]+: 377,2482, encontrado 377,2481.
Éster 7a:
**(Ver fórmula)** **(Ver fórmula)**
H A)H0H
5 7a
Et3N (5,0 mL, 35,8 mmol, 10,0 eq.), cloruro de pivaloilo (1,32 mL, 10,74 mmol, 3,0 eq.) y DMAP (88,0 mg, 0,72 mmol, 20 mol%) fueron adicionados sucesivamente sobre una disolución del diol 5 (1,27 g, 3,58 mmol, 1,0 eq.) en CHCl3 (120 mL) a 0 °C. La mezcla resultante fue calentada a 65 °C y agitada durante 12 h. Después de terminada la reacción, la mezcla fue enfriada a temperatura ambiente y absorbida directamente en sílice, concentrada a vacío y purificado mediante cromatografía en gel de sílice (SiO2, 5 a 30% EtOAc/hexano con 5% CH2Cl2) para dar 7a (1,56 g, 99% de rendimiento) como un aceite marrón. Rf = 0,60 (50% EtOAc/hexano). [a]D19,2 = +18,07 (c 1,12 CHCl3). 1H RMN (500 MHz, CDCfe) 5 5,54 (d, J = 2,2 Hz, 1H), 4,72 (dd, J = 9,3 y 1,2 Hz, 1H), 3,80 (q, J = 7,6 Hz, 1H), 2,63 (ddd, J = 17,4; 9,2 y 1,7 Hz, 1H), 2,10 (p, J =
7,7 y 7,1 Hz, 1H), 2,05 - 1,97 (m, 3H), 1,91 - 1,73 (m, 2H), 1,74 - 1,61 (m, 1H), 1,53 - 1,42 (m, 1H), 1,27 - 1,23 (m, 1H), 1,22 (s, 3H), 1,21 (s, 9H), 0,96 (d, J = 6,8 Hz, 3H), 0,94 (d, J = 6,7 Hz, 3H), 0,89 (s, 9H), 0,08 (s, 3H), 0,06 (s, 3H). 13C RMN (126 MHz, CDCl3) 5 177,68 (CO), 143,32 (C), 124,68 (CH), 79,66 (CH), 77,74 (CH), 75,75 (C), 48,91 (CH), 45,79 (CH), 39,20 (C), 37,02 (CH), 33,65 (CH2), 30,84 (CH2), 27,42 (CH3), 27,14 (CH3), 26,01 (CH3), 22,00 (CH2), 21,49 (CH3), 19,84 (CH3), 18,24 (C), -4,20 (CH3), -4,45 (CH3). EMBR (m/z, ESI): 461,30 [M+Na]+, 347,22 y 319,24. EMAR-ESI Calculado para C25H46NaO4Si [M+Na]+: 461,3058, encontrado 461,3059.
Ester 7b:
.ou (1.2 eq.)
OH v M' TBSO
**(Ver fórmula)** **(Ver fórmula)**
OPMB
5 77% 7b
EDCI (1,29 g, 6,77 mmol, 3,0 eq.) fue adicionado sobre una disolución del diol 5 (800 mg, 2,26 mmol, 1,0 eq.), ácido 2-(4-metoxibenciloxi)acético (531 mg, 2,71 mmol, 1,2 eq.) y DMAP (27,6 mg, 0,226 mmol, 20 mol%) en CH2Cl2 (45,1 mL) a 0 °C. Después de agitar a temperatura ambiente durante 12 h, se adicionó agua (20 mL) y particionada con EtOAc (100 mL) y agua. La fase orgánica fue lavada con NH4Cl
(sat.), agua y NaCI (sat.), secado sobre Na2SO4, filtrado, concentrado a vacío y purificado mediante cromatografía en gel de sílice (SiO2, 20 a 60% EtOAc/hexano) para dar el éster 7b (927 mg, 77% de rendimiento) como una aceite marrón. Rf = 0,24 (30% EtOAc/hexano). [a]D230= +27,52 (c 0,94 CHCl3). 1H RMN (500 MHz, CDCl3) 5 7,28 (d, J = 8,6 Hz, 2H), 6,88 (d, J = 8,6 Hz, 2H), 5,56 (d, J = 2,3 Hz, 1H), 4,88 (dd, J =
9,1 y 1,2 Hz, 1H), 4,56 (d, J = 2,9 Hz, 2H), 4,08 (d, J = 1,7 Hz, 2H), 3,88 - 3,72 (m,
4H), 2,64 (ddd, J = 16,4; 9,0 y 2,0 Hz, 1H), 2,15 (p, J = 6,8 Hz, 1H), 2,10 - 2,05 (m,
1H), 2,05 - 2,00 (m, 1H), 2,00 - 1,95 (m, 1H), 1,87 - 1,81 (m, 1H), 1,82 - 1,72 (m,
1H), 1,70 - 1,60 (m, 1H), 1,54 - 1,41 (m, 1H), 1,25 (sa, 1H), 1,21 (s, 3H), 0,95 (dd, J =
6,8 y 3,1 Hz, 6H), 0,90 (s, 9H), 0,08 (s, 3H), 0,06 (s, 3H). 13C RMN (126 MHz, CDCl3) 5 170,10 (CO), 159,63 (C), 143,09 (C), 129,93 (CH), 129,27 (C), 125,35 (CH), 114,12 (CH), 79,67 (CH), 78,54 (CH), 75,53 (C), 73,19 (CH2), 67,19 (CH2), 55,49 (CH3), 48,89 (CH), 45,58 (CH), 37,19 (CH), 33,66 (CH2), 30,48 (CH2), 26,09 (CH3), 22,05 (CH2), 21,62 (CH3), 21,39 (CH3), 19,89 (CH3), 18,31 (C), -4,11 (CH3), -4,37 (CH3). EMBR (m/z, ESI): 555,31 [M+Na]+, 515,32 y 449,15. EMAR-ESI Calculado para C30H48NaOa [M+Na]+: 555,3112, encontrado 555,3111.
Alcohol homoalílico 8a:
**(Ver fórmula)**
HFPy (2,78 mL, ~70% en piridina, 21,65 mmol, 10,0 eq.) fue adicionado gota a gota sobre una disolución del sililéter 7a (950 mg, 2,165 mmol, 1,0 eq.) en THF (10 mL) en un tubo tipo Falcón (50 mL). LA mezcla fue agitada durante 4 h a temperatura ambiente. Después de terminada la reacción, la mezcla en enfriada en 0 °C y Na2CO3 (sat.) (20 mL) fue adicionado cuidadosamente. La fase acuosa fue separada y extraída con EtOAc (3* 30 mL). Las fases orgánicas combinadas fueron lavadas con NaCl (sat.), secada sobre Na2SO4, filtrado, concentrado a vacío y purificado mediante cromatografía en gel de sílice (SiO2, 20 a 50% EtOAc/hexano con 10% CH2Cl2) para dar el alcohol 8a como una espuma blanca (630 mg, 90% de rendimiento). Rf = 0,48 (50% EtOAc/hexano). [o]d199 = -1,29 (c 1,0 CHCh). 1H RMN (500 MHz, CDCh) 5 5,59 (s, 1H), 4,73 (dd, J = 9,0 y 1,2 Hz, 1H), 3,92 (q, J = 7,2 Hz, 1H), 2,61 (ddd, J = 16,4; 9,0 y 1,6 Hz, 1H), 2,11 (p, J = 6,8 Hz, 1H), 2,07 - 2,01 (m, 3H), 1,99 - 1,87 (m, 3H), 1,87 - 1,76 (m, 1H), 1,73 (dt, J = 13,6 y 6,7 Hz, 1H), 1,52 (ddt, J = 12,5; 9,3 y 7,2 Hz,
1H), 1,22 (s, 3H), 1,20 (s, 9H), 0,97 (d, J = 6,8 Hz, 3H), 0,93 (d, J = 6,8 Hz, 3H). 13C RMN (126 MHz, CDCI3) 5 177,87 (CO), 144,20 (C), 124,58 (CH), 79,67 (CH), 77,60 (CH), 75,73 (C), 49,21 (CH), 47,14 (CH), 39,32 (C), 37,21 (CH), 33,80 (CH2), 30,65 (CH2), 27,52 (CH3), 22,61 (CH2), 21,52 (CH3), 21,42 (CH3), 19,93 (CH3). EMBR (m/z, ESI): 347,22 [M+Na]+, 236,07 y 205,16. EMAR-ESI Calculado para C19H32NaO4 [M+Na]+: 347,2193, encontrado 347,2198.
Alcohol homoalílico 8b:
**(Ver fórmula)**
OPMB
97% de rendimiento a partir de 7b siguiendo el procedimiento anteriormente descrito para 8a. Rf = 0,18 (50% EtOAc/hexano). [o]d22'3 = -10,28 (c 0,83 CHCfe). 1H RMN (500 MHz, CDCl3) 5 7,26 (d, J = 8,7 Hz, 2H), 6,87 (d, J = 8,6 Hz, 2H), 5,61 (s, 1H), 4,88 (dd, J = 8,9 y 1,2 Hz, 1H), 4,55 (d, J = 4,0 Hz, 2H), 4,07 (d, J = 2,4 Hz, 2H), 3,89 (q, J = 7,2 Hz, 1H), 3,79 (s, 3H), 2,63 (ddd, J = 16,3; 8,8 y 1,4 Hz, 1H), 2,18 (q, J = 7,1 Hz, 1H),
2,09 (d, J = 16,2 Hz, 1H), 2,04 - 1,98 (m, 2H), 1,96 - 1,86 (m, 1H), 1,84 - 1,75 (m,
1H), 1,73 - 1,63 (m, 1H), 1,50 (ddt, J = 12,6; 9,5 y 7,1 Hz, 1H), 1,22 (s, 3H), 0,94 (dd, J = 9,0 y 6,8 Hz, 6H). 13C RMN (126 MHz, CDCI3) 5 170,00 (CO), 159,60 (C), 143,62 (C), 129,82 (CH), 129,05, 125,19 (C), 113,99 (CH), 79,41 (CH), 78,18 (CH), 75,27 (C),
73,08 (CH2), 67,06 (CH2), 55,37 (CH3), 48,87 (CH), 46,64 (CH), 37,15 (CH), 33,55 (CH2), 29,86 (CH2), 22,41 (CH2), 21,35 (CH3), 21,19 (CH3), 19,69 (CH3). EMBR (m/z, ESI): 441,22 [M+Na]+, 419,24 [M+H]+, 401,23 y 307,20. EMAR-ESI Calculado para C24H35O6 [M+Na]+: 419,2428, encontrado 419,2432.
Oxatriciclo 9a y epóxido 10a:
**(Ver fórmula)**
Método A : mCPBA (85,0 mg, 0,370 mmol, 1,2 eq.) fue adicionado sobre una disolución del alcohol en 8a (100 mg, 0,308 mmol, 1,0 eq.) en CHCl3 (10 mL) a temperatura ambiente y calentado a 55 °C durante 5 h. Después de completarse la reacción, la mezcla fue enfriada y NaHCO3 (sat.) (10 mL) fueron adicionados. La fase acuosa fue separada y extraída con CH2Cl2 (3* 10 mL). La fases orgánicas combinadas fueron secadas sobre Na2SO4, filtrada, concentrada a vacío y purificado mediante cromatografía en gel de sílice (SiO2 15-40 pm, 10 a 70% EtOAc/hexano con 10% CH2Cl2) para dar el oxatriciclo 9a (52,0 mg, 50% de rendimiento) y el epóxido 10a (52,0 mg, 50% de rendimiento).
Método B: MMPP (2,05 g, 4,13 mmol, 1,5 eq.) fue adicionado sobre una disolución del alcohol 8a (894 mg, 2,76 mmol, 1,0 eq.) en CH3CN (92 mL). La suspensión resultante fue agitada durante 4 h a 85 °C, enfriado a temperatura ambiente, filtrado y concentra a vacío. El residuo sólido fue disuelto en EtOAc, y la resultante fase orgánica fue lavada con Na2SO3 (10%), NaHCO3 (sat.), agua, secado sobre Na2SO4, filtrada, concentrada a vacío y purificación según la indicaciones descritas en el Método A, para dar el oxatriciclo 9a (470 mg, 50% de rendimiento) y el epóxido 10a (468 mg, 50% de rendimiento).
Método C: El alcohol 8a (440 mg, 1,36 mmol, 1,0 eq.) fue disuelto en una mezcla de CH3CN (6,5 mL) y dimetoximetano (DMM) (13 mL). Luego, una disolución de buffer de Borax [20 mL, 0,05 M de Na2B4O710H2O en 4*10-4 M de acuoso Na2(EDTA)], (nBu)4NHSO4 (0,015 g, 0,04 mmol), y el catalizador de L-Shi (105 mg, 0,407 mmol, 30 mol%) fueron subsecuentemente adicionados. Una disolución de Oxone® (2,5 g, 4,07 mmol, 3,0 eq) en acuoso Na2(EDTA) (12 mL, 4*10-4 M) y una disolución de K2CO3 (1,31 g, 9,49 mmol, 7,0 eq.) en agua (12 mL) fueron adicionados independientemente gota a gota en un periodo de 1,5 h. La mezcla fue agitada a temperatura ambiente durante 12 h, diluido con agua (50 mL) y extraído con EtOAc (4 * 50 mL). Las fases orgánicas combinadas fueron lavadas con NaCl (sat.), secada sobre Na2SO4, filtrada,
concentrada a vacío y purificación según la indicaciones descritas en el Método A, para dar el oxatricíclico 9a (328 mg, 71% de rendimiento) y el epóxido 10a (73 mg, 16% de rendimiento).
Compuesto 9a: Espuma blanca. Rf = 0,28 (50% EtOAc/hexano). [a]D18,8 = -2,69 (c 0,93 CHCl3). 1H RMN (500 MHz, CDCl3) 5 5,02 (dd, J = 7,8 y 2,8 Hz, 1H), 4,07 (td, J = 8,9 y 5,7 Hz, 1H), 3,69 (d, J = 9,1 Hz, 1H), 2,51 (dd, J = 14,5 y 7,8 Hz, 1H), 2,47 (sa, 2H), 2,18 - 2,06 (m, 1H), 1,97 (hept, J = 7,0 Hz, 1H), 1,67 - 1,58 (m, 2H), 1,57 - 1,47 (m, 2H), 1,47 - 1,40 (m, 1H), 1,39 - 1,30 (m, 1H), 1,21 (s, 9H), 1,13 (s, 3H), 1,04 (d, J =
7,1 Hz, 3H), 1,03 (d, J = 7,0 Hz, 3H). 13C RMN (126 MHz, CDCl3) 5 178,20 (CO), 86,09 (C), 84,39 (C), 77,07 (CH), 74,91 (CH), 74,49 (CH), 51,43 (CH), 48,22 (CH), 39,04 (CH2), 38,99 (C), 32,23 (CH2), 31,54 (CH), 27,27 (CH3), 23,54 (CH2), 18,46 (CH3), 18,16 (CH3), 17,17 (CH3). EMBR (m/z, ESI): 341,23 [M+H]+, 239,16 y 221,15. EMAR- ESI Calculado para C19H33O5 [M+H]+: 341,2323, encontrado 341,2320 Compuesto 10a: Sólido amorfo Rf = 0,39 (50% EtOAc/hexano). [a]D21,6= +37,11 (c 1,01 CHCl3). 1H RMN (500 MHz, CDCh) 5 4,60 (dd, J = 10,6 y 1,3 Hz, 1H), 4,15 (q, J = 6,5 Hz, 1H), 3,11 (d, J = 1,0 Hz, 1H), 2,30 (dd, J = 15,6 y 10,6 Hz, 1H), 2,05 (dt, J = 11,5 y
8,6 Hz, 1H), 1,93 - 1,85 (m, 3H), 1,80 - 1,71 (m, 2H), 1,64 (dd, J = 15,6 y 1,4 Hz, 1H), 1,57 (ddd, J = 12,5; 8,6 y 6,3 Hz, 1H), 1,48 (p, J = 6,9 Hz, 1H), 1,24 (s, 9H), 1,11 (s, 3H), 0,96 (d, J = 5,3 Hz, 3H), 0,95 (d, J = 5,0 Hz, 3H). 13C RMN (126 MHz, CDCh) 5 177,46 (CO), 77,02 (CH), 76,75 (CH), 74,68 (C), 65,70 (C), 61,82 (CH), 48,91 (CH), 40,67 (CH), 39,30 (C), 37,52 (CH), 34,76 (CH2), 28,61 (CH2), 27,46 (CH3), 22,76 (CH2), 20,24 (CH3), 18,10 (CH3), 17,28 (CH3). EMBR (m/z, ESI): 363,21 [M+Na]+ y 277,11. EMAR-ESI Calculado para C19H32NaO5 [M+Na]+: 363,2142, encontrado 363,2151.
Oxatriciclo 9b:
**(Ver fórmula)**
OPMB
50% de rendimiento a partir de 8b utilizando el Método B. Rf = 0,32 (50% EtOAc/hexano). [a]D226 = -2,92 (c 0,98 CHCl3). 1H RMN (500 MHz, CD3CN) 5 7,27 (d, J = 8,6 Hz, 2H), 6,89 (d, J = 8,6 Hz, 2H), 5,14 (dd, J = 7,9 y 2,8 Hz, 1H), 4,49 (s, 2H),
4,09 (s, 2H), 3,95 (td, J = 8,8 y 5,6 Hz, 1H), 3,77 (s, 3H), 3,58 (d, J = 9,3 Hz, 1H), 3,08
(s, 1H), 2,86 (s, 1H), 2,48 (dd, J = 14,4 y 7,8 Hz, 1H), 2,07 - 1,99 (m, 1H), 1,92 - 1,87 (m, 1H), 1,68 (ddd, J = 14,5; 2,9 y 1,0 Hz, 1H), 1,62 - 1,55 (m, 1H), 1,49 - 1,38 (m, 2H), 1,38 - 1,33 (m, 1H), 1,29 (dt, J = 12,8 y 9,0 Hz, 1H), 1,06 (s, 3H), 0,99 (t, J = 6,9 Hz, 6H). 13C RMN (126 MHz, CD3CN) 5 171,08 (CO), 160,41 (C), 130,81 (C), 130,67 (CH), 114,66 (CH), 86,91 (C), 84,91 (C), 77,21 (CH), 76,48 (CH), 74,80 (CH), 73,44 (CH2), 67,92 (CH2), 55,88 (CH3), 51,98 (CH), 48,87 (CH), 39,45 (CH2), 32,72 (CH2), 32,42 (CH), 24,04 (CH2), 18,73 (CH3), 18,43 (CH3), 17,53 (CH3). EMBR (m/z, ESI): 457,22 [M+Na]+, 435,24 [M+H]+, 241,12 y 221,15. EMAR-ESI Calculado para C24H34NaO7 [M+Na]+: 457,2197, encontrado 457,2199.
Epóxido 10b:
**(Ver fórmula)**
OPMB
50% de rendimiento a partir de 8b utilizando el Método B. Rf = 0,28 (50% EtOAc/hexano). [a]p22 5 = +24,10 (c 0,97 CHCh). 1H RMN (500 MHz, CDCh) 5 7,28 (d, J = 8,6 Hz, 2H), 6,88 (d, J = 8,6 Hz, 2H), 4,71 (dd, J = 10,7 y 1,3 Hz, 1H), 4,57 (d, J =
5,6 Hz, 2H), 4,16 - 4,04 (m, 3H), 3,79 (s, 3H), 3,11 (s, 1H), 2,32 (dd, J = 15,6 y 10,6
Hz, 1H), 2,19 (sa, 2H), 2,01 (dt, J = 11,4 y 8,7 Hz, 1H), 1,93 - 1,80 (m, 2H), 1,80 - 1,66 (m, 3H), 1,60 - 1,52 (m, 1H), 1,52 - 1,44 (m, 1H), 1,10 (s, 3H), 0,96 (t, J = 7,1 Hz, 6H). 13C RMN (126 MHz, CDCl3) 5 169,61 (CO), 159,71 (C), 129,95 (CH), 128,86 (C), 114,07 (CH), 77,60 (CH), 76,72 (CH), 74,22 (C), 73,24 (CH2), 66,98 (CH2), 65,53 (C), 61,61 (CH), 55,39 (CH3), 48,62 (CH), 40,43 (CH), 37,34 (CH), 34,51 (CH2), 28,67 (CH2), 22,55 (CH2), 20,00 (CH3), 17,90 (CH3), 17,10 (CH3). EMBR (m/z, ESI): 457,22 [M+Na]+, 241,12 y 219,06. EMAR-ESI Calculado para C24H34NaO7 [M+Na]+: 457,2197, encontrado 457,2198.
Tosilato 11a:
**(Ver fórmula)** **(Ver fórmula)**
Cloruro de tosilo (248 mg, 1,30 mmol, 1,5 eq.) y Et3N (181 qL, 1,30 mmol, 1,5 eq.) fueron adicionados sobre una disolución del diol 9a (295 mg, 0,866 mmol, 1,0 eq.) en CH2Cl2 (4 mL). La mezcla fue enfriada en un baño de hielo y se adicionó DMAP (2,65 mg, 2,17 mmol, 2,5 eq.). Después de 10 min el baño de hielo fue retirado y la mezcla agitada a temperatura ambiente durante 12 h. Una disolución de NaHSO4 (30% sat.) fue adicionada y la fase orgánica fue separada y lavada con agua y NaCl (sat.), luego secada sobre Na2SO4, filtrada, concentrada a vacío y el residuo resultante purificado mediante cromatografía en gel de sílice (SiO2, 5 to 30% EtOAc/hexano con 5% CH2Cl2) para dar el tosilato 11a (407 mg, 95% de rendimiento) como una espuma blanca. Rf = 0,61 (50% EtOAc/hexano). [a]D202= -24,41 (c 1,0 CHCl3). 1H RMN (500 MHz, CDCl3) 5 7,79 (d, J = 8,3 Hz, 2H), 7,34 (d, J = 8,0 Hz, 2H), 4,98 (dd, J = 7,9 y 2,8 Hz, 1H), 4,73 (td, J = 9,1 y 5,7 Hz, 1H), 3,68 (d, J = 9,4 Hz, 1H), 2,78 (sa, 1H), 2,50 (dd, J = 14,6 y 7,9 Hz, 1H), 2,44 (s, 3H), 2,06 - 1,90 (m, 2H), 1,74 - 1,61 (m, 3H), 1,61 - 1,53 (m, 1H), 1,51 - 1,41 (m, 1H), 1,38 (td, J = 12,8 y 6,1 Hz, 1H), 1,19 (s, 9H), 1,10 (s, 3H), 1,03 (d, J = 7,0 Hz, 3H), 1,00 (d, J = 6,8 Hz, 3H). 13C RMN (126 MHz, CDCh) 5 177,99 (CO), 145,27 (C), 133,33 (C), 130,04 (CH), 127,94 (CH), 86,08 (C), 84,13 (CH), 83,85 (C), 74,54 (CH), 72,85 (CH), 50,31 (CH), 48,02 (CH), 38,92 (C), 38,86 (CH2), 31,42 (CH), 29,61 (CH2), 27,23 (CH3), 23,31 (CH2), 21,78 (CH3), 18,43 (CH3), 18,02 (CH3), 16,99 (CH3). EMBR (m/z, ESI): 495,24 [M+H]+, 477,23 y 375,16. EMAR- ESI Calculado para C26H39O7S [M+H]+: 495,2411, encontrado 495,2410.
Tosilato 11b:
**(Ver fórmula)**
OPMB
85% de rendimiento a partir de 9b siguiendo el procedimiento anteriormente descrito
para 11a. Rf = 0,59 (50% EtOAc/hexano). [o]d22'4 = -35,77 (c 0,92 CHCh). 1H RMN
(400 MHz, CDCl3) 5 7,80 (d, J = 8,3 Hz, 2H), 7,36 (d, J = 8,1 Hz, 2H), 7,28 (d, J = 8,6
Hz, 2H), 6,88 (d, J = 8,6 Hz, 2H), 5,15 (dt, J = 8,0 y 3,4, 3,0 Hz, 1H), 4,75 (td, J = 9,1 y
5,6 Hz, 1H), 4,56 (s, 2H), 4,07 (s, 2H), 3,80 (s, 3H), 3,70 (dd, J = 9,4 y 2,6 Hz, 1H),
2.85 (d, J = 3,0 Hz, 1H), 2,54 (dd, J = 14,7 y 8,0 Hz, 1H), 2,45 (s, 3H), 2,09 - 1,90 (m,
2H), 1,75 - 1,65 (m, 3H), 1,65 - 1,54 (m, 1H), 1,52 - 1,44 (m, 1H), 1,44 - 1,35 (m,
1H), 1,10 (s, 3H), 1,02 (dd, J = 10,2 y 6,9 Hz, 6H). 13C RMN (101 MHz, CDCl3) 5
170,26 (CO), 159,63 (C), 145,34 (C), 133,25 (C), 130,07 (CH), 129,85 (CH), 129,19
(C), 127,95 (CH), 114,01 (CH), 86,21 (C), 84,02 (CH), 83,79 (C), 75,31 (CH), 73,12 (CH2), 72,74 (CH), 66,86 (CH2), 55,40 (CH3), 50,32 (CH), 47,87 (CH), 38,65 (CH2), 31,79 (CH), 29,59 (CH2), 23,29 (CH2), 21,81 (CH3), 18,39 (CH3), 18,15 (CH3), 17,17 (CH3). EMBR (m/z, ESI): 612,23 [M+Na]+, 589,25 [M+H]+, 571,21 y 439,21. EMAR-ESI Calculado para C31H41O9S [M+H]+: 589,2466, encontrado 589,2467.
Diol 12a y alqueno 12b:
**(Ver fórmula)**
Una disolución de MeLi (2,0 mL, 1,6 M en Et2O, 3,24 mmol, 20,0 eq.) fue adicionada gota a gota sobre una suspensión de CuBrSMe2 (332 mg, 1,62 mmol, 10,0 eq.) en Et2O (3,0 mL) a -15 °C y agitada durante 30 min. Luego, una disolución del tosilato 11a (80,0 mg, 0,162 mmoles, 1,0 eq.) en Et2O (3,0 mL) fue adicionada. La suspensión resultante fue agitada durante 2 h a temperatura ambiente, luego enfriada a 0 °C y una disolución de MeLi (1,0 mL, 1,6 M en Et2O, 1,62 mmol, 10,0 eq.) fue adicionada gota a gota. La mezcla resultante fue agitada durante una hora adicional, luego enfriada en un baño de hielo y se adicionó cuidadosamente agua (2 mL), seguido de NH4Cl (sat.). La mezcla fue extraída con EtOAc (3* 20 mL), secada sobre Na2SO4, filtrada y concentrada a vacío. El residuo resultante purificado mediante cromatografía en gel de sílice (SiO2 15-40 ^m, 20 to 50% EtOAc/hexano con 10% CH2Cl2) para dar 12a (31,3 mg, 76% de rendimiento) y la olefina 12b (3,5 mg, 9% de rendimiento). Compuesto 12a: Sólido blanco. Rf = 0,39 (50% EtOAc/hexano). [a]D19,2= -53,71 (c 1,0 CHCh). 1H RMN (500 MHz, CDCfe) 5 3,93 (dd, J = 7,6 y 2,5 Hz, 1H), 3,63 (d, J = 10,2
Hz, 1H), 2,46 (dd, J = 14,5 y 7,6 Hz, 1H), 2,30 (ddd, J = 15,5; 7,1 y 2,7 Hz, 1H), 2,05 - 1,92 (m, 2H), 1,72 - 1,64 (m, 1H), 1,62 - 1,54 (m, 2H), 1,25 (sa, 2H), 1,23 (s, 3H), 1,23 - 1,16 (m, 2H), 1,13 - 1,06 (m, 1H), 1,06 (d, J = 6,9 Hz, 6H), 0,89 (d, J = 7,2 Hz, 3H). 13C RM N (126 MHz, CDCfe) 5 85,62 (C), 85,26 (C), 73,43 (CH), 70,97 (CH), 47,96 (CH), 47,86 (CH), 41,93 (CH2), 32,13 (CH), 31,53 (CH2), 30,61 (CH), 25,94 (CH2), 19,39 (CH3), 18,38 (CH3), 17,57 (CH3), 17,09 (CH3). EMBR (m/z, ESI): 277,12 [M+Na]+, 237,18 y 201,16. EMAR-ESI Calculado para C15H26NaO3 [M+Na]+: 277,1774, encontrado 277,1772.
Compuesto 12b: Sólido blanco. Rf = 0,36 (50% EtOAc/hexano). [a]D22,3= -144,26 (c 0,64 CHCl3). 1H RMN (300 MHz, CDCl3) 5 6,10 (dt, J = 5,9 y 1,3 Hz, 1H), 5,84 (ddd, J
= 5,9; 4,4 y 2,9 Hz, 1H), 4,20 - 4,02 (m, 1H), 3,61 (dd, J = 10,6 y 3,6 Hz, 1H), 2,53 (dd, J = 14,6 y 7,4 Hz, 1H), 2,23 (dddd, J = 14,2; 6,1; 3,1 y 0,7 Hz, 1H), 2,17 - 2,03 (m, 1H), 1,99 (p, J = 7,0 Hz, 1H), 1,95 - 1,77 (m, 1H), 1,74 (dd, J = 12,3 y 6,1 Hz, 1H), 1,64 (dd, J = 14,6 y 2,6 Hz, 1H), 1,58 (sa, 1H), 1,50 - 1,39 (m, 1H), 1,25 (s, 3H), 1,06 (dd, J = 6,9 y 1,1 Hz, 6H). 13C RMN (75 MHz, CDCl3) 132,72 (CH), 131,96 (CH), 86,54 (C), 84,52 (C), 74,28 (CH), 72,64 (CH), 55,01 (CH), 49,37 (CH), 42,10 (CH2), 32,49 (CH2), 31,84 (CH), 18,76 (CH3), 18,41 (CH3), 17,40 (CH3). EMBR (m/z, ESI): 261,14 [M+Na]+, 239,23 [M+H]+, 221,15 y 161,03. EMAR-ESI Calculado para C14H22NaO3 [M+Na]+: 261,1461, encontrado 261,1449.
Alcohol 13a:
**(Ver fórmula)**
OPMB
EDCI (31,7 mg, 0,165 mmol, 2,0 eq.) fue adicionado sobre una disolución del diol 12a (21,0 mg, 0,083 mmol, 1,0 eq.), ácido 2-(4-metoxibenciloxi)acético (17,8 mg, 0,091 mmol, 1,1 eq.) y DMAP (2,0 mg, 0,017 mmol, 20 mol%) en CH2Cl2 (1,0 mL) a 0 °C. Después de agitar a temperatura ambiente durante 1 h, se adicionó agua (2 mL) y particionada con EtOAc (30 mL) y agua (5 mL). La fase orgánica fue lavada con NH4Cl (sat.) (5 mL), agua (5 mL) y NaCl (sat.) (5 mL), secado sobre Na2SO4, filtrado, concentrado a vacío y purificado mediante cromatografía en gel de sílice (SiO2, 5 a 30% EtOAc/hexano) para dar el éster 13a (28,9 mg, 83% de rendimiento) como una aceite incoloro. Rf = 0,61 (50% EtOAc/hexano). [a]D231= -30,31 (c 0,92 CHCl3). 1H RMN (300 MHz, CDCl3) 5 7,29 (d, J = 8,2 Hz, 2H), 6,88 (d, J = 8,3 Hz, 2H), 5,12 (dd, J
= 7,9 y 2,9 Hz, 1H), 4,57 (s, 2H), 4,08 (s, 2H), 3,80 (s, 3H), 3,65 (d, J = 10,1 Hz, 1H), 2,46 (dd, J = 14,5 y 7,9 Hz, 1H), 2,38 - 2,25 (m, 1H), 2,10 - 1,88 (m, 2H), 1,77 - 1,60 (m, 2H), 1,57 (dd, J = 12,7 y 7,1 Hz, 1H), 1,37 (sa, 1H), 1,32 (dt, J = 10,2 y 3,1 Hz, 1H), 1,27 - 1,18 (m, 2H), 1,16 (s, 3H), 1,05 (dd, J = 6,9 y 2,8 Hz, 6H), 0,89 (d, J = 7,1 Hz, 3H). 13C RMN (75 MHz, CDCh) 5 170,33 (CO), 159,63 (C), 129,88 (CH), 129,29 (C), 114,03 (CH), 86,05 (C), 84,52 (C), 75,81 (CH), 73,12 (CH2), 70,75 (CH), 66,95 (CH2), 55,42 (CH3), 48,10 (CH), 48,04 (CH), 38,70 (CH2), 32,25 (CH), 31,42 (CH2), 30,65 (CH), 25,65 (CH2), 19,17 (CH3), 18,41 (CH3), 17,53 (CH3), 16,99 (CH3). EMBR (m/z, ESI): 455,24 [M+Na]+, 403,22 y 373,25. EMAR-ESI Calculado para C^aNaOa [M+Na]+: 455,2404, encontrado 455,2403.
(-)-englerin A (1a):
**(Ver fórmula)**
Sobre una disolución del ácido (E)-cinámico (28,8 mg, 0,194 mmol, 3,0 eq.) y Et3N (54 qL, 0,388 mmol, 6,0 eq.) en tolueno (0,5 mL) a 0 °C se adicionó cloruro de 2,4,6- triclorobenzoílo (30 qL, 0,194 mmol, 3,0 eq.) y la mezcla resultante fue agitada a temperatura ambiente durante 2 h. Luego, una disolución de compuesto 13a (28,0 mg, 0,065 mmol, 1,0 eq.) en tolueno (0,5 mL) fue adicionada seguido de DMAP (47,4 mg, 0,388 mmol) y la mezcla calentada a 80 °C durante 30 min. Después de terminada la reacción, la mezcla fue llevada temperatura ambiente, NaHCO3 (sat.) fue adicionado y la mezcla fue particionada con EtOAc (30 mL) y agua (5 mL). La fase orgánica fue lavada con NH4Cl (sat.) (5 mL), agua (5 mL) y NaCl (sat.) (5 mL), y secado sobre Na2SO4, filtrado, concentrado a vacío y purificado mediante cromatografía en gel de sílice (SiO2, 5 a 20% EtOAc/hexano) para dar el correspondiente diéster 14a (36,4 mg, 100%) como un aceite incoloro. Rf = 0,40 (20% EtOAc/hexano). [a]D24,4= -40,62 (c 0,81 CHCl3). 1H RMN (400 MHz, CDCl3) 5 7,66 (d, J = 16,0 Hz, 1H), 7,53 (dd, J = 6,7 y 3,0
Hz, 2H), 7,43 - 7,34 (m, 3H), 7,31 (d, J = 8,6 Hz, 2H), 6,89 (d, J = 8,6 Hz, 2H), 6,39 (d, J = 15,9 Hz, 1H), 5,20 (dd, J = 7,9 y 3,0 Hz, 1H), 5,13 (d, J = 10,2 Hz, 1H), 4,59 (s, 2H), 4,10 (s, 2H), 3,81 (s, 3H), 2,67 (dd, J = 14,5 y 7,9 Hz, 1H), 2,14 (h, J = 7,1 Hz, 1H), 2,02 - 1,93 (m, 1H), 1,89 (p, J = 7,1 Hz, 1H), 1,83 - 1,67 (m, 3H), 1,58 - 1,51 (m, 1H), 1,35 - 1,23 (m, 2H), 1,21 (s, 3H), 1,01 (d, J = 6,8 Hz, 3H), 0,95 (dd, J = 9,4 y 7,1 Hz, 6H). 13C RMN (101 MHz, CDCh) 5 170,21 (CO), 165,56 (CO), 159,49 (C), 145,10 (CH), 134,24 (C), 130,35 (CH), 129,71 (CH), 129,07 (C), 128,86 (CH), 128,08 (CH), 117,97 (CH), 113,86 (CH), 85,43 (C), 84,49 (C), 75,52 (CH), 72,98 (CH2), 71,19 (CH), 66,78 (CH2), 55,25 (CH3), 47,49 (CH), 46,89 (CH), 39,92 (CH2), 32,95 (CH), 31,16
(CH), 30,92 (CH2), 24,55 (CH2), 19,02 (CH3), 18,18 (CH3), 17,44 (CH3), 16,87 (CH3). EMBR (m/z, ESI): 585,28 [M+Na]+, 437,23 y 389,20. EMAR-ESI Calculado para C34H42NaO7 [M+Na]+: 585,2823, encontrado 585,2815.
Sobre una disolución del diéster 14a (20,2 mg, 0,036 mmol, 1,0 eq.) en CH2Cl2 (0,38 mL) y agua (19 pL) a 0 °C se adicionó DDQ (40,7 mg, 0,179 mmol, 5,0 eq.). La mezcla resultante fue agitada durante 7 h a temperatura ambiente. Una vez finalizada la reacción, NaHCO3 (sat.) (2 mL) fue adicionado y particionado con EtOAc (40 mL) y agua (5 mL). La fase orgánica fue lavada con NaHCO3 (sat.) (5 mL), agua (5 mL) y NaCl (sat.) (5 mL), y secado sobre Na2SO4, filtrado, concentrado a vacío y purificado mediante cromatografía en gel de sílice (SiO2, 10 a 20% EtOAc/hexano) obteniéndose la (-)-englerina A (1a) (15,9 mg, 100%) como un sólido blanco amorfo. Rf = 0,36 (20% EtOAc/hexano). [a]o186= -47,86 (c 0,21 MeOH). 1H RMN (500 MHz, CD3OD) 5 7,69 (d, J = 16,0 Hz, 1H), 7,64 - 7,57 (m, 2H), 7,43 - 7,37 (m, 3H), 6,51 (d, J = 16,0 Hz, 1H), 5,26 (dd, J = 8,0 y 3,0 Hz, 1H), 5,12 (d, J = 10,1 Hz, 1H), 4,15 (s, 2H), 2,70 (dd, J = 14,5 y 8,0 Hz, 1H), 2,13 (h, J = 7,0 Hz, 1H), 2,03 - 1,95 (m, 1H), 1,91 - 1,81 (m, 2H), 1,79 - 1,72 (m, 2H), 1,70 - 1,65 (m, 1H), 1,35 - 1,24 (m, 3H), 1,19 (s, 3H), 1,01 (d, J =
6,8 Hz, 3H), 0,96 (d, J = 7,1 Hz, 3H), 0,93 (d, J = 7,1 Hz, 3H). 13C RMN (126 MHz, CD3OD) 5 173,96 (CO), 167,31 (CO), 146,78 (CH), 135,65 (C), 131,64 (CH), 130,06 (CH), 129,33 (CH), 118,79 (CH), 86,67 (C), 86,05 (C), 76,63 (CH), 72,45 (CH), 61,03 (CH2), 48,91 (CH), 48,01 (CH), 40,71 (CH2), 34,09 (CH), 32,46 (CH), 32,00 (CH2), 25,52 (CH2), 19,24 (CH3), 18,58 (CH3), 17,74 (CH3), 17,24 (CH3). EMBR (m/z, ESI): 465,22 [M+Na]+, 443,23 [M+H]+, 425,23 y 219,16. EMAR-ESI Calculado para C2aH34NaOa [M+Na]+: 465,2248, encontrado 465,2246.
Sustituciones SN2 con cupratos (A)2CuLiSMe2 (12c-e):
Se preparó siguiendo el mismo procedimiento usado anteriormente para la preparación de la 11a, pero utilizando el cuprato correspondiente obtenido a partir del alquillitio deseado (A-Li) y CuBrSMe2.
**(Ver fórmula)** **(Ver fórmula)** **(Ver fórmula)** **(Ver fórmula)** **(Ver fórmula)**
39% de rendimiento. Rf = 0,37 (20% EtOAc/hexano). [a]o22'3= -22,30 (c 0,91 CHCI3). 1H RMN (300 MHz, CDCl3) 5 3,92 (dd, J = 7,6 y 2,5 Hz, 1H), 3,67 (d, J = 10,2 Hz, 1H),
2,45 (dd, J = 14,5 y 7,6 Hz, 1H), 2,15 - 2,03 (m, 1H), 1,98 (dt, J = 13,8 y 6,9 Hz, 1H), 1,92 - 1,79 (m, 1H), 1,73 - 1,63 (m, 1H), 1,63 - 1,58 (m, 1H), 1,58 - 1,49 (m, 2H), 1,49 - 1,39 (m, 3H), 1,39 - 1,24 (m, 6H), 1,21 (s, 3H), 1,06 (d, J = 6,9 Hz, 6H), 1,02 - 0,94 (m, 1H), 0,89 (t, J = 7,1 Hz, 3H). 13C RMN (75 MHz, CDCI3) 5 85,65 (C), 85,27 (C), 73,36 (CH), 70,85 (CH), 48,76 (CH), 48,05 (CH), 41,90 (CH2), 36,45 (CH), 32,12 (CH), 30,67 (CH2), 30,17 (CH2), 28,84 (CH2), 26,11 (CH2), 23,15 (CH2), 19,39 (CH3), 18,39 (CH3), 17,57 (CH3), 14,33 (CH3). EMBR (m/z, ESI): 319,22 [M+Na]+, 290,15 y 282,27. EMAR-ESI Calculado para C18H32NaO3 [M+Na]+: 319,2244, encontrado 219.2237.
Diol 12d:
**(Ver fórmula)**
41% de rendimiento. Rf = 0,41 (50% EtOAc/hexano). [a]D216= -58,21 (c 0,99 CHCI3). 1H RMN (400 MHz, CDCI3) 5 3,92 (t, J = 5,9 Hz, 1H), 3,65 (d, J = 10,2 Hz, 1H), 2,44 (dd, J
= 14,5, 7,6 Hz, 1H), 2,22 (dtt, J = 11,4, 7,6, 3,4 Hz, 1H), 1,98 (hept, J = 7,0 Hz, 1H), 1,91 - 1,78 (m, 1H), 1,72 - 1,62 (m, 1H), 1,65 - 1,47 (m, 3H), 1,44 (d, J = 6,9 Hz, 1H), 1,38 - 1,23 (m, 3H), 1,21 (s, 3H), 1,21 - 1,12 (m, 1H), 1,10 (d, J = 10,5 Hz, 1H), 1,06
(d, J = 6,8 Hz, 6H), 1,03 - 0,97 (m, 1H), 0,91 (d, J = 6,6 Hz, 3H), 0,85 (d, J = 6,5 Hz, 3H). 13C RMN (101 MHz, CDCI3) 5 85,64 (C), 85,25 (C), 73,34 (CH), 70,74 (CH), 48,78 (CH), 47,96 (CH), 41,91 (CH2), 40,10 (CH2), 33,70 (CH), 32,20 (CH), 28,70 (CH2), 26,12 (CH2), 25,60 (CH), 24,36 (CH3), 21,67 (CH3), 19,39 (CH3), 18,39 (CH3), 17,58 (CH3). EMBR (m/z, ESI): 319,22 [M+Na]+, 261,22 y 243,21. EMAR-ESI CaIcuIado para C18H32NaO3 [M+Na]+: 319,2244, encontrado 319,2245.
Diol 12e:
nHex
**(Ver fórmula)**
35% de rendimiento. Rf = 0,49 (50% EtOAc/hexano). [a]D24 4= -73,86 (c 0,49 CHCl3). 1H RMN (400 MHz, CDCfe) 5 3,92 (d, J = 5,9 Hz, 1H), 3,67 (d, J = 10,2 Hz, 1H), 2,45 (dd, J = 14,5 y 7,6 Hz, 1H), 2,15 - 2,01 (m, 1H), 1,98 (p, J = 6,9 Hz, 1H), 1,92 - 1,79 (m, 1H), 1,71 - 1,62 (m, 1H), 1,61 - 1,49 (m, 3H), 1,48 - 1,41 (m, 1H), 1,41 - 1,22 (m, 11H), 1,22 (s, 3H), 1,18 - 1,10 (m, 1H), 1,06 (d, J = 6,9 Hz, 6H), 1,03 - 0,91 (m, 1H), 0,88 (t, J = 6,6 Hz, 3H). 13C RMN (101 MHz, CDCI3) 5 85,64 (C), 85,27 (C), 73,37 (CH), 70,85 (CH), 48,77 (CH), 48,04 (CH), 41,90 (CH2), 36,48 (CH), 32,11 (CH), 32,08 (CH2), 31,02 (CH2), 29,79 (CH2), 28,85 (CH2), 27,91 (CH2), 26,11 (CH2), 22,82 (CH2), 19,39 (CH3), 18,39 (CH3), 17,56 (CH3), 14,24 (CH3). EMBR (m/z, ESI): 347,28 [M+Na]+, 307,26 y 289,25. EMAR-ESI Calculado para C20H3aNaO3 [M+Na]+: 347,2557, encontrado 347,2557.
Diol 12f:
**(Ver fórmula)** **(Ver fórmula)** **(Ver fórmula)**
OPMB
Una disolución de MeLi (465 pL mL, 1,6 M en Et2O, 0,679 mmol, 20,0 eq.) fue adicionada gota a gota sobre una suspensión de CuI (64,7 mg, 0,340 mmol, 10,0 eq.) en Et2O (1,0 mL) a -15 °C y agitada durante 30 min. Luego, una disolución del tosilato 11b (20,0 mg, 0,034 mmoles, 1,0 eq.) en Et2O (1,0 mL) fue adicionada. La suspensión resultante fue agitada durante 2 h a 0°C, luego enfriada a 0 °C, luego enfriada en un baño de hielo y se adicionó agua (2 mL), seguido de NH4Cl (sat.). La mezcla fue extraída con EtOAc (3* 20 mL), secada sobre Na2SO4, filtrada y concentrada a vacío. El residuo resultante purificado mediante cromatografía en gel de sílice (SiO2, 20 to 50% EtOAc/hexano con 10% CH2Cl2) para dar 12f (3,1 mg, 25% de rendimiento). Rf = 0,34 (50% EtOAc/hexano). 1H RMN (500 MHz, CDCl3) 5 4,71 (ddd, J = 7,0; 4,8 y 1,4 Hz, 1H), 3,97 (q, J = 6,0 Hz, 1H), 3,59 (d, J = 9,1 Hz, 1H), 2,78
- 2,59 (m, 1H), 2,53 (dd, J = 14,7 y 7,6 Hz, 1H), 2,49 - 2,37 (m, 1H), 2,02 - 1,93 (m, 2H), 1,92 - 1,83 (m, 1H), 1,71 (ddd, J = 14,7; 2,6 y 1,0 Hz, 1H), 1,56 (sa, 2H), 1,32 - 1,29 (m, 1H), 1,27 (s, 3H), 1,07 (dd, J = 7,0 y 1,6 Hz, 6H), 0,38 (ddd, J = 13,3; 8,9 y
4,8 Hz, 1H). 13C RMN (126 MHz, CDCl3) 5 85,39 (C), 85,00 (C), 76,17 (CH), 73,63 (CH), 50,62 (CH), 48,62 (CH), 42,57 (CH2), 37,01 (CH2), 34,98 (CH), 31,92 (CH), 25,01 (CH2), 19,23 (CH3), 18,34 (CH3), 17,48 (CH3).
Diol 12g:
**(Ver fórmula)** **(Ver fórmula)** **(Ver fórmula)**
OPMB
Sobre una disolución del tosilo 11b (50,0 mg, 0,085 mmol, 1,0 eq.) en THF (1,7 mL) a temperatura ambiente se adicionó gota a gota una disolución de TBAF (297 ^L, 1,0 M en THF, 0,297 mmol, 3,5 eq.). La mezcla resultante fue calentada a 65 °C durante 2 h, luego enfriada a temperatura ambiente y diluida con NaCl (sat.) (20 mL). La fase acuosa fue extraída con EtOAc (3x 10 mL). Las fases orgánicas combinadas fueron secadas sobre Na2SO4, filtrada, concentrada a vacío y purificada mediante cromatografía en gel de sílice (SiO2, 20 a 50% EtOAc/hexano) para dar el correspondiente fluoruro 12g (11,2 mg, 51% de rendimiento). Rf = 0,35 (50% EtOAc/hexano). [a]p22 4 = -30,17 (c 0,74 CHCfe). 19F RMN (282 MHz, CDCfe) 5 -183,95 (dq, J = 56,7 y 33,2 Hz). 1H RMN (500 MHz, CDCfe) 5 5,17 (ddd, J = 56,1; 5,4 y 3,3 Hz, 1H), 3,93 (dd, J = 7,6 y 2,6 Hz, 1H), 3,86 (d, J = 9,9 Hz, 1H), 2,46 (dd, J = 14,8 y 7,5 Hz, 1H), 2,17 - 2,03 (m, 1H), 1,99 (h, J = 7,0 Hz, 1H), 1,94 - 1,74 (m, 3H), 1,73 - 1,53 (m, 3H), 1,45 (s, 1H), 1,26 (s, 3H), 1,16 - 1,09 (m, 1H), 1,06 (d, J = 7,0 Hz, 6H).
13C RMN (75 MHz, CDCfe) 5 93,03 (CH, d, J = 177,9 Hz), 85,60 (C), 84,94 (C), 73,27 (CH), 68,46 (CH), 50,66 (CH, d, J = 20,8 Hz), 47,20 (CH), 41,84 (CH2), 31,76 (CH), 31,67 (CH2, d, J = 22,1 Hz), 24,37 (CH2), 19,23 (CH3), 18,33 (CH3), 17,43 (CH3). EMBR (m/z, ESI): 261,15 [M-HF+Na]+. EMAR-ESI Calculado para CuH22NaO3 [M- HF+Na]+: 261,1461, encontrado 261,1462.
Azida 13h:
**(Ver fórmula)**
OPMB
**(Ver fórmula)** **(Ver fórmula)**
OPMB
H / 'O-
11b /u 13h
Sobre una disolución del tosilato 11b (40,0 mg, 0,068 mmol, 1,0 eq.) en DMF (0,5 mL) se adicionó NaN3 (4,9 mg, 0,075 mmol, 1,1 eq.). La mezcla se calentó durante 14 h a 60 °C, luego se enfrio a temperatura ambiente, se adicionó agua (10 mL) y se extrajo con EtOAc (3x 10 mL). La fase orgánica fue secada sobre Na2SO4, filtrada, concentrada a vacío y purificada mediante cromatografía en gel de sílice (SiO2, 20 a 50% EtOAc/hexano) para dar la correspondiente azida 13h (27,0 mg, 87% de rendimiento). Rf = 0,54 (50% EtOAc/hexano). [a]D220 = -49,70 (c 0,90 CHCl3). 1H RMN (300 MHz, CDCl3) 5 7,29 (d, J = 8,6 Hz, 2H), 6,88 (d, J = 8,6 Hz, 2H), 5,10 (dd, J = 8,0 y 2,9 Hz, 1H), 4,57 (s, 2H), 4,21 (dd, J = 6,5 y 4,8 Hz, 1H), 4,08 (s, 2H), 3,80 (s, 3H),
3,48 (q, J = 7,0 Hz, 1H), 2,44 (dd, J = 14,6 y 7,9 Hz, 1H), 2,12 (td, J = 11,9 y 6,6 Hz, 1H), 1,98 (p, J = 6,9 Hz, 1H), 1,87 - 1,67 (m, 4H), 1,38 - 1,25 (m, 2H), 1,20 (t, J = 7,0 Hz, 1H), 1,16 (s, 3H), 1,05 (dd, J = 6,9 y 3,6 Hz, 6H). 13C RMN (75 MHz, CDCl3) 5 170,34 (CO), 159,66 (C), 129,87 (CH), 129,21 (C), 114,04 (CH), 85,96 (C), 84,26 (C), 75,46 (CH), 73,15 (CH2), 69,55 (CH), 66,89 (CH2), 61,40 (CH), 55,42 (CH3), 49,86 (CH), 47,90 (CH), 38,50 (CH2), 31,85 (CH), 29,72 (CH2), 24,24 (CH2), 18,95 (CH3), 18,38 (CH3), 17,40 (CH3). EMBR (m/z, ESI): 482,23 [M+Na]+, 440,21 y 236,16. EMAR- ESI Calculado para C24H33N3NaO6 [M+Na]+: 482,2262, encontrado 482,2261.
Pivalato 15g:
**(Ver fórmula)**
H / oPiv 15g
42% de rendimiento, a partir del tosilato 11a siguiendo el procedimiento más arriba indicado para la síntesis de 12g a partir de 11b. Rf = 0,49 (20% EtOAc/hexano). [o]d235= -48,41 (c 0,73 CHCl3). 19F RMN (282 MHz, CDCh) 5 166,56 (dq, J = 56,1 y 33,7 Hz). 1H RMN (500 MHz, CD2Ch) 5 5,16 (ddd, J = 56,2; 5,4 y 3,3 Hz, 1H), 4,93 (dd, J = 7,8 y 2,8 Hz, 1H), 3,83 (dd, J = 10,0 y 1,0 Hz, 1H), 2,41 (dd, J = 14,7 y 7,8 Hz, 1H), 2,19 - 2,03 (m, 1H), 1,98 (h, J = 6,9 Hz, 1H), 1,92 - 1,85 (m, 1H), 1,84 - 1,74 (m, 3H), 1,63 (ddt, J = 14,7; 2,9 y 1,1 Hz, 1H), 1,26 - 1,22 (m, 1H), 1,20 (s, 9H), 1,19 (s,
3H), 1,14 (ddd, J = 13,5; 10,1 y 3,3 Hz, 1H), 1,03 (dd, J = 6,9 y 4,7 Hz, 6H). 13C RMN (126 MHz, CD2CI2) 5 178,26 (CO), 93,61 (CH, d, J = 177,5 Hz), 86,33 (C), 84,69 (C), 75,16 (CH), 68,75, (CH) 51,38 (CH, d, J = 20,3 Hz), 48,05 (CH), 39,29 (C), 39,21 (CH2), 32,09 (CH2, d, J = 21,8 Hz), 31,86 (CH), 27,47 (CH3), 24,52 (CH2), 19,33 (CH3), 18,41 (CH3), 17,42 (CH3). EMBR (m/z, ESI): 365,27 [M+Na]+, 343,26 [M+H]+ y 202,22.
Pivalato 15h:
**(Ver fórmula)**
87% de rendimiento, a partir del tosilato 11a siguiendo el procedimiento más arriba indicado para la síntesis de 13h a partir de 11b. R f = 0,17 (20% EtOAc/hexano), [q]d23 3= -89,15 (c 0,99 CHG3). 1H RMN (400 MHz, CDCfe) 5 4,92 (dd, J = 7,8 y 2,8 Hz, 1H), 4,21 (t, J = 5,6 Hz, 1H), 3,82 (d, J = 9,6 Hz, 1H), 2,41 (dd, J = 14,6 y 7,8 Hz, 1H), 2,19 - 2,05 (m, 1H), 1,98 (hept, J = 7,0 Hz, 1H), 1,87 - 1,74 (m, 2H), 1,74 - 1,55 (m, 3H), 1,36 - 1,26 (m, 2H), 1,20 (s, 9H), 1,18 (s, 3H), 1,05 (t, J = 6,5 Hz, 6H). 13C RMN (101 MHz, CDCl3) 5 178,20 (CO), 85,85 (C), 84,35 (C), 74,70 (CH), 69,65 (CH), 61,43 (CH), 49,90 (CH), 48,06 (CH), 38,99 (C), 38,73 (CH2), 31,50 (CH), 29,72 (CH2), 27,26 (CH3), 24,28 (CH2), 19,01 (CH3), 18,26 (CH3), 17,23 (CH3).EMBR (m/z, ESI): 388,22 [M+Na]+, 338,34 y 282,28. EMAR-ESI Calculado para C^H3^3NaO4 [M+Na]+: 388,2207, encontrado 388,2204.
Pivalato 15i:
**(Ver fórmula)** **(Ver fórmula)** **(Ver fórmula)**
CH2CI2 ta., 12 h 43%
Sobre una disolución del oxatriciclo 9a (30,0 mg, 0,088 mmol, 1,0 eq.) en CH2Cl2 (1,0 mL) a temperatura ambiente se adicionó Dess-Martin periodinano (37,4 mg, 0,088 mmol, 1,0 eq.). La mezcla resultante fue agitada a temperatura ambiente durante 12 h. Luego se añadió una solución saturada de Na2S2O3:NaHCO3 (1:1), y se extrajo con
CH2CI2 (3x 10 mL). La fase orgánica secada sobre Na2SO4, filtrada, concentrada a vacío y purificada mediante cromatografía en gel de sílice (SiO2, 30 a 80% EtOAc/hexano) para dar la correspondiente cetona 15i (12,8 mg, 43% de rendimiento). Rf = 0,26 (50% EtOAc/hexano). Rf = 0,55 (50% EtOAc/hexano). [a]D24,0= 5 +8,14 (c 0,85 CHCl3). 1H RMN (300 MHz, CDCl3) 5 5,10 (dd, J = 8,0 y 3,0 Hz, 1H),
3,88 (d, J = 8,6 Hz, 1H), 2,62 - 2,32 (m, 3H), 2,13 (q, J = 9,4 Hz, 1H), 2,08 - 1,94 (m, 2H), 1,86 - 1,75 (m, 1H), 1,76 - 1,62 (m, 3H), 1,23 (s, 3H), 1,22 (s, 9H), 1,03 (dd, J =
6,9 y 4,5 Hz, 6H). 13C RMN (75 MHz, CDCl3) 5 216,42 (CO), 178,12 (CO), 86,13 (C),
84,48 (C), 74,56 (CH), 69,52 (CH), 54,76 (CH), 48,51 (CH), 39,11 (CH2), 39,00 (C), 10 36,97 (CH2), 31,63 (CH), 27,27 (CH3), 22,73 (CH2), 17,98 (CH3), 17,07 (CH3). EMBR
(m/z, ESI): 361,20 [M+Na]+, 354,22 y 219,14. EMAR-ESI Calculado para C19H30NaO5 [M+Na]+: 361,1985, encontrado 361,1988.
Obtención de los anál ogos cinamatos 1a-e, 1g-h a pa rtir de los dioles 12b-e y 12g, o la azida 13h.
Obtenido siguiendo los procedimientos descritos anteriormente para la preparación de la (-)-englerina a partir de 12a, pero usando como material de partida el diol correspondiente 12b-e, 12g, en lugar de 12a. En el ejemplo en el que se parte de la azida 13h se usó el procedimiento descrito anteriormente a partir de 13a.
O
PMBO^^oh O,1 eq)
**(Ver fórmula)**
12b-e, 12g, 13h
i) EDCI (2,0 eq.), DMAP (20 mol%) CH2Cl2, ta., 1 h.
ii) Ácido (£)-cinámico (3,0 eq.) 2,4,6-Cl3C6H2COCl (3.0 eq.)
Et3N (6,0 eq.), DMAP (6,0 eq.) Tol. 80 °C, 30 min.___________.
iii) DDQ (5,0 eq.)
CH2Cl2/agua (20:1), ta., 7 h.
O
**(Ver fórmula)**
Cinamato 1b:
**(Ver fórmula)**
25% de rendimiento global a partir de 12b. Rf = 0,30 (20% EtOAc/hexano). [a]D22,3= - 60,60 (c 0,64 CHCl3). 1H RMN (300 MHz, CDCfe) 5 7,69 (d, J = 16,0 Hz, 1H), 7,60 - 7,45 (m, 2H), 7,49 - 7,33 (m, 3H), 6,42 (d, J = 16,0 Hz, 1H), 5,97 (dd, J = 6,0 y 1,8 Hz, 1H), 5,85 - 5,78 (m, 1H), 5,35 (dd, J = 7,7 y 2,9 Hz, 1H), 5,04 (d, J = 10,3 Hz, 1H), 4,21 (sa, 2H), 2,73 (dd, J = 14,6 y 7,7 Hz, 1H), 2,47 - 2,22 (m, 3H), 2,01 - 1,83 (m, 4H), 1,23 (s, 3H), 1,02 (d, J = 6,8 Hz, 3H), 0,98 (d, J = 7,1 Hz, 2H). 13C RMN (75 MHz, CDCl3) 5 173,19 (CO), 166,17 (CO), 145,58 (C), 134,38 (C), 133,17 (CH), 131,36 (CH), 130,65 (CH), 129,09 (CH), 128,31 (CH), 117,94 (CH), 86,27 (C), 83,96 (C), 77,15 (CH), 72,98 (CH), 60,80 (CH2), 54,87 (CH), 48,20 (CH), 40,51 (CH2), 32,98 (CH), 32,06 (CH2), 18,49 (CH3), 18,43 (CH3), 17,38 (CH3). EMBR (m/z, ESI): 449,19 [M+Na]+, 427,21 [M+H]+, 413,31 y 351,19. EMAR-ESI Calculado para C25H30NaO6 [M+Na]+: 449,1935, encontrado 449,1933.
Cinamato 1c:
"Bu
**(Ver fórmula)**
52% de rendimiento global a partir de 12c. Rf = 0,38 (20% EtOAc/hexano). [a]D19,6= 62,82 (c 1,0 CHCl3). 1H RMN (400 MHz, CDCh) 5 7,65 (d, J = 16,0 Hz, 1H), 7,57 -
7,47 (m, 2H), 7,45 - 7,34 (m, 3H), 6,39 (d, J = 16,0 Hz, 1H), 5,26 - 5,13 (m, 2H), 4,19 (d, J = 5,4 Hz, 2H), 2,68 (dd, J = 14,5 y 7,9 Hz, 1H), 2,37 (t, J = 5,5 Hz, 1H), 1,89 (p, J = 6,9 Hz, 2H), 1,86 - 1,75 (m, 2H), 1,76 - 1,62 (m, 3H), 1,61 - 1,52 (m, 2H), 1,51 -
1,36 (m, 1H), 1,37 - 1,25 (m, 4H), 1,19 (s, 3H), 1,16 - 1,03 (m, 1H), 1,01 (d, J = 6,8 Hz, 3H), 0,97 (d, J = 7,1 Hz, 3H), 0,87 (t, J = 6,9 Hz, 3H). 13C RMN (101 MHz, CDCh) 5 173,22 (CO), 165,56 (CO), 145,15 (CH), 134,45 (C), 130,53 (CH), 129,05 (CH), 128,26 (CH), 118,19 (CH), 85,74 (C), 84,71 (C), 76,62 (CH), 71,15 (CH), 60,80 (CH2),
48,48 (CH), 47,40 (CH), 40,02 (CH2), 37,02 (CH), 33,15 (CH), 29,93 (CH2), 29,47 (CH2), 27,88 (CH2), 24,91 (CH2), 22,88 (CH2), 19,10 (CH3), 18,36 (CH3), 17,62 (CH3), 14,29 (CH3). EMBR (m/z, ESI): 507,27 [M+Na]+, 485,29 [M+H]+, 337,24 y 261,22. EMAR-ESI Calculado para C29H40NaO6 [M+Na]+: 507,2717, encontrado 507,2718.
Cinamato 1d:
O
**(Ver fórmula)**
41% de rendimiento global a partir de 12d. R f = 0,30 (20% EtOAc/hexano). [a]D19,9= - 63,94 (c 0,93 CHCfe). 1H RMN (400 MHz, CDCfe) 5 7,64 (d, J = 16,0 Hz, 1H), 7,58 - 7,49 (m, 2H), 7,45 - 7,33 (m, 3H), 6,39 (d, J = 16,0 Hz, 1H), 5,22 (dd, J = 7,9 y 3,0 Hz, 1H), 5,19 (d, J = 10,2 Hz, 1H), 4,20 (d, J = 5,4 Hz, 2H), 2,67 (dd, J = 14,5 y 7,9 Hz, 1H), 2,36 (t, J = 5,5 Hz, 1H), 2,08 - 1,95 (m, 1H), 1,89 (p, J = 7,0 Hz, 1H), 1,84 - 1,68 (m, 4H), 1,63 - 1,53 (m, 1H), 1,52 - 1,33 (m, 3H), 1,32 - 1,23 (m, 3H), 1,19 (s, 3H), 1,02 (d, J = 6,9 Hz, 3H), 0,97 (d, J = 7,0 Hz, 3H), 0,91 (d, J = 6,5 Hz, 2H), 0,77 (d, J = 6,4 Hz, 3H). 13C RMN (101 MHz, CDCI3) 5 173,22 (CO), 165,46 (CO), 145,10 (CH),
134,47 (C), 130,52 (CH), 129,04 (CH), 128,27 (CH), 118,17 (CH), 85,73 (C), 84,76 (C), 76,63 (CH), 71,08 (CH), 60,80 (CH2), 48,51 (CH), 47,49 (CH), 40,06 (CH2), 38,88 (CH2), 34,69 (CH), 33,24 (CH), 28,28 (CH2), 25,83 (CH), 24,82 (CH2), 24,46 (CH3), 21,34 (CH3), 19,10 (CH3), 18,36 (CH3), 17,63 (CH3). EMBR (m/z, ESI): 507,27 [M+Na]+, 485,29 [M+H]+, 372,26 y 350,25. EMAR-ESI Calculado para C29H41O6 [M+H]+: 485,2898, encontrado 485,2890.
Cinamato 1e:
"Hex
**(Ver fórmula)**
58% de rendimiento global a partir de 12e. Rf = 0,36 (50% EtOAc/hexano). [a]D22,2= - 96,25 (c 0,80 CHCl3). 1H RMN (300 MHz, CDCh) 5 7,65 (d, J = 16,0 Hz, 1H), 7,59 -
7,47 (m, 2H), 7,48 - 7,32 (m, 3H), 6,39 (d, J = 16,0 Hz, 1H), 5,25 - 5,14 (m, 2H), 4,19 (d, J = 5,3 Hz, 2H), 2,67 (dd, J = 14,5 y 7,9 Hz, 1H), 2,35 (t, J = 5,5 Hz, 1H), 1,89 (p, J = 6,9 Hz, 2H), 1,86 - 1,77 (m, 1H), 1,79 - 1,59 (m, 4H), 1,56 (sa, 2H), 1,50 - 1,38 (m,
1H), 1,37 - 1,20 (m, 8H), 1,19 (s, 3H), 1,15 - 1,05 (m, 1H), 1,01 (d, J = 6,8 Hz, 3H),
0,97 (d, J = 7,1 Hz, 3H), 0,88 - 0,83 (m, 3H). 13C RMN (75 MHz, CDCI3) 5 173,22 (CO), 165,57 (CO), 145,17 (CH), 134,45 (C), 130,53 (CH), 129,05 (CH), 128,26 (CH), 118,18 (CH), 85,75 (C), 84,71 (C), 76,62 (CH), 71,15 (CH), 60,79 (CH2), 48,48 (CH), 47,39 (CH), 40,01 (CH2), 37,01 (CH), 33,15 (CH), 32,01 (CH2), 29,71 (CH2), 29,48 (CH2), 27,88 (CH2), 27,61 (CH2), 24,92 (CH2), 22,82 (CH2), 19,09 (CH3), 18,36 (CH3), 17,62 (CH3), 14,26 (CH3). EMBR (m/z, ESI): 536,31 [M+Na]+, 513,32 [M+H]+, 437,31 y 381,30. EMAR-ESI Calculado para C31H45O6 [M+H]+: 513,3211, encontrado 513,3216.
Cinamato 1g:
**(Ver fórmula)**
60% de rendimiento global a partir de 12g. Rf = 0,28 (30% EtOAc/hexano). [a]D22,6= - 46,17 (c 0,66 CHCl3). 19F RMN (282 MHz, CDCl3) 5 -182,19 (dq, J = 55,1 y 32,4 Hz). 1H RMN (400 MHz, CDCh) 5 7,70 (d, J = 16,0 Hz, 1H), 7,59 - 7,44 (m, 2H), 7,44 - 7,32 (m, 3H), 6,40 (d, J = 16,0 Hz, 1H), 5,27 (d, J = 9,9 Hz, 1H), 5,21 (dd, J = 7,9 y 3,0 Hz, 1H), 4,95 (ddd, J = 54,9; 4,9 y 2,9 Hz, 1H), 4,21 (s, 2H), 2,65 (dd, J = 14,7 y 7,9
Hz, 1H), 2,16 - 2,02 (m, 2H), 2,02 - 1,80 (m, 4H), 1,33 - 1,18 (m, 7H), 1,03 (d, J = 6,8 Hz, 3H), 0,98 (d, J = 7,1 Hz, 3H). 13C RMN (101 MHz, CDCh) 5 173,20 (CO), 165,52 (CO), 145,80 (CH), 134,32 (C), 130,65 (CH), 129,07 (CH), 128,29 (CH), 117,65 (CH), 92,19 (CH, d, J = 181,5 Hz), 85,51 (C), 84,37 (C), 76,19 (CH), 69,06 (CH), 60,77 (CH2), 49,50 (CH, d, J = 20,9 Hz), 47,16 (CH), 40,07 (CH2), 32,96 (CH), 31,23 (CH2, d, J = 22,1 Hz), 23,57 (CH2), 18,92 (CH3), 18,33 (CH3), 17,43 (CH3). EMBR (m/z, ESI): 469,20 [M+Na]+, 350,26 y 231,64. EMAR-ESI Calculado para C^FNaOa [M+H]+:
469,1997, encontrado 469,1994.
Cinamato 1h:
O
**(Ver fórmula)**
81% de rendimiento global a partir de 13h. Rf = 0,29 (30% EtOAc/hexano). [a]D22,4= - 108,22 (c 0,75 CHCl3). 1H RMN (500 MHz, CDCfe) 5 7,69 (d, J = 16,0 Hz, 1H), 7,53 (dd, J = 6,7 y 3,0 Hz, 2H), 7,45 - 7,34 (m, 3H), 6,40 (d, J = 16,0 Hz, 1H), 5,24 - 5,10 (m, 2H), 4,20 (s, 2H), 3,96 (dd, J = 5,8 y 4,2 Hz, 1H), 2,64 (dd, J = 14,7 y 7,9 Hz, 1H), 2,38 (s, 1H), 2,16 - 2,01 (m, 1H), 1,95 - 1,86 (m, 3H), 1,86 - 1,77 (m, 2H), 1,43 (ddd,
J = 13,6; 9,7 y 4,2 Hz, 1H), 1,31 (qd, J = 11,8 y 5,8 Hz, 1H), 1,21 (s, 3H), 1,02 (d, J = 6,8 Hz, 3H), 0,98 (d, J = 7,0 Hz, 3H).13C RMN (126 MHz, CDCI3) 5 173,20 (CO),
165,47 (CO), 145,74 (CH), 134,30 (C), 130,66 (CH), 129,07 (CH), 128,28 (CH), 117,67 (CH), 85,41 (C), 84,34 (C), 76,17 (CH), 70,07 (CH), 61,82 (CH), 60,76 (CH2), 48,53 (CH), 47,49 (CH), 39,97 (CH2), 32,94 (CH), 29,93 (CH2), 23,28 (CH2), 18,88 (CH3), 18,33 (CH3), 17,43 (CH3). EMBR (m/z, ESI): 492,21 [M+Na]+, 464,21 y 442,22. EMAR- ESI Calculado para C25H31N3NaO6 [M+Na]+: 492,2105, encontrado 492,2102.
Tests Biológicos
Generalidades:
La línea celular A498 fue adquirida en American Type culture Collection, ATTC. Dulbecco's Modified Eagle Medium(DMEM), Suero Fetal bovino (FBS) y Glutamina, penicilina y estreptomicina fueron comprados de la casa comercial Sigma Aldrich, Alemania.
Líneas celulares:
La línea de cáncer renal humano, A498, fue mantenida en Dulbecco's Modified Eagle Medium(DMEM). El medio fue suplementado con 10% FBS y 1% de glutamina, penicilina y estreptomicina. Las células fueron mantenidas a 37 °C en atmósfera húmeda con 5% de CO2.
Proliferación celular:
La proliferación celular fue determinada en función de la actividad metabólica, empleando para ello el ensayo colorimétrico MTT. Se sembraron 8.000 células por pocillo en triplicados, dejándolas crecer 24 h antes del tratamiento con el compuesto. El compuesto fue suministrado a diferentes concentraciones e incubado durante 48h.
5 La cantidad máxima de DMSO fue 0,2%, en el punto más concentrado. Se comprobó la toxicidad del DMSO a esas mismas concentraciones empleadas, siendo despreciable. Tras las 48 h de incubación, se añadió el reactivo MTT a las células siguiendo el protocolo comercial. La absorbancia fue medida con el lector de placas Infinite 2000pro.
| Compuesto | GI50 (nM) |
| Englerina A | |
| Cinamato 1d | |
