DERIVADOS DE 5-AZOLONA COMO INHIBIDORES DE CALPAINA
SECTOR DE LA TÉCNICA
La presente invención se enmarca en el campo de los inhibidores de enzimas con actividad terapéutica, más específicamente de los inhibidores de calpaina.
ESTADO DE LA TÉCNICA
Las calpainas son una familia de proteasas citosólicas (no lisosomales) neutras calcio-dependientes. Son proteasas con cisteina (“cysteine proteases”) también conocidas como tiolproteasas y son responsables de la proteólisis neutra calciodependiente, en virtud de un dominio de unión a calcio (Curr. Top. Med. Chem. 2010, 270) .1 Su actividad de tipo papaína dependiente de calcio, no lisosomal y precisando pH neutro las diferencia claramente de las catepsinas. Actualmente se conocen al menos, 15 calpainas, de manera que el último término de la serie fue identificado en 2001. Existen diversa clasificaciones para las calpainas, aunque una muy utilizada se basa en la localización de los enzimas en el organismo, distinguiéndose entre CALPAINAS UBIQUAS (expresadas en todas las células del organismo) y CALPAINAS TEJIDO_ESPECIFICAS, que solamente se expresan en determinados tejidos tales como músculo esquelético, retina, testículo, pulmón, tracto digestivo etc (Bioorg. Med. Chem. 2002, 1335) .2
No existe una secuencia única de aminoácidos que sea reconocida por las calpainas, siendo en sustratos proteicos la estructura terciaria más que la primaria la responsable del reconocimiento y corte proteolítico, catalizando estos procesos en una gran variedad de proteínas implicadas en procesos tales como transducción de señales, en la reconstrucción del citoesqueleto, en la regulación del ciclo celular y en la apoptosis.
La actividad de las calpainas in vivo se encuentra regulada por las calpastatinas. La deficiente regulación de calpainas por calpastatinas, además de la sobreactivación, que puede ocurrir al aumentar la concentración intracelular de Ca+2, está asociada a varios desordenes patológicos tales como distrofia muscular, enfermedad renal y envejecimiento, 3 desordenes neurológicos tales como Alzheimer, Parkinson, Hungtinton, enfermedades desmielinizantes (como la esclerosis múltiple) y otras enfermedades degenerativas. Asímismo, el papel de las calpainas y sus inhibidores naturales las calpastatinas en enfermedades renales ha sido demostrado por diversos autores tales como Shi et al., 4 Dnyanmote et al., 5 Peltier et al., 6 Chatterjee et al.7 y Kamal et al.8
Por estas razones, se postula que los inhibidores de calpaina pueden ser utilizados en el tratamiento de estas enfermedades (US 2010/0216844) 9 siendo este postulado confirmado por variedad de investigaciones. Es por ello por lo que el interés en el desarrollo de agentes inhibidores de calpaina ha crecido sustancialmente.
La mayoría de los inhibidores de calpaina desarrollados hasta el momento son análogos peptídicos y su mayor limitación para su uso en tepeútica es su falta de selectividad frente a calpainas, relativa a otras tiolproteasas. Además su estructura polar, característica de una estructura peptídica, presenta un perfil farmacocinético poco adecuado. Sin embargo, en fechas más recientes, se ha desarrollado una serie de inhibidores no-peptídicos que parecen poseer una mayor especificidad frente a diversas calpainas. En todos los casos estudiados son inhibidores reversibles, que parecen no interaccionar con el centro catalítico de las calpainas, sino que interaccionan con un lugar alostérico, que juega un papel importante en la activación catalítica.10 Los rasgos estructurales más frecuentes de estos inhibidores es que suelen ser péptidomiméticos con alguna funcionalidad electrófila.11 Entre las estructuras no-peptidicas con una reconocida acción inhibidora de calpainas destacan:
! El ácido aurintricarboxílico 1, un colorante de estructura quinoide que puede
inhibir tanto la actividad inducida por μ-calpaina, como la inducida por m
calpaina (calpainas 1 y 2, respectivamente, dos de las calpainas ubicuas más
estudiadas) (Fig. A) .12
! Acidos α-mercaptoacrílicos, 13 tales como PD 150606, 2 y PD 151746, 3, una
clase de inhibidores no peptídicos con buena penetración celular y una gran
selectividad frente a calpainas, especialmente frente a μ-calpaina.
Adicionalmente, el derivado PDI-150606, 2, ha demostrado su utilidad
preventiva en el caso de daño renal, facilitando además la recuperación del tejido (Fig. A) .14
Figura A
! Derivados de carboxamidas alicíclicas o carbocíclicas, constituidas por derivados del ácido 3-amino-2-oxo-carboxílico, acilados con diferentes ácidos benzoicos 4 (WO 98/25883, 15 WO 99/54293, 16) (Fig. B) o ácidos benzoicos incluidos en una estructura heterocíclica 5, (WO 98/25899) , (Fig. B) .17 Otras carboxamidas que incluyen, en el resto amino derivados de ácidos 2
oxocarboxílicos, acilados con ácidos carboxílicos derivados de estructuras heterocíclicas 6-8, (WO-99/61423, 18 WO-99/54320, 19 WO-99/54310, 20 WO99/54304, 21 WO-99/54305, 22 Bioorg. Med. Chem. Lett., 2005, 2857, 23 Bioorg. Med. Chem. Lett., 2008, 205, 24 Eur. J. Med. Chem. 2009, 1331, 25 (Fig. B) ) han sido también descritas como inhibidores de calpaina.
R1 H
R3 NO
OO
O N
R2 N
OH
OHR1 H O O
5
O O
O O
R1
R4 O O H
O
H
N
R
N
N
R4
N
N
ON
H
H
N
N
H
H
O
O
R2
R3
H
H
CH3
O
O CH3
7 O
Figura B
! Otros análogos no peptídicos son los derivados de carboxamidas 926 (Fig. C) ,
que se caracterizan por poseer una significativa selectividad por μ-calpaina,
frente a otras cisteína proteasas, los compuestos 10, derivados de
piridincarboxamidas, unidos mediante diversas posiciones, a un pirazol
5 sustituido, a través del átomo de nitrógeno (WO 2008/080969, 27 WO
2009/08358128) , o bien a un 1, 3-azol a través de las posiciones 2 ó 4 (WO
2010/09475529) . Por último también se han descrito como inhibidores de
calpainas las carboxamidas heterocíclicas 11, derivadas de sistemas de 4, 5 ó 6
eslabones, incluyendo en el sistema heterocíclico un resto de amida,
10 sulfinamida o sulfonamida (WO 2010/12810230) .
R1
O
R1
O
X
N
X
H R3a R3b
N
Rn H R3a R3b
X
NN
N
RW
RW
N
R2
R2
10
R1
O
R4 XY
N H R3a R3b N
O
R2
Figura C
Por otro lado, nuestro grupo ha comunicado recientemente31 una nueva síntesis total del alcaloide variolina B, uno de los miembros de una familia de alcaloides aislados de la esponja marina Kirtpatrickia varialosa.32 La variolina B se caracteriza por poseer un núcleo de pirrolo[1, 2-c]pirimidina, con la posición 9, marcadamente electrófila. Este sistema heterocíclico, poco común, podría guardar los requerimientos necesarios para construir a partir de él carboxamidas del tipo denominado genéricamente híbridos peptido-heterociclo (WO 2006/064075) 33 y que podrían guardar los requerimientos estructurales necesarios para actuar como inhibidores de calpaina. Los primeros intentos indicaban que los derivados sencillos del núcleo de pirrolo[1, 2-c]pirimidina 7carboxamida, constituidos por una cadena de 2 ó 3 aminoácidos proporcionaban valores pobres de actidad biológica. La extensión de esta investigación a otras aminas no peptídicas nos ha permitido aislar una serie de estructuras, en las que la actividad
inhibitoria de calpaina aumenta de manera espectacular y la presencia de cadenas peptídicas no es necesaria para lograr tal actividad biológica. Este hecho incrementa notablemente su potencial utilidad terapéutica como inhibidores enzimáticos. Es de esperar que este tipo de derivados no-peptídicos posean mayor estabilidad metabólica y una farmacocinética más adecuada que los denominados híbridos péptido-heterociclo.
DESCRIPCIÓN DE LA INVENCIÓN
La presente invención se refiere a compuestos derivados de 4-arilmetilen-1, 3azol-5-ona, con o sin sustitutentes amino en posición R1, con actividad como 15 inhibidores de calpaina.
La presente invención se refiere a un compuesto que es caracterizado porque tiene estructura de 1, 3-azol-5-ona, con o sin sustituyentes amino en disposición R1, y de fórmula I,
R1W
O
N X
R2 I
En la que:
-El grupo X es oxígeno (O) , NH, NR6 o N-CH2-CO2R7 indistintamente, en el que R6 está seleccionado entre un grupo alquilo entre 1-4 átomos de carbono, cicloalquilo, bencilo y metoxialquilo, con alquilo entre 1 y 3 átomos de
carbono, y R7 es un alquilo entre 1 y 2 átomos de carbono, -El grupo R1 está independientemente seleccionado entre los grupos -H -NHR8, en el que R8 está seleccionado entre un grupo alquilo entre 1-4 átomos de carbono, cicloalquilo, bencilo y metoxialquilo, con alquilo entre 1 y 3 30 átomos de carbono,
- R6 y R8 pueden ser iguales o diferentes, -El grupo R2 es hidrógeno (H) , metilo (-CH3) o fenilo (-C6H5) , -W es un radical arílico de fórmula W1, W2 o W3,
R4 R5
R4
R3
*
*
*
Y
YZ
W1W2 W3
donde, -* representa el enlace de unión con la estructura I, -R3 está seleccionado entre hidrógeno (H) , OH y OAc,
-R4 es hidrógeno (H) o bromo (Br) , indistintamente, -R5 está seleccionado entre hidrógeno (H) , cloro (Cl) o metoxi (OMe) , -Y está seleccionado entre NH, azufre (S) u oxígeno (O) , -Z está seleccionado entre nitrógeno (N) o CH, indistintamente Son compuestos especialmente preferidos:
- 4-Benziliden-2-metil-4H-oxazol-5-ona (12, descrito) , -Acetato de 4- (2-metil-5-oxo-oxazol-4-ilidenometil) -fenilo (13, descrito) , -5-Benziliden-2-metil-3, 5-dihidro-imidazol-4-ona (14, descrito) ,
- (4-Benziliden-2 metil-5-oxo-4, 5-dihidro-imidazol-1-il) -acetato de etilo (15,
descrito) , -5-Benziliden-2, 3-dimetil-3, 5-dihidro-imidazol-4-ona (16, descrito) , -5- (4-Hidroxi-benziliden) -2, 3-dimetil-3, 5-dihidro-imidazol-4-ona (17, descrito) , -5-Benziliden-3- (2-metoxi-etil) -2-metil-3, 5-dihidro-imidazol-4-ona (18) ,
-4-Benziliden-2-fenil-4H-oxazol-5-ona (19, descrito) , -5-Benziliden-2-fenil-3, 5-dihidroimidazol-4-ona (20, descrito) , -2-Metil-5- (1H-pirrol-2-il-metilen) -3, 5-dihidro-imidazol-4-ona (21) , -[2-Metil-5-oxo-4- (1H-pirrol-2-il-metilen) -4, 5-dihidro-imidazol-1-il]-acetato de etilo (22) , 30 -2-Metil-5-tiofen-2-il-metilen-3, 5-dihidro-imidazol-4-ona (23) ,
- (2-Metil-5-oxo-4-tiofen-2-il-metilen-4, 5-dihidro-imidazol-1-il) -acetato de etilo (24) , -5- (3-Bromo-tiofen-2-il-metilen) -2-metil-3, 5-dihidro-imidazol-4-ona (25) , -3- (2-Metoxi-etil) -2-metil-5-tiofen-2-il-metilen-3, 5-dihidro-imidazol-4-ona (26) , -2-Fenil-5-tiofen-2-il-metilen-3, 5-dihidro-imidazol-4-ona (27) , -5-Furan-2-il-metilen-2-metil-3, 5-dihidro-imidazol-4-ona (28) , - (4-Furan-2-il-metilen-2-metil-5-oxo-4, 5-dihidro-imidazol-1-il) -acetato de etilo (29) , -4- (1H-Indol-2-il-metilen) -2-metil-4H-oxazol-5-ona (30) , -5- (1H-Indol-2-il-metilen) -2-metil-3, 5-dihidro-imidazol-4-ona (31) , -[4- (1H-Indol-2-il-metilen) -2-metil-5-oxo-4, 5-dihidroimidazol-1-il]-acetato de etilo (32) , -[4- (3-Bromo-1H-indol-2-il-metilen) -2-metil-5-oxo-4, 5-dihydro-imidazol-1-il]acetato de etilo (33) , -5- (1H-Indol-2-il-metilen) -3- (2-metoxietil) -2-metil-3, 5-dihidroimidazol-4-ona (34) , -5- (3-Bromo-1H-indol-2-il-metilen) -2-metil-3, 5-dihidroimidazol-4-ona (35) , -5-[ (1H-Indol-2-il) - (2-metoxietilamino) -metilen]-2-metil-3, 5-dihidroimidazol-4ºna (36) , -5-[ (1H-Indol-2-il) - (2-metoxietilamino) -metilen]-3- (2-metoxietil) -2-metil-3, 5dihidroimidazol-4-ona (37) , -4- (1H-Indol-2-il-metilen) -2-fenil-4H-oxazol-5-ona (38) , -5- (1H-Indol-2-il-metilen) -2-fenil-3, 5-dihidro-imidazol-4-ona (39) , -5- (3-Bromo-1H-indol-2-il-metilen) -2-fenil-3, 5-dihidro-imidazol-4-ona (40) , -5-[ (1H-Indol-2-il) - (2-metoxietilamino) -metilen]-3- (2-metoxietil) -2-fenil-3, 5dihidro-imidazol-4-ona (41) , -5-[ (1H-Indol-2-il) - (2-metoxietilamino) -metilen]-3- (2-metoxi-etil) -3, 5-dihidroimidazol-4-ona (42) , -3-Butil-5-[butilamino- (1H-indol-2-il) -metilen]-3, 5-dihidro-imidazol-4-ona (43) , -5-[ (1H-Indol-2-il) -isopropilamino-metilen]-3-isopropil-3, 5-dihidro-imidazol-4ºna (44) ,
- 3-Benzil-5-[benzilamino- (1H-indol-2-il) -metilen]-3, 5-dihidro-imidazol-4-ona (45) , -3-Ciclohexil-5-[ciclohexilamino- (1H-indol-2-il) -metilen]-3, 5-dihidro-imidazol4-ona (46) , -3- (2-Metoxietil) -5-[ (2-metoxietilamino) - (1H-pirrolo[2, 3-b]piridin-2-il) metilen]-3, 5-dihidro-imidazol-4-ona (47) , -3-Isopropil-5-[isopropilamino- (1H-pirrolo[2, 3-b]piridin-2-il) -metilen]-3, 5dihidro-imidazol-4-ona (48) , -3-Benzil-5-[benzilamino- (1H-pirrolo[2, 3-b]piridin-2-il) -metilen]-3, 5-dihidroimidazol-4-ona (49) -3-Ciclohexil-5-[ciclohexilamino- (1H-pirrolo[2, 3-b]piridin-2-il) -metilen]-3, 5dihidro-imidazol-4-ona (50) , -5-[ (4-Cloro-1H-pirrolo[2, 3-b]piridin-2-il) - (2-metoxi-etilamino) -metilen]-3- (2metoxi-etil) -3, 5-dihidro-imidazol-4-ona (51) , -3- (2-Metoxi-etil) -5-[ (2-metoxi-etilamino) - (4-metoxi-1H-pirrolo[2, 3-b]piridin2-il) -metilen]-3, 5-dihidro-imidazol-4-ona (52) , -5-[ (3-Bromo-1H-pirrolo[2, 3-b]piridin-2-il) - (2-metoxi-etilamino) -metilen]-3- (2
metoxi-etil) -3, 5-dihydro-imidazol-4-ona (53) , -5-Benzo[b]tiofen-2-il-metilen-2-metil-3, 5-dihidro-imidazol-4-ona (54) , - (4-Benzo[b]tiofen-2-il-metilen-2-metil-5-oxo-4, 5-dihidro-imidazol-1-il) -acetato de etilo (55) , -5- (3-Bromo-benzo[b]tiofen-2-il-metilen) -2-metil-3, 5-dihidro-imidazol-4-ona (56)
- 5- (3-Bromo-benzo[b]tiofen-2-il-metilen) -3- (2-metoxi-etil) -2-metil-3, 5-dihydroimidazol-4-ona (57) y cualquiera de sus isómeros.
La síntesis de los compuestos de fórmula general I de la presente invención y de los materiales de partida para prepararlos se han llevado a cabo por métodos análogos a los descritos en manuales estándar de química orgánica, tales como Houben-Weyl, “Methoden der Organischen Chemie” Thieme-Verlag, Stuttgart, Jerr y March “Advanced Organic Chemistr y ”, 5th Edition, Wiley & Sons y las referencias ahí citadas. En particular, los compuestos de fórmula general I-A., I-B. y I-C., se preparan mediante los métodos descritos a continuación y/o en la parte experimental.
Como ejemplo ilustrativo, aunque no limitante, los compuestos de fórmula general I-A., con R1= H, R2= CH3, Ph, R3= H, AcO, X= O se han preparado según los métodos descritos en la bibliografía, 34 a partir del aldehído correspondiente, acetilglicina o ácido hipúrico, en una mezcla de anhídrido acético/acetato sódico y/o según los métodos que se indican a continuación y descritos en la parte experimental (compuestos 12, 13 y 19) .
OO
H N AcOH, AcONa OH R2
NHO
R3 R3
OO R2
I-A (12, 13 y 19)
R2= CH3, Ph
R3= H, AcO
Esquema 1
Los compuestos de fórmula general I-A., con R1= H, R2= CH3, Ph, R3= H, AcO, OH, X= NH, NR6, N-CH2-CO2R7, se han preparado según los métodos descritos en la bibliografía, a partir del aldehído correspondiente, clorhidrato de acetamidina o benzamidina y bromoacetato de etilo, utilizando tolueno o sec-butanol como disolventes y NaHCO3 como base (compuestos 14, 15 y 20) , mientras que los compuestos 16 y 17,
se han preparado por apertura y reciclación de la correspondiente oxazol-5-ona, en presencia de una amina.
O O OEt NaHCO3
X
O
+ N
Br
R3
NH2
Cl R2 H R2H2N
I-A (14, 15 y 20)
R3 R2= CH3, Ph R3= H, AcO X= NH, N-CH2CO2R7
OO
CH3
H2N N
CH3O N
N EtOH R3
R3 CH3 CH3
I-A (16 y 17)
R3= H, OH
Esquema 2
Del mismo modo, los compuestos de fórmula general I-B., con R1= H, R2= CH3, Ph, R4= H, Br, Y= NH, S, O, X= NH, N-CH2-CO2R7 se han preparado según los métodos descritos en la bibliografía, a partir del aldehído correspondiente, clorhidrato de acetamidina o benzamidina y bromoacetato de etilo, utilizando tolueno o sec-butanol
como disolventes y NaHCO3 como base (compuestos 21-25 y 27-9) , mientras que el compuestos 26, se ha preparado por apertura y reciclación del compuesto 23, en presencia de 2-metoxietilamina.
R2= CH3, Ph R4= H, Br Y= NH, S, O
X= NH, N-CH2CO2R7
OO
OMe H2N N
NH
OMe
S N
SN CH3
CH3
Esquema 3
Los compuestos de fórmula general I-C., con R1= H, R2= CH3, Ph, R4= H, R5= H, X= O, Z= CH se han preparado a partir del aldehído correspondiente, acetilglicina o ácido hipúrico, en una mezcla de anhídrido acético/acetato sódico y/o según los métodos que se indican a continuación y descritos en la parte experimental (compuestos 30 y 38) .
OO
H N AcOH, AcONa OH
R2 NHN NH HO
OO R2
I-C (30 y 38)
R2= CH3, Ph
Esquema 4
Los compuestos de fórmula general I-C., con R1= H, R2= CH3, Ph, R4= H, Br, R5= H, X= NH, N-CH2-CO2R7, Z= CH, se han preparado a partir del aldehído correspondiente, clorhidrato de acetamidina o benzamidina y bromoacetato de etilo, utilizando tolueno o sec-butanol como disolventes y NaHCO3 como base (compuestos 30-33 y 39) , mientras que el compuestos 34, se ha preparado por apertura y reciclación del compuesto 31, en presencia de 2-metoxietilamina.
R2= CH3, Ph X= NH, N-CH2CO2R7
O O H2N
N
OMe OMe NH N
NH NHN
CH3CH3
34
Esquema 5
Los compuestos de fórmula general I-C., con R1= H, R2= CH3, Ph, R4= Br, X= 10 NH, Z= CH, se han preparado por bromación del precursor correspondiente, en presencia de N-bromosuccinimida y DMF como disolvente (compuestos 35 y 40) .
Br OO
NBS NH NH
NH N
NHN DMF R2 R2
I-C (35 y 40)
R2= CH3, Ph
Esquema 6
Los compuestos de fórmula general I-C., con R1= NHR8, R2= CH3, Ph, R4= H, 15 X= NH, NR5, Z= CH, se han preparado a partir del precursor correspondiente, con R4= Br, en presencia de una amina (compuestos 36, 37 y 41) (Esquema 7)
R8 HN O
Br O H2N-R8
R5 N
NH
NH N NHN DMF R2 R2
I-C (36, 37 y 41)
R2= CH3, Ph
Esquema 7
Los compuestos de fórmula general I-C., con R1= NHR8, R2= CH3, Ph, R4= H, X= NH, NR6, Z= CH, NH se han preparado por apertura, con aminas de los derivados 5 5-bromo-pirimido[1, 6-a]indol-3-carboxilato de metilo, 5-bromo-pirido[3’, 2’: 4, 5]pirrolo[1, 2-c]pirimidin-7-carboxilato de metilo, 5-bromo-4-cloro-pirido[3’, 2’: 4, 5]pirrolo[1, 2-c]pirimidin-7-carboxilato de metilo y 5-bromo-4-metoxi-pirido[3’, 2’: 4, 5]pirrolo[1, 2-c]pirimidin-7-carboxilato de metilo compuestos conocidos y descritos en Org. Lett. 2000, 2, 3253–3256 y Eur. J. Org. Chem. 2010, 5607, 31, 35 (compuestos
42-52) , mientras que 53 se ha preparado por bromación de su precursor con R4= H. (Esquema 8)
R5
Br R5 H
R8N
R8H2N
O
ONz NZ HN
OMe N
N
R6
I-C (42-52)
Z= CH, N R5= H, Cl, OMe Esquema 8 R6=R8
Por último los compuestos de fórmula general I-C., con R1= H, R2= CH3, R4= H,
X= NH, N-CH2-CO2R7, Y= S, Z= CH, se han preparado según los métodos descritos en la bibliografía, a partir del aldehído correspondiente, clorhidrato de acetamidina y bromoacetato de etilo, utilizando dioxano como disolvente y NaHCO3 como base (compuestos 53 y 54) , mientras que el compuesto 56, se ha preparado por bromación de su precursor con R4= H y 57 se ha preparado por apertura y reciclación del compuesto 56, en presencia de 2-metoxietilamina.
O O OEt X
NaHCO3 Br
+ SN O NH2
Cl CH3S
CH3
H H2N
I-C (54 y 55)
X= NH, N-CH2CO2R7
Br O O NBS NH NH SN SN CH3CH3
O
Br O H2N
N
OMe NH
OMe
S N
SN CH3
CH3
Esquema 9
Una característica esencial de los compuestos de la presente invención es que son inhibidores de calpaina. Como ya se ha mencionado, existen diversa isoformas de 5 calpaina, aunque son de estructuras muy similares y por lo que se conoce, comparten mecanismos de acción semejantes.33 De esta forma, cuando en la presente invención mencionemos a la calpaina, haremos referencia a todas las isoformas (o isoenzimas) que están incluidas en la definición de calpaina. Por lo tanto, otro objeto de la presente invención es el uso de los compuestos de fórmula I-A., I-B. o I-C. como inhibidores de calpaina.
Para evaluar la actividad de los distintos inhibidores, se realizó un ensayo de lisis de un sustrato fluorescente conteniendo dos puentes disulfuro, Suc-Leu-Tyr-AMC (Calpain Substrate II, fluorogenic, Calbiochem, Ref: 208731, Darmstad, Alemania) , de forma que la actividad enzimática es proporcional a la señal fluorescente. Los resultados más relevantes se muestran en las Tablas 1 y 2 y en las Figuras 1 y 2. Las Tablas y Figuras recogen el porcentaje de inhibición de la actividad, que se expresa en comparación con el de la calpeptina, considerando esta como el 100 %.
Tabla 1 y Figura 1. Resultados representativos de inhibición de calpaina de compuestos objeto de esta invención: Compuestos 12-32
Compuesto % Inhibición 12 17 13 69, 2 14 67, 7 16 82, 4 17 89, 4 18 86, 8 19 25, 1 21 90, 2 22 26 23 122 24 96, 2 25 24, 9 26 43, 7 27 92, 6 28 77, 4 29 90, 4 30 44, 9 31 61 32 94, 5
Tabla 2 y Figura 2. Resultados representativos de inhibición de calpaina de compuestos objeto de esta invención: Compuestos 34-57
Compuesto % Inhibición 34 43, 3 36 80, 4 37 93 38 93, 3 39 15, 3 40 36, 8 41 21, 5 42 73, 7 43 14 44 57, 8 45 28, 2 47 99, 4 48 37, 2 49 11, 7
140 120 100 80 60 40 20
% inhibición 12 1314 161718192122 232425 262728293031 32
45, 8 52 54, 2 53 87, 7 54 34, 8 55 27, 6 56 14, 4 57 13
Algunos de los compuestos representados en las Tablas 1 y 2 y en las Figuras 1 y 2 son inhibidores muy potentes de calpaina (ver por ejemplo los compuestos 21, 23, 24 y 32 en Tabla 1 y Figura 1, y 38 y 47 en Tabla 2 y Figura 2) y pueden ser útiles en el diseño de compuestos con aplicaciones terapéuticas. Debido a que se ha encontrado que la sobreactivación de calpaina está asociada a varios desordenes patológicos tales como distrofia muscular, enfermedad renal y envejecimiento, desordenes neurológicos tales como Alzheimer, Parkinson, Hungtinton, enfermedades desmielinizantes (como la esclerosis múltiple) y otras enfermedades degenerativas, un objeto adicional de la presente invención es el uso de los compuestos de fórmula I-A., I-B. o I-C. para el tratamiento o prevención de este tipo de procesos.
DESCRIPCIÓN DE LOS DIBUJOS
La tabla 1 y la figura 1 muestran algunos de los resultados representativos de inhibición de calpaina de los compuestos 12-32, objeto de esta invención.
La tabla 2 y la figura 2 muestran algunos de los resultados representativos de inhibición de calpaina de los compuestos 34-57, objeto de esta invención.
La figura 3 muestra los resultados del estudio de los compuestos de fórmula I-A., I-B. o I-C., objeto de la presente invención y su actividad biológica como inhibidores de calapaina.
La figura 4 muestra la estructura general de los derivados de 5-azolona, inhibidores de calpaina, objeto de esta invención.
MODO DE REALIZACIÓN
Como ejemplos ilustrativos, aunque no limitantes, se indican los procedimientos experimentales, datos espectroscópicos y analíticos de algunos derivados de 5-azolona así como ensayos de la actividad biológica de los mismos.
Ejemplo 1
Síntesis de 4-benziliden-2-metil-4H-oxazol-5-ona (12) 36
A una disolución de benzaldehido (0.12 mL, 1.15 mmol) en anhidrido acético (0.78 mL) , se le añade acetato sódico (NaOAc, 90 mg, 1.1 mmol) y N-acetilglicina (117 mg, 1 mmol) . La mezcla de reacción se calienta a reflujo durante 30 min, se adiciona agua (5 mL) y se agita a temperatura ambiente durante 30 min adicionales, precipitando un sólido que se filtra y lava con EtOH, obteniéndose 12 como un sólido amarillo (103 mg, 55%) ; p.f. 163-165 ºC.1H-RMN (300 MHz, CDCl3) : δ = 2.39 (s, 3H) , 7.13 (s, 1H) ,
7.42 (m, 3H) , 8.05 (m, 2H) ppm.
CH3
Ejemplo 2
Síntesis del acetato de 4- (2-metil-5-oxo-oxazol-4-ilidenometil) -fenilo (13) 37
A una disolución de 4-hidroxibenzaldehido (140 mg, 1.15 mmol) en anhidrido acético (0.78 mL) , se le añade acetato sódico (NaOAc, 90 mg, 1.1 mmol) y Nacetilglicina (117 mg, 1 mmol) . La mezcla de reacción se calienta a reflujo durante 30
min, se adiciona agua (5 mL) y se agita a temperatura ambiente durante 30 min adicionales, precipitando un sólido que se filtra y lava con EtOH, obteniéndose 13 como un sólido amarillo (98 mg, 40%) ; p.f. 134-135 ºC; 1H-RMN (300 MHz, CD3OD) : δ = 2.33 (s, 3H) , 2.42 (s, 3H) , 7.18 (d, J=8.9 Hz, 2H) , 7.25 (s, 1H) , 8.21 (d, J=8.9 Hz, 2H) ppm.
CH3
Ejemplo 3
Síntesis de 5-benziliden-2-metil-3, 5-dihidroimidazol-4-ona (14) 38 y (4-benziliden-2 metil-5-oxo-4, 5-dihidro-imidazol-1-il) -acetato de etilo (15) 39
A una disolución de benzaldehído (0.1 mL, 1 mmol) en tolueno (1.5 mL) , se le añaden sucesivamente NaHCO3 (420 mg, 5 mmol) , clorhidrato de acetamidina (146 mg,
1.54 mmol) y bromoacetato de etilo (0.27 mL, 2.4 mmol) . La mezcla se calienta a 115 ºC durante 1 h. El sólido formado se filtra y se lava con acetato de etilo. Los líquidos de filtrado se concentran a sequedad y el residuo obtenido se purifica por cromatografía en gel de sílice utilizando como eluyente hexano / AcOEt (1:1) , obteniéndose 14 y (56 mg, 30%) 15 (109 mg, 40 %) . 5-Benziliden-2-metil-3, 5-dihidroimidazol-4-ona (14) : Solido amarillo; p.f.: 178-179 ºC; 1H-RMN (300 MHz, CDCl3) : δ = 2.37 (s, 3H) , 7.06 (s, 1H) ,
7.40 (m, 3H) , 8.11 (dd, J = 7.9, 1.3 Hz, 2H) , 9.07 (sa, 1H) ppm.
CH3
(4-Benziliden-2 metil-5-oxo-4, 5-dihidro-imidazol-1-il) -acetato de etilo (15) : p.f. 126
128 ºC; 1H-RMN (300 MHz, CDCl3) : δ = 1.28 (t, J = 7.2 Hz, 3H) , 2.32 (s, 3H) , 1.28 (q, J = 7.2 Hz, 2H) , 4.36 (s, 2H) , 7.13 (s, 1H) , 7.38 (m, 3H) , 8.12 (dd, J = 7.9, 1.6 Hz, 1H) ppm.
O
H3C
Ejemplo 4
Síntesis de 5-benziliden-2, 3-dimetil-3, 5-dihidro-imidazol-4-ona (16) 40
A una disolución de 4-benziliden-2-metil-4H-oxazol-5-ona 12 (187 mg, 1 mmol) en EtOH (3.7 mL) , se le añade K2CO3 (359 mg, 2.6 mmol) y metilamina (0.5 mL, 15 mmol) . La mezcla de reacción se calienta a reflujo durante 4 h. Posteriormente se elimina el disolvente a vacío y el residuo se purifica por cromatografía en gel de sílice usando como eluyente hexano/ AcOEt (7:3) , obteniéndose 16 (26 mg, 13%) . Sólido marrón claro; p.f.: 101-103 ºC 1H-RMN (300 MHz, CDCl3) : δ = 2.35 (s, 3H) , 3.16 (s, 3H) , 7.08 (s, 1H) , 7.37 (m, 3H) , 8.10 (d, J=7.6 Hz, 2H) ppm.
CH3
Ejemplo 5
Síntesis de 5- (4-hidroxi-benzilideno) -2, 3-dimetil-3, 5-dihidro-imidazol-4-ona (17) 40
A una disolución del acetato de 4- (2-metil-5-oxo-oxazol-4-ilidenometil) -fenilo 13 (245 mg, 1 mmol) en EtOH (3.7 mL) , se le añade K2CO3 (359 mg, 2.6 mmol) y 5 metilamina (0.5 mL, 15 mmol) . La mezcla de reacción se calienta a reflujo durante 4 h. Posteriormente se elimina el disolvente a vacío y el residuo se purifica por cromatografía en gel de sílice usando como eluyente hexano/ AcOEt (7:3) , obteniéndose 17 (71 mg, 33%) . Solido amarillo; p.f.: 218 ºC (descomp) ; 1H-RMN (300 MHz, CDCl3) : δ = 2.35 (s, 3H) , 3.16 (s, 3H) , 6.85 (d, J = 8.5, 2H) , 7.05 (s, 1H) , 8.03 (d, J = 8.5, 2H)
ppm.
Ejemplo 6
Síntesis de 5-Benziliden-3- (2-metoxi-etil) -2-metil-3, 5-dihidro-imidazol-4-ona (18)
A una disolución del ácido α-acetamidocinnamico en DMF anhidra (3.5 mL) y en atmósfera de argón, se le añaden secuencialmente 2-metoxietilamina (0.06 mL, 1.2 mmol) , 1-hidroxibenzotriazol (HOBT, 162 mg, 1.2 mmol) , 1- (3-dimetilaminopropil) -3etilcarbodiimida (EDC, 0.2 mL, 1.2 mmol) , Et3N (0.41 mL, 3 mmol) y 4 (dimetilamino) piridina (DMAP, 12 mg, 0.1 mmol) . La mezcla se calienta a 50 ºC
durante una noche. Posteriormente, se añade tamiz molecular y la mezcla se calienta a 150 ºC durante 8 h. Concluida la reacción se filtra el tamiz molecular y se elimina el disolvente a vacío. El producto crudo se purifica por cromatografía en gel de sílice usando como eluyente AcOEt, obteniéndose 18 (178 mg, 73%) . Aceite; IR (NaCl) : υ = 3408, 2893, 1713, 1645, 1576 cm-1; 1H-RMN (300 MHz, CDCl3) : δ = 2.39 (s, 3H) , 3.28
(s, 3H) , 3.50 (t, J = 5.1 Hz, 2H) , 3.74 (t, J = 5.1 Hz, 2H) , 7.06 (s, 1H) , 7.36 (m, 3H) ,
8.10 (d, J=7.6 Hz, 2H) , ppm;13C-RMN (50 MHz, CDCl3) : δ = 15.9, 40.9, 59.0, 70.5, 127.0, 128.6, 129.9, 132.0, 134.1, 138.5, 163.3, 170.6 ppm; HRMS (ESI-TOF) m/z Calculado para C14H17N2O2 [M+H]+: 245.1290. Encontrado: 245.1280.
Ejemplo 7
Síntesis de 4-benziliden-2-fenil-4H-oxazol-5-ona (19) 36
A una disolución de benzaldehido (0.12 mL, 1.15 mmol) en anhidrido acético (0.78 mL) , se le añade acetato sódico (NaOAc, 90 mg, 1.1 mmol) y ácido hipúrico (179 mg, 1 mmol) . La mezcla de reacción se calienta a reflujo durante 2 h, se adiciona agua (5 mL) y se agita a temperatura ambiente durante 30 min adicionales, precipitando un sólido que se filtra y lava con EtOH, obteniéndose 19 como un sólido anaranjado (99.6
mg, 40%) ; p.f.: 165-167 ºC;1H-RMN (300 MHz, CDCl3) : δ = 7.25 (s, 1H) , 7.46 (m, 3H) , 7.53 (t, J = 7.7 Hz, 2H) , 7.64 (t, J = 7.2 Hz, 1H) , 8.18 (m, 2H) , 8.21 (m, 2H) ppm.
Ejemplo 8
Síntesis de 5-benziliden-2-fenil-3, 5-dihidroimidazol-4-ona (20) 38
Una disolución de yoduro potásico (399 mg, 2.4 mmol) y bromoacetato de etilo (0.27 mL, 2.4 mmol) en sec-butanol (0.5 mL) se calienta a reflujo durante 1 h, seguidamente se deja enfriar la mezcla a temperatura ambiente y posteriormente se le 20 añade, sucesivamente, benzaldehído (0.1 mL, 1 mmol) , NaHCO3 (420 mg, 5 mmol) , clorhidrato de benzamidina (241 mg, 1.54 mmol) y sec-butanol (1.5 mL) . La mezcla de reacción se calienta a reflujo durante 1 h. El precipitado formado se filtra y lava con H2O y EtOH, obteniéndose 20 como un sólido amarillo (69 mg, 26%) ; p.f.: 270-272 ºC; 1H-RMN (300 MHz, DMSO-d6) : δ = 7.02 (s, 1H) , 7.46 (m, 3H) , 7.60 (m, 3H) , 8.18 (m,
2H) , 8.30 (m, 2H) ppm.
Ejemplo 9
Síntesis de 2-metil-5- (1H-pirrol-2-il-metilen) -3, 5-dihidro-imidazol-4-ona (21) y 5 [2-metil-5-oxo-4- (1H-pirrol-2-il-metilen) -4, 5-dihidro-imidazol-1-il]-acetato de etilo (22)
A una disolución de pirrol-2-carboxaldehido (95 mg, 1 mmol) en tolueno (1.5 mL) , se le añaden sucesivamente NaHCO3 (420 mg, 5 mmol) , clorhidrato de acetamidina (146 mg, 1.54 mmol) y bromoacetato de etilo (0.27 mL, 2.4 mmol) . La mezcla se calienta a 108 ºC durante 5 h. El sólido formado se filtra y se lava con AcOEt. Los líquidos de filtrado se concentran a sequedad y el residuo obtenido se purifica por cromatografía en gel de sílice utilizando como eluyente AcOEt, obteniéndose 21 y (56 mg, 32%) y 22 (39 mg, 15%) . 2-metil-5- (1H-pirrol-2-il-metilen) -3, 5-dihidro-imidazol4-ona 21: Solido amarillo; p.f.: 199-200ºC; IR (KBr) : υ =3084, 2345, 1689, 1626, 1111
cm-1; 1H-RMN (300 MHz, CDCl3) : δ = 2.33 (s, 3H) , 6.28 (m, 1H) , 6.65 (s, 1H) , 7.00 (s, 1H) , 7.11 (s, 1H) , 10.30 (sa, 1H) , 11.04 (sa, 1H) ppm; 13C-RMN (75 MHz, CDCl3) : δ = 16.2, 111.1, 117.8, 119.0, 125.5, 129.2, 134.1, 156.9, 172.3 ppm; HRMS (APCI-TOF) m/z Calculado para C9H10N3O [M+H]+: 176.0824. Encontrado: 176.0824.
H3C
[2-Metil-5-oxo-4- (1H-pirrol-2-il-metilen) -4, 5-dihidro-imidazol-1-il]-acetato de etilo 22: Solido ocre; p.f.: 113-114ºC; IR (NaCl) : υ =3342, 2918, 2367, 1731, 1339 cm-1; 1H-RMN (300 MHz, Acetona-d6) : δ = 1.25 (t, J = 7.0 Hz, 3H) , 2.25 (s, 3H) , 4.21 (q, J =
7.0 Hz, 2H) , 4.54 (s, 2H) , 6.34 (m, 1H) , 6.78 (m, 1H) , 7.20 (s, 1H) , 7.28 (s, 1H) , 12.92
(sa, 1H) ppm; 13C-RMN (75 MHz, Acetona-d6) : δ = 14.4, 14.8, 42.3, 62.2, 112.3, 121.1, 125.9, 126.7, 129.8, 133.4, 155.5, 168.8, 169.4 ppm; HRMS (APCI-TOF) m/z Calculado para C13H16N3O3 [M+H]+: 262.1192. Encontrado: 262.1192.
CH3
Ejemplo 10
Síntesis de 2-metil-5-tiofen-2-il-metilen-3, 5-dihidro-imidazol-4-ona (23) y (2-metil5-oxo-4-tiofen-2-il-metilen-4, 5-dihidro-imidazol-1-il) -acetato de etilo (24)
A una disolución de tiofeno-2-carboxaldehído (112 mg, 1 mmol) en tolueno (1.5 mL) , se le añaden sucesivamente NaHCO3 (420 mg, 5 mmol) , clorhidrato de acetamidina (146 mg, 1.54 mmol) y bromoacetato de etilo (0.27 mL, 2.4 mmol) . La mezcla se calienta a 108 ºC durante 7 h. El sólido formado se filtra y se lava con AcOEt. Los líquidos de filtrado se concentran a sequedad y el residuo obtenido se purifica por
cromatografía en gel de sílice utilizando como eluyente hexano / AcOEt (1:1) , obteniéndose 23 (159 mg, 32%) y 24 (26 mg, 9 %) . Metil-5-tiofen-2-il-metilen-3, 5dihidro-imidazol-4-ona 23: Sólido amarillo; p.f.: 230 ºC (descomp) ; IR (KBr) : υ =3450, 3089, 2344, 1710, 1640, 1410 cm-1; 1H-RMN (300 MHz, Acetona-d6) : δ = 2.28 (s, 3H) ,
7.13 (m, 2H) , 7.61 (d, J = 3.6 Hz, 1H) , 7.73 (d, J = 4.9 Hz, 1H) , 10.13 (sa, 1H)
ppm;13C-RMN (75 MHz, DMSO-d6) : δ = 15.6, 117.3, 127.0, 133.1, 133.6, 137.0, 137.2, 161.6, 170.4 ppm; HRMS (ESI-TOF) m/z Calculado para C9H9N2OS [M+H]+: 193.0436. Encontrado: 193.0438.
H3C
(2-Metil-5-oxo-4-tiofen-2-il-metilen-4, 5-dihidro-imidazol-1-il) -acetato de etilo 24: Solido ocre; p.f.:129-130 ºC; IR (NaCl) : υ =2982, 1717, 1645, 1415, 1207 cm-1; 1H-RMN (300 MHz, CDCl3) : δ = 1.26 (t, J = 7.3 Hz, 3H) , 2.31 (s, 3H) , 4.21 (q, J = 7.3 Hz, 2H) , 4.34 (s, 2H) , 7.08 (dd, J = 5.1, 3.7 Hz, 1H) , 7.35 (s, 1H) , 7.50 (d, J = 3.7 Hz, 1H) ,
7.59 (d, J = 5.1 Hz, 1H) ppm; 13C-RMN (75 MHz, CDCl3) : δ = 14.1, 15.6, 41.4, 62.0, 121.5, 127.5, 133.6, 134.4, 135.7, 137.5, 160.2, 167.5, 169.2 ppm; HRMS (ESI-TOF) m/z Calculado para C13H15N2O3S [M+H]+: 279.0803. Encontrado: 279.0808.
Ejemplo 11
Síntesis de 5- (3-bromo-tiofen-2-il-metilen) -2-metil-3, 5-dihidro-imidazol-4-ona (25)
A una disolución de 3-bromotiofeno-2-carboxaldedído (191 mg, 1 mmol) en dioxano (1.5 mL) , se le añaden sucesivamente NaHCO3 (420 mg, 5 mmol) , clorhidrato de acetamidina (146 mg, 1.54 mmol) y bromoacetato de etilo (0.27 mL, 2.4 mmol) . La mezcla se calienta a 108 ºC durante 5 h. El sólido formado se filtra y se lava, sucesivamente, con H2O, CH2Cl2 y hexano obteniéndose 25 como un sólido anaranjado (85 mg, 31%) ; p.f.: 255 ºC (descomp) ; IR (KBr) : υ =3089, 1718, 1638, 1419, 1225 cm-1; 1H-RMN (300 MHz, DMSO-d6) : δ = 2.23 (s, 3H) , 6.96 (s, 1H) , 7.23 (d, J=5.1 Hz, 1H) ,
7.93 (d, J=5.1 Hz, 1H) ppm;13C-RMN (75 MHz, DMSO-d6) : δ = 15.8, 113.4, 116.2, 129.7, 131.7, 133.6, 138.8, 163.6, 170.3 ppm; HRMS (ESI-TOF) m/z Calculado para C9H879BrN2OS [M+H]+: 272.9514. Encontrado: 272.9510.
H3C
Ejemplo 12
Síntesis de 3- (2-metoxi-etil) -2-metil-5-tiofen-2-il-metilen-3, 5-dihidro-imidazol-4ºna (26) En un tubo sellado se calienta a 100 ºC una mezcla constituida por 23 (192 mg, 1
mmol) , NH4Cl (26 mg, 0.49 mmol) y 2-metoxietilamina (20.1 mL) durante 9 h. Transcurrido el tiempo de reacción se concentra a vacío y el producto crudo se purifica por cromatografia en gel de sílice usando como eluyente hexano / AcOEt (1:1) , obteniéndose 26 (135 mg, 54 %) . Aceite naranja; IR (NaCl) : υ =3397, 2979, 1705, 1640, 1404 cm-1; 1H-RMN (300 MHz, CDCl3) : δ = 2.40 (s, 3H) , 3.28 (s, 3H) , 3.50 (t, J =
5.1 Hz, 2H) , 3.74 (t, J = 5.1 Hz, 2H) , 7.07 (dd, J = 4.9, 3.6 Hz, 1H) , 7.30 (s, 1H) , 7.48 (d, J = 3.6 Hz, 1H) , 7.58 (d, J=4.9 Hz, 1H) ppm; 13C-RMN (75 MHz, CDCl3) : δ = 16.0, 41.0, 59.0, 70.5, 120.5, 127.5, 133.2, 134.0, 136.3, 137.7, 162.3, 169.9 ppm; HRMS (APCI-TOF) m/z Calculado para C12H15N2O2S [M+H]+: 251.0854. Encontrado: 251.0857.
Ejemplo 13
Síntesis de 2-fenil-5-tiofen-2-il-metilen-3, 5-dihidro-imidazol-4-ona (27)
Una disolución de yoduro potásico (399 mg, 2.4 mmol) y bromoacetato de etilo (0.27 mL, 2.4 mmol) en sec-butanol (0.5 mL) se calienta a reflujo durante 1 h,
seguidamente se deja enfriar la mezcla a temperatura ambiente y posteriormente se le añade, sucesivamente, tiofeno-2-carboxaldehido (112 mg, 1 mmol) , NaHCO3 (420 mg, 5 mmol) , clorhidrato de benzamidina (241 mg, 1.54 mmol) y sec-butanol (1.5 mL) . La mezcla de reacción se calienta a reflujo durante 1 h. El precipitado formado se filtra y lava con H2O y EtOH, obteniéndose 27 como un sólido amarillo (250 mg, 98%) ; p.f.: >
300 ºC; IR (KBr) : υ = 3425, 2986, 2344, 1698, 1635, 1420 cm-1; 1H-RMN (300 MHz, DMSO-d6) : δ = 7.18 (dd, J=5.1, 3.6 Hz, 1H) , 7.38 (s, 1H) , 7.59 (m, 3H) , 7.72 (d, J=3.6 Hz, 1H) , 7.91 (d, J=5.1 Hz, 1H) , 8.14 (dd, J=7.6, 1.3 Hz, 2H) , 12.06 (sa, 1H) ppm;13CRMN (75 MHz, DMSO-d6) : δ = 119.0, 126.7, 127.2, 127.4, 128.5, 131.9, 134.2, 134.4, 137.4, 137.5, 158.6, 170.6 ppm; HRMS (ESI-TOF) m/z Calculado para C14H11N2OS [M+H]+: 255.0592. Encontrado: 255.0590.
Ejemplo 14
Síntesis de 5-furan-2-il-metilen-2-metil-3, 5-dihidro-imidazol-4-ona (28) 38 y (4furan-2-il-metilen-2-metil-5-oxo-4, 5-dihidro-imidazol-1-il) -acetato de etilo (29)
A una disolución de furano-2-carboxaldehído (96 mg, 1 mmol) en tolueno (1.5 mL) , se le añaden sucesivamente NaHCO3 (420 mg, 5 mmol) , clorhidrato de 10 acetamidina (146 mg, 1.54 mmol) y bromoacetato de etilo (0.27 mL, 2.4 mmol) . La mezcla se calienta a 108 ºC durante 1.5 h. El sólido formado se filtra y se lava con AcOEt. Los líquidos de filtrado se concentran a sequedad y el residuo obtenido se purifica por cromatografía en gel de sílice utilizando como eluyente hexano / AcOEt (1:1) , obteniéndose 28 (30 mg, 17%) y 29 (55 mg, 21 %) . 5-Furan-2-ilmetilen-2-metil
3, 5-dihidro-imidazol-4-ona 28: Sólido ocre; p.f.: 185 ºC (descomp) ; 1H-RMN (300 MHz, Acetona-d6) : δ = 2.28 (s, 3H) , 6.64 (m, 1H) , 6.72 (m, 1H) , 7.40 (m, 1H) , 7.84 (s, 1H) , 10.18 (sa, 1H) ppm; HRMS (ESI-TOF) m/z Calculado para C9H9N2O2 [M+H]+: 177.0664. Encontrado: 177.0664.
H3C
(4-Furan-2-il-metilen-2-metil-5-oxo-4, 5-dihidro-imidazol-1-il) -acetato de etilo 29: Solido ocre; p.f.:115-116 ºC; IR (NaCl) : υ =3415, 2982, 1747, 1647, 1563, 1469 cm-1; 1H-RMN (300 MHz, CDCl3) : δ = 1.25 (t, J=7.0 Hz, 3H) , 2.31 (s, 3H) , 4.20 (q, J=7.0 Hz, 2H) , 4.33 (s, 2H) , 6.53 (s, 1H) , 6.99 (s, 1H) , 7.20 (m, 1H) , 7.62 (s, 1H) ppm; 13C
RMN (75 MHz, CDCl3) : δ = 14.1, 15.6, 41.4, 62.1, 113.1, 114.9, 119.1, 135.1, 146.3,
150.7, 160.9, 167.4, 169.5 ppm; HRMS (ESI-TOF) m/z Calculado para C13H15N2O4 [M+H]+: 263.1032. Encontrado: 263.1031.
Ejemplo 15
Síntesis de 4- (1H-indol-2-il-metilen) -2-metil-4H-oxazol-5-ona (30)
A una disolución de indol-2-carboxaldehido (145 mg, 1.15 mmol) en anhidrido acético (0.78 mL) , se le añaden sucesivamente acetato sódico (NaOAc, 90 mg, 1.1 mmol) y N-acetilglicina (117 mg, 1 mmol) . La mezcla de reacción se calienta a reflujo durante 30 min, se adiciona agua (5 mL) y se agita a temperatura ambiente durante 30 min adicionales, precipitando un sólido que se filtra y purifica por cromatografía en gel de sílice usando como eluyente hexano/ AcOEt (8:2) , obteniéndose 30 como un sólido anaranjado (174 mg, 77%) ; p.f.: 180-182 ºC; IR (NaCl) : υ =3390, 2390, 1773, 1654, 1112 cm-1; 1H-RMN (300 MHz, CDCl3) : δ = 2.42 (s, 3H) , 7.01 (s, 1H) , 7.16 (at, J = 7.9 Hz, 1H) , 7.34 (m, 2H) , 7.48 (d, J = 8.2 Hz, 1H) , 7.69 (d, J = 7.9 Hz, 1H) , 10.38 (sa, 1H) ppm; 13C-RMN (75 MHz, CDCl3) : δ = 15.6, 111.6, 113.3, 120.7, 120.9, 122.1, 125.9, 127.8, 129.6, 132.9, 139.1, 164.5, 166.7 ppm; HRMS (ESI-TOF) m/z Calculado para C13H12N3O [M+H]+: 227.0821. Encontrado: 227.0819.
CH3
Ejemplo 16
Síntesis de 5- (1H-indol-2-il-metilen) -2-metil-3, 5-dihidro-imidazol-4-ona (31) e [4 (1H-indol-2-il-metilen) -2-metil-5-oxo-4, 5-dihidroimidazol-1-il]-acetato de etilo (32)
A una disolución de indol-2-carboxaldehido (145 mg, 1 mmol) en tolueno (1.5
mL) , se le añaden sucesivamente NaHCO3 (420 mg, 5 mmol) , clorhidrato de acetamidina (146 mg, 1.54 mmol) y bromoacetato de etilo (0.27 mL, 2.4 mmol) . La mezcla se calienta a 108 ºC durante 1 h. El sólido formado se filtra y se lava con AcOEt. Los líquidos de filtrado se concentran a sequedad y el residuo obtenido se purifica por cromatografía en gel de sílice utilizando como eluyente hexano / AcOEt (1:1) ,
obteniéndose 31 (157 mg, 70%) y 32 (31 mg, 10%) . 5- (1H-Indol-2-il-metilen) -2-metil3, 5-dihidro-imidazol-4-ona 31: Sólido anaranjado; p.f.: 249-250 ºC; IR (KBr) : υ =3322, 3146, 2375, 1717, 1633, 1226 cm-1; 1H-RMN (300 MHz, Acetona-d6) : δ = 2.40 (s, 3H) , 6.97 (s, 1H) , 6.99 (s, 1H) , 7.04 (at, J = 8.2 Hz, 1H) , 7.21 (at, J = 7.5 Hz, 1H) , 7.52 (d, J = 7.5 Hz, 1H) , 7.60 (d, J = 8.2 Hz, 1H) , 10.27 (sa, 1H) , 11.28 (sa, 1H) ppm; 13C
RMN (75 MHz, Acetona-d6) : δ = 16.2, 111.0, 112.4, 114.9, 120.6, 121.9, 125.0, 128.9, 135.1, 139.1, 139.5, 162.0, 170.7 ppm. HRMS (APCI-TOF) m/z Calculado para C13H12N3O [M+H]+: 226.0980. Encontrado: 226.0979.
CH3
[4- (1H-Indol-2-il-metilen) -2-metil-5-oxo-4, 5-dihidroimidazol-1-il]-acetato de etilo 32: Sólido anaranjado; p.f.: 124-126 ºC; IR (NaCl) : υ =3354, 2983, 2343, 1748, 1711, 1641, 1214 cm-1; 1H-RMN (300 MHz, Acetona-d6) : δ = 1.25 (t, J = 7.1 Hz, 3H) , 2.38 (s, 3H) ,
4.21 (q, J = 7.1 Hz, 2H) , 4.50 (s, 2H) , 7.05 (m, 2H) , 7.11 (s, 1H) , 7.22 (at, J = 8.2 Hz, 1H) , 7.52 (d, J = 8.2 Hz, 1H) , 7.62 (d, J = 8.2 Hz, 1H) , 11.08 (sa, 1H) ppm; 13C-RMN (75 MHz, Acetona-d6) : δ = 14.3, 15.4, 41.9, 62.3, 112.1, 112.7, 116.8, 120.9, 122.3, 125.5, 129.0, 135.0, 137.4, 139.9, 162.2, 168.8, 169.2 ppm; HRMS (APCI-TOF) m/z
Calculado para C17H18N3O3 [M+H]+: 312.1348. Encontrado: 312.1345.
O N H
N
N
H3C
O
O
CH3
Ejemplo 17
Síntesis de 4- (3-bromo-1H-indol-2-il-metilen) -2-metil-5-oxo-4, 5-dihydro-imidazol1-il]-acetato de etilo (33)
A una disolución de 3-bromoindol-2-carboxaldehido (224 mg, 1 mmol) en tolueno (1.5 mL) , se le añaden sucesivamente NaHCO3 (420 mg, 5 mmol) , clorhidrato 10 de acetamidina (146 mg, 1.54 mmol) y bromoacetato de etilo (0.27 mL, 2.4 mmol) . La mezcla se calienta a 108 ºC durante 1 h. El sólido formado se filtra y se lava con AcOEt. Los líquidos de filtrado se concentran a sequedad y el residuo obtenido se purifica por cromatografía en gel de sílice utilizando como eluyente hexano / AcOEt (1:1) , obteniéndose 33 como un sólido ocre (78 mg, 20%) ; p.f.: 170-171 ºC; IR (KBr) : υ 15 =3339, 2926, 2344, 1748, 1714, 1640, 1212 cm-1; 1H-RMN (300 MHz, Acetona-d6) : δ = 1.25 (t, J = 7.0 Hz, 3H) , 2.41 (s, 3H) , 4.22 (q, J = 7.0 Hz, 2H) , 4.53 (s, 2H) , 7.09 (m, 2H) , 7.18 (at, J = 7.6 Hz, 1H) , 7.32 (at, J = 7.6 Hz, 1H) , 7.52 (d, J = 8.2 Hz, 1H) , 7.58 (d, J = 8.2 Hz, 1H) , 11.37 (sa, 1H) ppm;13C-RMN (50 MHz, Acetona-d6) : δ = 14.3, 15.6, 42.0, 62.3, 100.0, 112.6, 113.3, 120.2, 121.9, 126.7, 127.9, 129.5, 131.9, 132.5,
138.6, 163.7, 168.6 ppm; HRMS (ESI-TOF) m/z Calculado para C17H1779Br N3O3 [M+H]+: 390.0453. Encontrado: 390.0443.
Br
CH3
Ejemplo 18
Síntesis de 5- (1H-indol-2-ilmetilen) -3- (2-metoxietil) -2-metil-3, 5-dihidroimidazol-4ºna (34) En un tubo sellado se calienta a 100 ºC una mezcla constituida por 31 (225 mg, 1
mmol) , NH4Cl (26 mg, 0.49 mmol) y 2-metoxietilamina (20 mL) durante 6 horas. Transcurrido el tiempo de reacción se concentra a vacío y el producto crudo se purifica por cromatografia en gel de sílice usando como eluyente hexano / AcOEt (1:1) , obteniéndose 34 (45 mg, 16%) . Aceite ocre; 1H-RMN (300 MHz, CDCl3) : δ = 2.45 (s, 3H) , 3.31 (s, 3H) , 3.54 (t, J = 5.1 Hz, 2H) , 3.78 (t, J = 5.1 Hz, 2H) , 6.90 (s, 1H) , 7.07
(at, J = 7.9 Hz, 1H) , 7.13 (s, 1H) , 7.25 (at, J = 8.2 Hz, 1H) , 7.42 (d, J = 7.9 Hz, 1H) ,
7.60 (d, J = 8.2 Hz, 1H) , 10.79 (sa, 1H) ppm.
Ejemplo 19 15 Síntesis de 5- (3-bromo-1H-indol-2-il-metilen) -2-metil-3, 5-dihidroimidazol-4-ona (35)
A una disolución de 31 (225 mg, 1 mmol) en una mezcla de DMF (7 mL) y CH2Cl2 (14 mL) se le añade N-bromosuccinimida (NBS, 196 mg, 1.1 mmol) . La mezcla se agita a temperatura ambiente durante 8 horas. Una vez terminada la reacción,
el precipitado formado se filtra y lava sucesivamente con CH2Cl2 y H2O, obteniéndose 35 como un sólido anaranjado (270 mg, 89%) ; p.f.: 245 ºC (descomp) ; IR (KBr) : υ =3338, 3059, 1710, 1634, 1215 cm-1; 1H-RMN (300 MHz, DMSO-d6) : δ = 2.36 (s, 3H) ,
6.98 (s, 1H) , 7.17 (ta, J = 7.9 Hz, 1H) , 7.30 (at, J = 8.2 Hz, 1H) , 7.51 (d, J = 7.9 Hz, 1H) , 7.58 (d, J = 8.2 Hz, 1H) , 10.39 (sa, 1H) , 11.35 (sa, 1H) ppm; 13C-RMN (75 MHz,
DMSO-d6) : δ = 15.7, 97.7, 109.1, 112.7, 118.3, 120.4, 124.9, 129.9, 130.5, 137.1, 138.8, 163.2, 170.0 ppm; HRMS (ESI-TOF) m/z Calculado para C13H1179Br N3O [M+H]+: 304.0085. Encontrado: 304.0089.
CH3
Ejemplo 20
Síntesis de 5-[ (1H-indol-2-il) - (2-metoxietilamino) -metilen]-2-metil-3, 5dihidroimidazol-4-ona (36) y 5-[ (1H-indol-2-il) - (2-metoxietilamino) -metilen]-3- (25 metoxietil) -2-metil-3, 5-dihidroimidazol-4-ona (37)
Una mezcla constituida por 35 (304 mg, 1 mmol) , NH4Cl (26 mg, 0.49 mmol) y 2-metoxietilamina (20 mL) , se calienta a reflujo durante 3 horas. Transcurrido el tiempo de reacción se concentra a vacío y el producto crudo se purifica por cromatografia en gel de sílice usando como eluyente AcOEt, obteniéndose 36 (173 mg, 58%) y 37 (21
mg, 6%) . 5-[ (1H-indol-2-il) - (2-metoxietilamino) -metilen]-2-metil-3, 5-dihidroimidazol4-ona 36: Solido anaranjado; p.f.: 233-235 ºC; IR (NaCl) : υ =3342, 2917, 2368, 1651, 1599, 1259 cm-1; 1H-RMN (300 MHz, CDCl3) : δ = 2.34 (s, 3H) , 3.47 (s, 3H) , 3.72 (t, J = 5.3 Hz, 2H) , 3.94 (q, J = 5.3 Hz, 2H) , 7.10 (at, J = 7.6 Hz, 1H) , 7.13 (s, 1H) , 7.28 (at, J = 7.2 Hz, 1H) , 7.49 (d, J = 8.2 Hz, 1H) , 7.66 (d, J = 8.2 Hz, 1H) , 9.71 (sa, 1H) , 10.41
(sa, 1H) , 12.16 (sa, 1H) ppm; 13C-RMN (75 MHz, CDCl3) : δ = 15.4, 46.1, 59.2, 71.2, 109.3, 112.2, 114.3, 120.4, 121.6, 124.8, 127.4, 128.8, 137.0, 143.5, 147.6, 168.9 ppm; HRMS (ESI-TOF) m/z Calculado para C16H19N4O2 [M+H]+: 299.1508. Encontrado: 299.1508.
5. [ (1H-Indol-2-il) - (2-metoxietilamino) -metilen]-3- (2-metoxietil) -2-metil-3, 5dihidroimidazol-4-ona 37: Solido anaranjado; p.f.: 116-118 ºC; IR (NaCl) : υ =3279, 2925, 1626, 1469, 1121 cm-1; 1H-RMN (300 MHz, CDCl3) : δ = 2.36 (s, 3H) , 3.30 (s, 3H) , 3.47 (s, 3H) , 3.57 (t, J = 5.3 Hz, 2H) , 3.72 (t, J = 5.4 Hz, 2H) , 3.85 (t, J = 5.3 Hz, 2H) , 3.94 (q, J = 5.4 Hz, 2H) , 7.11 (m, 2H) , 7.27 (at, J = 8.2 Hz, 1H) , 7.48 (d, J = 8.2 Hz, 1H) , 7.66 (d, J = 8.2 Hz, 1H) , 9.71 (sa, 1H) , 12.19 (sa, 1H) ppm; 13C-RMN (75 MHz, CDCl3) : δ = 15.0, 40.7, 46.1, 59.0, 59.3, 71.0, 71.3, 109.2, 112.2, 114.0, 120.4, 121.7, 124.7, 127.5, 129.3, 137.0, 145.7, 146.9, 167.4 ppm; HRMS (ESI-TOF) m/z Calculado para C19H25N4O3 [M+H]+: 357.1927. Encontrado: 357.1930.
CH3 O
H N O
N
H N
N
CH3
O CH3
Ejemplo 21
Síntesis de 4- (1H-indol-2-il-metilen) -2-fenil-4H-oxazol-5-ona (38)
A una disolución de indol-2-carboxaldehido (145 mg, 1.15 mmol) en anhidrido acético (0.78 mL) , se le añade acetato sódico (NaOAc, 90 mg, 1.1 mmol) y ácido hipúrico (179 mg, 1 mmol) . La mezcla de reacción se calienta a reflujo durante 1 h. Una vez terminada la reacción se añade una disolución saturada de NaHCO3 y se extrae con AcOEt. Las fases orgánicas se lavan varias veces con disolucion saturada de NaHCO3 y
se secan sobre Na2SO4. Después de eliminar el disolvente a vacío, se obtiene 38 como un sólido anaranjado (155 mg, 54%) ; p.f.: 186-188 ºC; IR (KBr) : υ =3384, 2344, 1791, 1652, 1325, 1116 cm-1; 1H-RMN (300 MHz, Acetona-d6) : δ = 7.09 (at, J = 7.6 Hz, 1H) , 7.30 (m, 2H) , 7.39 (s, 1H) , 7.64 (m, 5H) , 8.25 (d, J = 7.3 Hz, 2H) , 11.05 (sa, 1H) ppm; 13C-RMN (75 MHz, CDCl3) : δ = 113.2, 114.5, 116.3, 121.4, 121.6, 122.7, 126.5,
127.2, 128.2, 128.9, 129.9, 133.6, 134.1, 140.8, 162.9, 166.9 ppm; HRMS (ESI-TOF) m/z Calculado para C18H13N2O2 [M+H]+: 289.0977. Encontrado: 289.0980.
Ejemplo 22
Síntesis de 5- (1H-indol-2-il-metilen) -2-fenil-3, 5-dihidro-imidazol-4-ona (39)
Una disolución de yoduro potásico (399 mg, 2.4 mmol) y bromoacetato de etilo (0.27 mL, 2.4 mmol) en sec-butanol (0.5 mL) se calienta a reflujo durante 1 h.
Seguidamente se deja enfriar la mezcla a temperatura ambiente y posteriormente se le añade, sucesivamente, indol-2-carboxaldehído (145 mg, 1 mmol) , NaHCO3 (420 mg, 5 mmol) , clorhidrato de benzamidina (241 mg, 1.54 mmol) y sec-butanol (1.5 mL) . La mezcla de reacción se calienta a reflujo durante 1 h adicional. El precipitado formado se filtra y lava con H2O y EtOH, obteniéndose 39 como un sólido anaranjado (195 mg,
68%) ; p.f.: > 300 ºC; IR (KBr) : υ =3358, 3059, 2364, 1696, 1632, 1239 cm-1; 1H-RMN (300 MHz, DMSO-d6) : δ = 7.04 (at, J = 7.6 Hz, 1H) , 7.10 (s, 1H) , 7.22 (m, 2H) , 7.62 (m, 5H) , 8.34 (dd, J = 7.6, 1.6 Hz, 2H) , 11.22 (sa, 1H) , 12.27 (sa, 1H) ppm;13C-RMN (75 MHz, DMSO-d6) : δ = 110.9, 111.9, 115.1, 119.6, 120.7, 123.9, 126.0, 127.2, 127.4, 128.4, 131.9, 133.3, 138.0, 138.4, 158.7, 170.6 ppm; HRMS (ESI-TOF) m/z Calculado para C18H14N3O [M+H]+: 288.1137. Encontrado: 288.1139.
Ejemplo 23
Síntesis de 5- (3-bromo-1H-indol-2-il-metilen) -2-fenil-3, 5-dihidro-imidazol-4-ona (40)
A una disolución de 39 (287 mg, 1 mmol) en DMF (13.5 mL) se le añade Nbromosuccinimida (NBS, 196 mg, 1.1 mmol) y la mezcla se agita a temperatura ambiente durante 5 h. Una vez terminada la reacción se adiciona n-hexano y el precipitado formado se filtra y se lava con abundante agua, obteniéndose 40 (348 mg, 95% ) . Sólido anaranjado;
p.f.: 246 ºC (descomp) ; IR (KBr) : υ =3346, 3060, 1705, 1633, 1219, 925 cm-1; 1H-RMN (300 MHz, DMSO-d6) : δ = 6.98 (s, 1H) , 7.18 (at, J = 7.9 Hz, 1H) , 7.34 (at, J = 8.2 Hz, 1H) , 7.50 (d, J = 7.9 Hz, 1H) , 7.65 (m, 3H) , 7.80 (d, J = 8.2 Hz, 1H) , 8.42 (d, J = 7.6 Hz, 2H) , 11.41 (sa, 1H) , 12.27 (sa, 1H) ppm; 13C-RMN (75 MHz, DMSO-d6) : δ = 100.0, 111.3, 113.8, 119.5, 121.6, 126.2, 127.3, 128.4, 128.6, 129.4, 131.8, 133.2, 138.7, 140.5, 161.1, 171.4 ppm; HRMS (ESI-TOF) m/z Calculado para C18H1379Br N3O [M+H]+: 366.0242. Encontrado: 366.0242.
Ejemplo 24
Síntesis de 5-[ (1H-indol-2-il) - (2-metoxietilamino) -metilen]-3- (2-metoxietil) -2-fenil3, 5-dihidro-imidazol-4-ona (41) Una mezcla constituida por 40 (366 mg, 1 mmol) , NH4Cl (26 mg, 0.49 mmol) y
2-metoxietilamina (20 mL) , se calienta a reflujo durante 8 h. Transcurrido el tiempo de reacción se concentra a vacío y el producto crudo se purifica por cromatografia en gel de sílice usando como eluyente hexano / AcOEt (1:1) , obteniéndose 41 (125 mg, 30%) ; sólido anaranjado; p.f.: 109-111ºC; IR (KBr) : υ =3258, 2964, 2344, 1627, 1261 cm-1; 1H-RMN (300 MHz, CDCl3) : δ = 3.26 (s, 3H) , 3.49 (s, 3H) , 3.65 (t, J = 5.9 Hz, 1H) ,
3.77 (t, J = 5.4 Hz, 1H) , 4.03 (m, 4H) , 7.11 (at, J = 7.9 Hz, 1H) , 7.21 (s, 1H) , 7.27 (at, J = 6.9 Hz, 1H) , 7.57 (m, 4H) , 7.67 (d, J = 8.2 Hz, 1H) , 7.79 (dd, J = 7.9, 2.3 Hz, 2H) ,
10.10 (sa, 1H) , 12.41 (sa, 1H) ppm; 13C-RMN (75 MHz, CDCl3) : δ = 41.4, 46.2, 58.8, 59.2, 70.4, 71.1, 109.6, 112.2, 114.8, 120.4, 121.7, 124.9, 127.4, 128.6 (2C) , 129.0, 129.3, 130.8, 137.0, 146.2, 148.1, 167.9 ppm; HRMS (APCI-TOF) m/z Calculado para C24H27N4O3 [M+H]+: 419.2083. Encontrado: 419.2073.
CH3 O
H
N O H
N
N
O CH3
Ejemplo 25
Síntesis de 5-[ (1H-indol-2-il) - (2-metoxietilamino) -metilen]-3- (2-metoxi-etil) -3, 5dihidro-imidazol-4-ona (42)
Una mezcla constituida por 5-bromo-pirimido[1, 6-a]indol-3-carboxilato de metilo (305 mg, 1 mmol) , NH4Cl (26 mg, 0.49 mmol) y 2-metoxietilamina (20 mL) , se calienta a reflujo durante 1 h. Transcurrido el tiempo de reacción se elimina la amina a presión reducida, se añade H2O y se extrae con AcOEt. Las fases orgánicas se lavan con salmuera y se secan sobre Na2SO4. Una vez eliminado a vacío el disolvente se obtiene el producto crudo que se purifica por cromatografia en gel de sílice usando como eluyente hexano / AcOEt (3:7) , obteniéndose 42 (140 mg, 41%) ; sólido anaranjado; p.f.: 72-74 ºC; IR (KBr) : υ =3213, 2932, 1632, 1467, 1112 cm-1; 1H-RMN (500 MHz, CDCl3) : δ =
3.37 (s, 3H) , 3.48 (s, 3H) , 3.58 (t, J = 5.1 Hz, 2H) , 3.73 (t, J = 5.1 Hz, 2H) , 3.88 (t, J =
5.1 Hz, 2H) , 3.99 (m, 2H) , 7.10 (at, J = 7.4 Hz, 1H) , 7.16 (s, 1H) , 7.28 (at, J = 7.4 Hz, 1H) , 7.37 (s, 1H) , 7.49 (d, J = 8.5 Hz, 1H) , 7.66 (d, J = 7.8 Hz, 1H) , 10.10 (sa, 1H) ,
12.18 (sa, 1H) ppm; 13C-RMN (75 MHz, Acetone-d6) : δ = 40.5, 46.1, 57.9, 58.2, 70.6, 71.2, 109.3, 112.3, 114.5, 120.3, 121.7, 124.7, 127.7, 129.0, 137.3, 137.9, 148.1, 166.7 ppm; HRMS (APCI-TOF) m/z Calculado para C18H23N4O3 [M+H]+ : 343.1770. Encontrado: 343.1760.
H
CH3
N
O
N
H
O
N
N
O H3C
Ejemplo 26 Síntesis de -3-butil-5-[butilamino- (1H-indol-2-il) -metilen]-3, 5-dihidro-imidazol-4ºna (43) Una mezcla constituida por 5-bromo-pirimido[1, 6-a]indol-3-carboxilato de metilo (305 mg, 1 mmol) , NH4Cl (26 mg, 0.49 mmol) y n-butilamina (23 mL) , se calienta a reflujo durante 3 h. Transcurrido el tiempo de reacción se elimina la amina a presión reducida, se añade H2O y se extrae con CH2Cl2. Las fases orgánicas se lavan con salmuera y se secan sobre Na2SO4. Una vez eliminado a vacío el disolvente se obtiene el producto crudo que se purifica por cromatografia en gel de sílice usando como eluyente hexano / AcOEt (1:1) , obteniéndose 43 (176 mg, 52%) ; sólido amarillo; p.f.: 72-73 ºC; IR (KBr) : υ =3228, 2956, 1622, 1463, 1274 cm-1; 1H-RMN (300 MHz, 5 CDCl3) : δ = 0.96 (m, 6H) , 1.37 (m, 2H) , 1.55 (m, 2H) , 1.69 (m, 2H) , 1.79 (m, 2H) , 3.70 (t, J = 7.2 Hz, 2H) , 3.81 (m, 2H) , 7.10 (at, J = 7.7 Hz, 1H) , 7.15 (s, 1H) , 7.21 (s, 1H) ,
7.29 (at, J = 8.2 Hz, 1H) , 7.51 (d, J = 8.2 Hz, 1H) , 7.66 (d, J = 7.7 Hz, 1H) , 10.09 (sa, 1H) , 12.38 (sa, 1H) ppm; 13C-RMN (75 MHz, CDCl3) : δ = 13.6, 13.8, 20.0, 20.1, 31.8, 32.0, 41.1, 46.3, 109.9, 112.2, 113.6, 120.5, 121.8, 125.1, 127.3, 128.7, 135.2, 137.2,
148.9, 165.8 ppm; HRMS (APCI-TOF) m/z Calculado para C20H27N4O [M+H]+ : 339.2185. Encontrado: 339.2185.
Ejemplo 27 Síntesis de 5-[ (1H-indol-2-il) -isopropilamino-metilen]-3-isopropil-3, 5-dihidroimidazol-4-ona (44)
Una mezcla constituida por 5-bromo-pirimido[1, 6-a]indol-3-carboxilato de metilo (305 mg, 1 mmol) , NH4Cl (26 mg, 0.49 mmol) e isopropilamina (20 mL) , se 20 calienta a reflujo durante 2 h. Transcurrido el tiempo de reacción se elimina la amina a presión reducida, se añade H2O y se extrae con CH2Cl2. Las fases orgánicas se lavan con salmuera y se secan sobre Na2SO4. Una vez eliminado a vacío el disolvente se obtiene el producto crudo que se purifica por cromatografia en gel de sílice usando como eluyente hexano / AcOEt (1:1) , obteniéndose 44 (53 mg, 17%) ; aceite anaranjado; 25 IR (NaCl) : υ =3273, 2973, 1623, 1532, 1469 cm-1; 1H-RMN (300 MHz, Acetona-d6) : δ = 1.40 (d, J = 6.9 Hz, 12H) , 4.34 (m, 1H) , 4.54 (m, 1H) , 7.10 (at, J = 7.9 Hz, 1H) , 7.27 (m, 2H) , 7.55 (s, 1H) , 7.59 (d, J = 8.2 Hz, 1H) , 7.69 (d, J = 7.9 Hz, 1H) , 10.00 (sa, 1H) ,
12.26 (sa, 1H) ppm; 13C-RMN (75 MHz, Acetona-d6) : δ = 22.2, 24.3, 44.2, 47.6, 109.2,
112.9, 115.8, 121.1, 122.4, 125.3, 128.5, 129.5, 135.7, 138.0, 148.2, 166.9 ppm; HRMS (ESI-TOF) m/z Calculado para C18H23N4O [M+H]+ : 311.1872. Encontrado: 311.1862.
CH3
H3C NH
N
H
O
N
CH3
N
CH3
Ejemplo 28
Síntesis de 3-benzil-5-[benzilamino- (1H-indol-2-il) -metilen]-3, 5-dihidro-imidazol-4ºna (45)
Una mezcla constituida por 5-bromo-pirimido[1, 6-a]indol-3-carboxilato de metilo (305 mg, 1 mmol) , NH4Cl (26 mg, 0.49 mmol) y benzilamina (25 mL) , se calienta a reflujo durante 1 h. Transcurrido el tiempo de reacción se elimina la amina a presión reducida, se añade H2O y se extrae con CH2Cl2. Las fases orgánicas se lavan con salmuera y se secan sobre Na2SO4. Una vez eliminado a vacío el disolvente se obtiene el producto crudo que se purifica por cromatografia en gel de sílice usando como eluyente hexano / AcOEt (3:7) , obteniéndose 45 (171 mg, 42%) ; sólido amarillo; p.f.: 184-186 ºC; IR (KBr) : υ =3188, 2919, 1607, 1272, 701 cm-1; 1H-RMN (300 MHz, CDCl3) : δ = 4.88 (s, 2H) , 5.02 (d, J = 5.9 Hz, 2H) , 7.11 (at, J = 7.9 Hz, 1H) , 7.15 (s, 1H) , 7.20 (s, 1H) , 7.38 (m, 12H) , 7.63 (d, J = 7.9 Hz, 1H) , 10.34 (sa, 1H) , 12.19 (sa, 1H) ppm; 13C-RMN (75 MHz, CDCl3) : δ = 44.7, 50.3, 110.0, 112.2, 114.2, 120.6,
121.9, 125.2, 127.2, 127.3, 127.6, 127.8, 127.9, 128.4, 128.9, 129.1, 135.9, 136.5, 137.1, 137.3, 148.9, 166.2 ppm; HRMS (APCI-TOF) m/z Calculado para C26H23N4O [M+H]+ : 407.1872. Encontrado: 407.1863.
Ejemplo 29
Síntesis de 3-ciclohexil-5-[ciclohexilamino- (1H-indol-2-il) -metilen]-3, 5-dihidroimidazol-4-ona (46)
Una mezcla constituida por 5-bromo-pirimido[1, 6-a]indol-3-carboxilato de metilo (305 mg, 1 mmol) , NH4Cl (26 mg, 0.49 mmol) y ciclohexilamina (27 mL) , se calienta a reflujo durante 1 h. Transcurrido el tiempo de reacción se elimina la amina a presión reducida, se añade H2O y se extrae con CH2Cl2. Las fases orgánicas se lavan con salmuera y se secan sobre Na2SO4. Una vez eliminado a vacío el disolvente se obtiene el producto crudo que se purifica por cromatografia en gel de sílice usando como eluyente CH2Cl2, obteniéndose 43 (152 mg, 39%) ; sólido anaranjado; p.f.: 167168 ºC; IR (NaCl) : υ =3242, 2931, 2854, 1625, 1533, 1467 cm-1; 1H-RMN (300 MHz, Acetona-d6) : δ = 1.26 (m, 2H) , 1.43 (m, 8H) , 1.67 (m, 4H) , 1.95 (m, 6H) , 3.95 (m, 1H) ,
4.26 (m, 1H) , 7.09 (at, J = 8.4 Hz, 1H) , 7.26 (m, 2H) , 7.52 (s, 1H) , 7.59 (dd, J = 8.4 Hz, 1H) , 7.69 (d, J = 7.7 Hz, 1H) , 10.15 (sa, 1H) , 12.26 (sa, 1H) ppm; 13C-RMN (75 MHz,
CDCl3) : δ = 24.3, 25.3, 25.4, 25.7, 33.1, 33.8, 50.8, 53.6, 108.7, 112.2, 114.2, 120.5, 121.7, 124.9, 127.4, 128.5, 133.2, 137.0, 148.0, 165.5 ppm; HRMS (ESI-TOF) m/z Calculado para C24H31N4O [M+H]+ : 391.2498. Encontrado: 391.2498.
Ejemplo 30 Síntesis de -3- (2-metoxietil) -5-[ (2-metoxietilamino) - (1H-pirrolo[2, 3-b]piridin-2-il) metilen]-3, 5-dihidro-imidazol-4-ona (47)
Una mezcla constituida por 5-bromo-pirido[3’, 2’: 4, 5]pirrolo[1, 2-c]pirimidin7-carboxilato de metilo (306 mg, 1 mmol) , NH4Cl (26 mg, 0.49 mmol) y 225 metoxietilamina (20 mL) , se calienta a reflujo durante 1 h. Transcurrido el tiempo de reacción se elimina la amina a presión reducida, se añade H2O y se extrae con AcOEt. Las fases orgánicas se lavan con salmuera y se secan sobre Na2SO4. Una vez eliminado a vacío el disolvente se obtiene el producto crudo que se purifica por cromatografia en gel de sílice usando como eluyente AcOEt / EtOH (9:1) , obteniéndose 47 (116.6 mg, 34%) ; sólido anaranjado; p.f.: 80-83 ºC; IR (KBr) : υ = 3127, 2931, 2886, 1639, 1274, 1117 cm-1; 1H-RMN (300 MHz, CDCl3) : δ = 3.33 (s, 3H) , 3.48 (s, 3H) , 3.56 (t, J = 5.1 Hz, 2H) , 3.70 (t, J = 5.3 Hz, 2H) , 3.84 (t, J = 5.1 Hz, 2H) , 3.90 (q, J = 5.3 Hz, 2H) , 7.07
(dd, J = 7.9, 4.6 Hz, 1H) , 7.11 (s, 1H) , 7.32 (s, 1H) , 7.96 (dd, J = 7.9, 1.3 Hz, 1H) , 8.40 (dd, J = 4.6, 1.3 Hz, 1H) , 9.91 (sa, 1H) , 12.24 (sa, 1H) ppm; 13C-RMN (75 MHz, Acetone-d6) : δ = 40.5, 45.9, 57.9, 58.2, 70.4, 71.1, 107.7, 114.6, 116.8, 119.6, 129.3, 129.8, 138.6, 146.5, 147.2, 148.7, 166.5 ppm; HRMS (APCI-TOF) m/z Calculado para C17H22N5O3 [M+H]+ : 344.1723. Encontrado: 344.1732.
H
CH3
N
N ON
H O
N 47 N
O
H3C
Ejemplo 31
Síntesis de 3-isopropil-5-[isopropilamino- (1H-pirrolo[2, 3-b]piridin-2-il) -metilen]3, 5-dihidro-imidazol-4-ona (48)
Una mezcla constituida por 5-bromo-pirido[3’, 2’: 4, 5]pirrolo[1, 2-c]pirimidin7-carboxilato de metilo (306 mg, 1 mmol) , NH4Cl (26 mg, 0.49 mmol) e isopropilamina (20 mL) , se calienta a reflujo durante 2 h. Transcurrido el tiempo de reacción se elimina la amina a presión reducida, se añade H2O y se extrae con AcOEt. Las fases orgánicas se lavan con salmuera y se secan sobre Na2SO4. Una vez eliminado a vacío el disolvente se obtiene el producto crudo que se purifica por cromatografia en gel de sílice usando como eluyente hexano/ AcOEt (1:1) , obteniéndose 48 (152 mg, 49%) ; sólido amarillo; p.f.: 194-195 ºC; IR (KBr) : υ = 3127, 2970, 1622, 1281 cm-1; 1H-RMN (300 MHz, CDCl3) : δ = 1.40 (d, J = 6.6 Hz, 6H) , 1.43 (d, J = 6.6 Hz, 6H) ,
4.39 (hept, J = 6.6 Hz, 1H) , 4.46 (m, 1H) , 7.07 (s, 1H) , 7.10 (dd, J = 8.1, 4.6 Hz, 1H) ,
7.28 (s, 1H) , 7.98 (dd, J = 8.1, 1.4 Hz, 1H) , 8.43 (dd, J = 4.6, 1.4 Hz, 1H) , 9.94 (d, J =
8.6 Hz, 1H) , 12.52 (sa, 1H) ppm; 13C-RMN (75 MHz, CDCl3) : δ = 22.3, 24.1, 43.5, 47.2, 106.9, 115.2, 116.8, 119.7, 129.0, 130.0, 133.9, 146.7, 147.1, 148.5, 166.1 ppm; HRMS (ESI-TOF) m/z Calculado para C17H22N5O [M+H]+ : 312.1824. Encontrado: 312.1824.
Ejemplo 32 5 Síntesis de 3-benzil-5-[benzilamino- (1H-pirrolo[2, 3-b]piridin-2-il) -metilen]-3, 5dihidro-imidazol-4-ona (49)
Una mezcla constituida por 5-bromo-pirido[3’, 2’: 4, 5]pirrolo[1, 2-c]pirimidin7-carboxilato de metilo (306 mg, 1 mmol) , NH4Cl (26 mg, 0.49 mmol) y benzilamina (25 mL) , se calienta a reflujo durante 2.5 h. Transcurrido el tiempo de reacción se elimina la amina a presión reducida, se añade H2O y se extrae con AcOEt. Las fases orgánicas se lavan con salmuera y se secan sobre Na2SO4. Una vez eliminado a vacío el disolvente se obtiene el producto crudo que se purifica por cromatografia en gel de sílice usando como eluyente hexano / AcOEt (3:7) , obteniéndose 49 (170 mg, 42%) ; sólido amarillo; p.f.: 155-157 ºC; IR (NaCl) : υ = 3280, 3030, 2923, 1615, 1595, 1538
cm-1; 1H-RMN (500 MHz, CDCl3) : δ = 4.86 (s, 2H) , 4.99 (d, J = 5.9 Hz, 2H) , 7.05 (s, 1H) , 7.08 (dd, J = 7.9, 4.8 Hz, 1H) , 7.21 (s, 1H) , 7.28 (m, 3H) , 7.33 (m, 3H) , 7.41 (m, 4H) , 7.94 (dd, J = 7.9, 1.4 Hz, 1H) , 8.42 (dd, J = 4.8, 1.4 Hz, 1H) , 10.20 (sa, 1H) , 12.49 (sa, 1H) ppm;13C-RMN (75 MHz, CDCl3) : δ = 44.7, 50.2, 107.9, 115.0, 116.9, 119.6, 127.0, 127.7, 127.9, 128.0, 128.8, 128.9, 129.1, 130.3, 136.4, 136.8, 137.1, 146.9,
148.0, 148.6, 166.6 ppm; HRMS (APCI-TOF) m/z Calculado para C25H22N5O [M+H]+ : 408.1824. Encontrado: 408.1814.
H N
O N
N H N
N
Ejemplo 33
Síntesis de 3-ciclohexil-5-[ciclohexilamino- (1H-pirrolo[2, 3-b]piridin-2-il) -metilen]3, 5-dihidro-imidazol-4-ona (50)
Una mezcla constituida por 5-bromo-pirido[3’, 2’: 4, 5]pirrolo[1, 2-c]pirimidin
7-carboxilato de metilo (306 mg, 1 mmol) , NH4Cl (26 mg, 0.49 mmol) y ciclohexilamina (27 mL) , se calienta a reflujo durante 2.5 horas. Transcurrido el tiempo de reacción se elimina la amina a presión reducida, se añade H2O y se extrae con AcOEt. Las fases orgánicas se lavan con salmuera y se secan sobre Na2SO4. Una vez eliminado a vacío el disolvente se obtiene el producto crudo que se purifica por
cromatografia en gel de sílice usando como eluyente hexano / AcOEt (1:1) , obteniéndose 50 (262 mg, 67%) ; sólido amarillo; p.f.: 170-171 ºC; IR (NaCl) : υ = 3247, 2930, 2854, 1622, 1467, 1280 cm-1 ;1H-RMN (300 MHz, CDCl3) : δ = 1.23 (m, 2H) ,
1.55 (m, 12H) , 1.86 (m, 4H) , 2.02 (m, 2H) , 3.99 (m, 1H) , 4.12 (m, 1H) , 7.01 (s, 1H) ,
7.10 (dd, J = 7.9, 4.6 Hz, 1H) , 7.27 (s, 1H) , 7.99 (dd, J = 7.9, 1.3 Hz, 1H) , 8.43 (dd, J =
4.6, 1.3 Hz, 1H) , 10.10 (d, J = 8.2 Hz, 1H) , 12.52 (sa, 1H) ppm;13C-RMN (75 MHz, CDCl3) : δ = 24.2, 25.3, 25.4, 25.6, 33.0, 33.9, 50.8, 53.6, 106.7, 115.1, 116.8, 119.6, 129.1, 129.9, 134.2, 146.7, 147.1, 148.5, 166.0 ppm; HRMS (ESI-TOF) m/z Calculado para C23H30N5O [M+H]+ : 392.2450. Encontrado: 392.2454.
Ejemplo 34 Síntesis de 5-[ (4-cloro-1H-pirrolo[2, 3-b]piridin-2-il) - (2-metoxi-etilamino) -metilen]3- (2-metoxi-etil) -3, 5-dihidro-imidazol-4-ona (51) Una mezcla constituida por 5-bromo-4-cloro-pirido[3’, 2’: 4, 5]pirrolo[1, 2
c]pirimidin-7-carboxilato de metilo (340 mg, 1 mmol) , NH4Cl (26 mg, 0.49 mmol) y 2metoxietilamina (20 mL) , se calienta a reflujo durante 2.5 h. Transcurrido el tiempo de reacción se elimina la amina a presión reducida, se añade H2O y se extrae con AcOEt. Las fases orgánicas se lavan con salmuera y se secan sobre Na2SO4. Una vez eliminado a vacío el disolvente se obtiene el producto crudo que se purifica por cromatografia en gel de sílice usando como eluyente AcOEt / EtOH (9:1) , obteniéndose 51 (117 mg, 41%) ; sólido anaranjado; p.f.: 83-85 ºC; IR (NaCl) : υ = 2926, 1635, 1470, 1277, 1119 cm-1; 1H-RMN (300 MHz, Acetona-d6) : δ = 3.32 (s, 3H) , 3.42 (s, 3H) , 3.60 (t, J = 5.3 5 Hz, 2H) , 3.73 (t, J = 5.0 Hz, 2H) , 3.86 (t, J = 5.3 Hz, 2H) , 4.00 (q, J = 5.0 Hz, 2H) , 7.25 (d, J = 5.1 Hz, 1H) , 7.30 (s, 1H) , 7.50 (s, 1H) , 8.22 (d, J = 5.1 Hz, 1H) , 9.95 (sa, 1H) ,
12.70 (sa, 1H) ppm; 13C-RMN (75 MHz, Acetona-d6) : δ = 41.3, 46.6, 58.7, 58.9, 71.2, 71.9, 105.8, 115.9, 117.4, 119.6, 130.9, 137.0, 139.9, 140.9, 147.5, 149.9, 167.4 ppm; HRMS (ESI-TOF) m/z Calculado para C17H21ClN5O3 [M+H]+ : 378.1327. Encontrado:
378.1317.
Cl
H N
CH3N ON
H
O
N
N
O
H3C
Ejemplo 35
Síntesis de 3- (2-metoxi-etil) -5-[ (2-metoxi-etilamino) - (4-metoxi-1H-pirrolo[2, 3b]piridin-2-il) -metilen]-3, 5-dihidro-imidazol-4-ona (52)
Una mezcla constituida por 5-bromo-4-metoxi-pirido[3’, 2’: 4, 5]pirrolo[1, 2c]pirimidin-7-carboxilato de metilo (336 mg, 1 mmol) , NH4Cl (26 mg, 0.49 mmol) y 2metoxietilamina (20 mL) , se calienta a reflujo durante 2 h. Transcurrido el tiempo de reacción se elimina la amina a presión reducida, se añade H2O y se extrae con AcOEt. Las fases orgánicas se lavan con salmuera y se secan sobre Na2SO4. Una vez eliminado a vacío el disolvente se obtiene el producto crudo que se purifica por cromatografia en gel de sílice usando como eluyente AcOEt / EtOH (9:1) , obteniéndose 52 (117 mg, 41%) ; sólido anaranjado; p.f.: 117-119 ºC; IR (NaCl) : υ = 3538, 3407, 2963, 1625, 1514, 1261 cm-1; 1H-RMN (300 MHz, Acetona-d6) : δ = 3.32 (s, 3H) , 3.42 (s, 3H) , 3.60 (t, J = 5.1 Hz, 2H) , 3.75 (t, J = 5.1 Hz, 2H) , 3.85 (t, J = 5.3 Hz, 2H) , 4.00 (q, J = 5.3 Hz,
2H) , 4.04 (s, 3H) , 6.70 (d, J = 5.6 Hz, 1H) , 7.27 (s, 1H) , 7.47 (s, 1H) , 8.27 (d, J = 5.6 Hz, 1H) , 10.08 (sa, 1H) , 12.60 (sa, 1H) ppm; 13C-RMN (75 MHz, Acetona-d6) : δ = 41.3, 46.7, 56.1, 58.7, 58.9, 71.2, 71.8, 99.0. 106.0, 111.3, 115.0, 127.9, 138.9, 148.0, 149.6, 151.3, 161.5, 167.1 ppm; HRMS (APCI-TOF) m/z Calculado para C18H24N5O4 [M+H]+ : 374.1823. Encontrado: 378.1814.
Ejemplo 36
Síntesis de 5-[ (3-bromo-1H-pirrolo[2, 3-b]piridin-2-il) - (2-metoxi-etilamino) metilen]-3- (2-metoxi-etil) -3, 5-dihydro-imidazol-4-ona (53)
A una disolución de 47 (343 mg, 1 mmol) en CH2Cl2 (14 mL) se le añade Nbromosuccinimida (NBS, 356 mg, 2 mmol) , la mezcla se agita a temperatura ambiente durante 24 h. Una vez terminada la reacción se elimina el disolvente a vacío y el producto crudo se purifica por cromatografía en gel de sílice utilizando como eluyente AcOEt:EtOH (9:1) , obteniéndose 53 (169 mg, 40%) ; aceite anaranjado; IR (KBr) : υ = 3382, 2922, 1746, 1412, 1117 cm-1; 1H-RMN (300 MHz, CDCl3) : δ = 3.34 (s, 3H) , 3.40 (s, 3H) , 3.54 (m, 4H) , 3.58 (t, J=5.1 Hz, 2H) , 3.83 (t, J=4.9 Hz, 2H) , 7.13 (dd, J=7.8,
4.3 Hz, 1H) , 7.28 (s, 1H) , 7.91 (d, J= 7.8 Hz, 1H) , 8.26 (d, J=4.3 Hz, 1H) , 9.35 (sa, 1H) ,
11.43 (sa, 1H) ppm; 13C-RMN (75 MHz, Acetona-d6) : δ = 41.0, 45.4, 58.9, 59.3, 70.8, 71.8, 93.6, 116.2, 117.2, 120.5, 125.7, 128.7, 140.4, 145.9, 147.4, 148.3, 166.8 ppm; HRMS (APCI-TOF) m/z Calculado para C17H2179BrN5O3 [M+H]+ : 422.0828. Encontrado: 422.0818.
Br
H N
CH3N ON
H
O
N N
O H3C
Ejemplo 37
Síntesis de 5-benzo[b]tiofen-2-il-metilen-2-metil-3, 5-dihidro-imidazol-4-ona (54) y (4-benzo[b]tiofen-2-il-metilen-2-metil-5-oxo-4, 5-dihidro-imidazol-1-il) -acetato de etilo (55)
A una disolución de benzo[b]tiofeno-2-carboxaldehído (162 mg, 1 mmol) en dioxano (1.5 mL) , se le añaden sucesivamente NaHCO3 (420 mg, 5 mmol) , clorhidrato de acetamidina (146 mg, 1.54 mmol) y bromoacetato de etilo (0.27 mL, 2.4 mmol) . La mezcla se calienta a 108 ºC durante 2.5 h. El sólido formado se filtra y se lava con AcOEt. Los líquidos de filtrado se concentran a sequedad y el residuo obtenido se purifica por cromatografía en gel de sílice utilizando como eluyente hexano / AcOEt (1:1) , obteniéndose 54 (121 mg, 50%) y 55 (95 mg, 29 %) . 5-Benzo[b]tiofen-2-ilmetilen-2-metil-3, 5-dihidro-imidazol-4-ona 54: Sólido anaranjado; p.f.: 224-225 ºC (descomp) ; IR (NaCl) : υ =3415, 2916, 2304, 1707, 1646 cm-1; 1H-RMN (300 MHz, Acetona-d6) : δ = 2.33 (s, 3H) , 7.24 (s, 1H) , 7.39 (m, 2H) , 7.91 (m, 3H) , 10.25 (sa, 1H)
ppm;13C-RMN (75 MHz, DMSO-d6) : δ = 15.7, 117.5, 122.1, 123.9, 124.3, 125.5, 130.4, 137.6, 137.9, 139.2, 142.7, 162.8, 170.3. ppm; HRMS (ESI-TOF) m/z Calculado para C13H11N2OS [M+H]+: 243.0592. Encontrado: 243.0590.
(4-Benzo[b]tiofen-2-il-metilen-2-metil-5-oxo-4, 5-dihidro-imidazol-1-il) -acetato de etilo 55: Sólido ocre; p.f.:132-133 ºC; IR (NaCl) : υ =2982, 1713, 1643, 1412, 1210 cm-1; 1H-RMN (300 MHz, Acetona-d6) : δ = 1.26 (t, J=7.0 Hz, 3H) , 2.40 (s, 3H) , 4.22 (q, J=7.0 Hz, 2H) , 4.50 (s, 2H) , 7.40 (m, 3H) , 7.92 (m, 3H) ppm; 13C-RMN (75 MHz, Acetonad6) : δ = 15.4, 29.2, 41.9, 62.2, 120.5, 123.1, 125.3, 125.4, 126.8, 132.0, 139.0, 139.1, 139.6, 144.8, 163.2, 168.7, 169.4 ppm; HRMS (ESI-TOF) m/z Calculado para
C17H17N2O3S [M+H]+: 329.0960. Encontrado: 329.0964.
Ejemplo 38
Síntesis de 5- (3-bromo-benzo[b]tiofen-2-il-metilen) -2-metil-3, 5-dihidro-imidazol-4ºna (56) A una disolución de 54 (242 mg, 1 mmol) en una mezcla de DMF (7 mL) y
CH2Cl2 (14 mL) se le añade N-bromosuccinimida (NBS, 196 mg, 1.1 mmol) . La mezcla se agita a temperatura ambiente durante 8 h. Una vez terminada la reacción, el precipitado formado se filtra y lava sucesivamente con CH2Cl2 y H2O, obteniéndose 56 como un sólido anaranjado (209 mg, 65%) ; p.f.: 250 ºC (descomp) ; IR (KBr) : υ = 3448, 3151, 1708, 1636, 1407 cm-1; 1H-RMN (300 MHz, DMSO-d6) : δ = 2.28 (s, 3H) , 7.18
(s, 1H) , 7.53 (m, 2H) , 7.81 (m, 1H) , 8.07 (dd, J=6.4, 4.7 Hz, 1H) , 11.56 (sa, 1H) ppm; 13C-RMN (75 MHz, DMSO-d6) : δ = 15.8, 113.5, 122.5, 122.6, 122.7, 125.3, 126.8, 132.4, 136.1, 140.3, 140.8, 164.6, 170.0 ppm; HRMS (ESI-TOF) m/z Calculado para C13H1079BrN2OS [M+H]+: 320.9697. Encontrado: 320.9704.
CH3
Ejemplo 39
Síntesis de 5- (3-bromo-benzo[b]tiofen-2-il-metilen) -3- (2-metoxi-etil) -2-metil-3, 5dihydro-imidazol-4-ona (57) Una mezcla constituida por 56 (321 mg, 1 mmol) , NH4Cl (26 mg, 0.49 mmol) y
2-metoxietilamina (20 mL) , se calienta a reflujo durante 3 h. Transcurrido el tiempo de reacción se concentra a vacío y el producto crudo se purifica por cromatografia en gel de sílice usando como eluyente AcOEt, obteniéndose 57 como un sólido anaranjado (53 mg, 14%) ; p.f.: 168-170 ºC; IR (NaCl) : υ =3407, 2919, 1711, 1635, 1404 cm-1; 1H-RMN (300 MHz, CDCl3) : δ = 2.42 (s, 3H) , 3.27 (s, 3H) , 3.50 (t, J=5.0 Hz, 2H) , 3.75 (t,
J=5.0 Hz, 2H) , 7.38 (m, 2H) , 7.58 (s, 1H) , 7.79 (m, 2H) ppm; 13C-RMN (50 MHz, CDCl3) : δ = 16.1, 41.1, 58.9, 70.4, 116.0, 118.3, 122.4, 124.0, 125.3, 127.1, 132.9, 137.4, 139.3, 141.6, 163.9, 169.5 ppm; HRMS (ESI-TOF) m/z Calculado para C16H1679Br N2O2S [M+H]+: 279.0116. Encontrado: 279.0125.
Ejemplo 40
Ensayo de la actividad enzimática: Inhibición de calpaina Para evaluar la actividad de los distintos inhibidores, se realizó un ensayo de lisis de un sustrato fluorescente conteniendo dos puentes disulfuro, Suc-Leu-Tyr-AMC (Calpain Substrate II, fluorogenic, Calbiochem, Ref: 208731, Darmstad, Alemania) , de forma que la actividad enzimática es proporcional a la señal fluorescente. Brevemente, el ensayo se realiza de la siguiente manera:
! Obtención de un extracto proteico a partir de células de músculo liso vascular de rata en cultivo. Siempre se trabajó con el extracto recién obtenido, en condiciones adecuadas para mantener la actividad enzimática.
! Incubación de 100 μg de proteínas, con 80 μM de Suc-Leu-Tyr-AMC y 50 μM de los distintos inhibidores de calpaina. En todos los casos se utilizó un control 15 con un inhibidor comercial de la enzima (50 μM de calpeptin, Calbiochem, Ref:
) . ! Lectura de la fluorescencia (Excitación: 380 nm. Emisión: 460 nm) .
Los resultados se muestran en las Tablas 1 y 2 y las Figuras 1 y 2. Las figuras 20 recogen el porcentaje de inhibición de la actividad, que se expresa en comparación con el de la calpeptina, considerando ésta como el 100 %.
Tabla 1 y Figura 1. Resultados representativos de inhibición de compuestos objeto de esta invención: Compuestos 12-32
Compuesto % Inhibición 12 17 13 69, 2 14 67, 7 16 82, 4 17 89, 4 18 86, 8 19 25, 1 21 90, 2 22 26 23 122 24 96, 2 25 24, 9 26 43, 7 27 92, 6 28 77, 4 29 90, 4 30 44, 9 31 61 32 94, 5
Tabla 2 y Figura 2. Resultados representativos de inhibición de compuestos objeto de esta invención: Compuestos 34-57
Compuesto % Inhibición 34 43, 3 36 80, 4 37 93 38 93, 3 39 15, 3 40 36, 8 41 21, 5 42 73, 7 43 14 44 57, 8 45 28, 2 47 99, 4 48 37, 2 49 11, 7 51 45, 8 52 54, 2 53 87, 7 54 34, 8 55 27, 6 56 14, 4 57 13
140 120 100 80 60 40 20
% inhibición 12 1314 1617 1819 2122 232425 2627 2829 3031 32
BIBLIOGRAFÍA
Pietsch, M.; Chua, K. C. H.; Abell, A. D. “Calpains: attractive targets for the development of synthetic inhibitors, ” Curr. Top. Med. Chem. 2010, 10, 270-293.
Lubisch, W.; Moller, A. “Discover y of phenyl alanine derived ketoamides carr y ing benzoyl residues as novel calpain inhibitors, ” Bioorg. Med. Chem. Lett. 2002, 12, 13351338.
Covington, M. D.; Arrington, D. D.; Schnellmann, R. G. “Calpain 10 is required for cell viability and is decreased in the aging kidney, ” Am J Physiol Renal Physiol. 2009, 296, F478-486. 2009.
Shi, Y.; Melnikov, V. Y.; Schrier, R. W.; Edelstein, C. L. “Downregulation of the calpain inhibitor protein calpastatin by caspases during renal ischemia-reperfusion, ” Am. J. Physiol. Renal Physiol. 2000, 279, F509-517.
Dnyanmote, A. V.; Sawant, S. P.; Lock, E. A.; Latendresse, J. R.; Warbritton, A. A.; Mehendale, H. M. “Calpastatin overexpression prevents progression of S-1, 2dichlorovinyl-L-cysteine (DCVC) -initiated acute renal injur y and renal failure (ARF) in diabetes, ” Toxicol. Appl. Pharmacol. 2006, 215, 146-157.
Peltier, J.; Bellocq, A.; Perez, J.; Doublier, S.; Dubois, Y. C. X.; Haymann, J. P.; Camussi, G.; Baud, L. “Calpain activation and secretion promote glomerular injur y in experimental glomerulonephritis: evidence from calpastatin-transgenic mice, ” J. Am. Soc. Nephrol. 2006, 17, 3415-3423.
Chatterjee, P. K.; Todorovic, Z.; Sivarajah, A.; Mota-Filipe, H.; Brown, P. A. J.; Stewart, K. N.; Mazzon, E.; Cuzzocrea, S.; Thiemermann, C. “Inhibitors of calpain activation (PD150606 and E-64) and renal ischemia-reperfusion injur y , ” Biochem. Pharmacol. 2005, 69, 1121-1131.
Kamal, F.; Yanakieva-Georgieva, N.; Piao, H.; Morioka, T.; Oite, T. “Local Deliver y of Angiotensin II Receptor Blockers into the Kidney Passively Attenuates Inflammator y Reactions during the Early Phases of Streptozotocin-Induced Diabetic Nephropathy through Inhibition of Calpain Activity, ” Nephron. Exp. Nephrol. 2010, 115, e69-79.
Kling, A.; Mack, H.; Jantos, K.; Moeller, A.; Hornberger, W.; Hutchins, C. W. “Preparation of carboxamide compounds as calpain inhibitors” PCT Int. Appl. 2010, WO 2010094755 A1 20100826.
Carragher, N. O. “Calpain inhibition: a therapeutic strategy targeting multiple disease states” Curr. Pharm. Design 2006, 12, 615-638.
Montero, A.; Alonso, M.; Benito, E.; Chana, A.; Mann, E.; Navas, J. M.; Herradon,
B. “Studies on aromatic compounds: inhibition of calpain I by biphenyl derivatives and peptide-biphenyl hybrids, ” Bioorg. Med. Chem. Lett. 2004, 14, 2753-2757.
Posner, A., Raser, K. J., Hajimohammadreza, I., Yuen, P. W., Wang K. K. “Aurintricarboxylic acid is an inhibitor of mu-and m-calpain, ” Biochem. Mol. Biol. Int. 1995, 36, 291-299.
Wang, K. K.; Nath, R.; Posner, A.; Raser, K.J.; Buroker-Kilgore, M.; Hajimohammadreza, I.; et al. “An alpha-mercaptoacr y lic acid derivative is a selective nonpeptide cell-permeable calpain inhibitor and is neuroprotective, ” Proc Natl Acad Sci USA 1996, 93, 6687-6692.
Liu, X.; Rainey, J. J.; Harriman, J. F.; Schnellmann, R. G. “Calpains mediate acute renal cell death: role of autolysis and translocation, ” Am. J. Physiol. Renal Physiol. 2001, 281, F728-F738.
Lubisch, W.; Moller, A.; Treiber, H. J. “Preparation and use of ketobenzamides as calpain inhibitors, ” PCT Int. Appl. 1998, WO 9825883 A1 19980618. 16 Lubisch, W.; Moeller, A.; Treiber, H. J.; Knopp, M. “Preparation of phthalic acid monoamides as calpain and cathepsin inhibitors, ” Ger. Offen. 1999, DE 19818614 A1 19991021.
Lubisch, W.; Moeller, A.; Treiber, H. J. “Preparation of N (imidobenzoyl) phenylalaninals and analogs as cysteine protease inhibitors, ” Ger. Offen. 1998, DE 19650975 A1 19980610.
Lubisch, W.; Moller, A.; Treiber, H. J.; Knopp, M. “Preparation of tetrahydroisoquinolinylnicotinic acid amides and related compounds as inhibitors of cysteine proteases, ” PCT Int. Appl. 1999, WO 9961423 A1 19991202.
Lubisch, W.; Moller, A.; Treiber, H. J.; Knopp, M. “Preparation of N (acylalkyl) benzamides as cysteine protease inhibitors, ” PCT Int. Appl. 1999, WO 9954320 A1 19991028.
Lubisch, W.; Moller, A.; Treiber, H. J.; Knopp, M. “Preparation of cysteine protease inhibitors for therapeutic use, ” PCT Int. Appl. 1999, WO 9954310 A2 19991028.
Lubisch, W.; Moller, A.; Treiber, H. J.; Knopp, M. “New substituted heterocyclic amides, their preparation and application, ” Ger. Offen. 1999, DE 19817459 A1 19991021.
Lubisch, W.; Moller, A.; Treiber, H. J.; Knopp, M. “Preparation of piperazinylnicotinamides and related compounds as calpain and cathepsin inhibitors, ” PCT Int. Appl. 1999, WO 9954305 A1 19991028.
Lee, K. S.; Seo, Seon H.; Lee, Y. H.; Kim, H. D.; Son, M. H.; Chung, B. Y.; Lee, J. Y.; Jin, C.; Lee, Y. S. “Synthesis and biological evaluation of chromone carboxamides as calpain inhibitors, ” Bioorg. Med. Chem. Lett. 2005, 15, 2857-2860.
Nam, D. H.; Lee, K. S.; Kim, S. H.; Kim, S. M.; Jung, S. Y.; Chung, S. H.; Kim, H. J.; Kim, N. D.; Jin, C.; Lee, Y. S. Bioorg. Med. Chem. Lett. 2008, 18, 205-209.
Lee, K. Y.; Seob L., Kwang; J., Changbae; L., Yong S. “Design and synthesis of calpain inhibitor y 6-pyridone 2-carboxamide derivatives, ” Eur. J. Med. Chem. 2009, 44, 1331-1334.
Wang., K. K. W.; Yuen, P. w. “Development and therapeutic potential of calpain inhibitors” Adv. Pharmacol. 1997, 37, 117-152.
Kling, A.; Hornberger, W.; Mack, H.; Moeller, A.; Nimmrich, V.; Seemann, D.; Lubisch, W. “Heterocyclic carboxamide derivatives as calpain inhibitors and their preparation, pharmaceutical compositions and use in the treatment of diseases, ” PCT Int. Appl. 2008, WO 2008080969 A1 20080710.
Hornberger, W.; Mack, H.; Kling, A.; Moeller, A.; Vogg, B.; Delzer, J.; Backfisch, G.; Beyerbach, A. “Heterocyclic carboxamide derivatives as calpain inhibitors and their preparation, pharmaceutical compositions and use in the treatment of diseases, ” PCT Int. Appl. 2009, WO 2009083581 A1 20090709.
Kling, A.; Mack, H.; Jantos, K.; Moeller, A.; Hornberger, W.; Hutchins, C. W. “Preparation of carboxamide compounds as calpain inhibitors, ” PCT Int. Appl. 2010, WO 2010094755 A1 20100826.
Mack, H.; Kling, A.; Jantos, K.; Moeller, A.; Hornberger, W.; Hutchins, C. W. “Preparation of heteroar y lcarboxamide derivatives for use as calpain inhibitors, ” PCT Int. Appl. 2010, WO 2010128102 A1 20101111.
Baeza, A.; Mendiola, J.; Burgos, C.; Alvarez-Builla, J.; Vaquero, J. J. “Application of Selective Palladium-Mediated Functionalization of the Pyrido[3', 2':4, 5]pyrrolo[1, 2c]pyrimidine Heterocyclic System for the Total Synthesis of Variolin B and Deoxyvariolin B, ” Eur. J. Org. Chem. 2010, 5607-5618. 32 a) Perr y , N. B.; Ettouati, L.; Litaudon, M.; Blunt, J. M.; Munro, M. H. G.; Parkin, S.; Hope, H. Tetrahedron 1994, 50, 3987–3992; b) Trimurtulu, G.; Faulkner, D. J.; Perr y ,
N. B.; Ettouati, L.; Litaudon, M.; Blunt, J. W.; Munro, M. H. G.; Jameson, G. B. “Alkaloids from the antarctic sponge Kirkpatrickia varialosa. Part 2: Variolin A and N (3') -methyl tetrahydrovariolin B, ” Tetrahedron 1994, 50, 3993-4000.
Herradon Garcia, B.; Chicharro Martin, R.; Aran Redo, V. J.; Alonso Giner, M. “Preparation of isoquinoline derivatives, particularly esters and amides of [2, 3-dihydro1-oxo-3- (sec-butyl) -1H-isoquinolin-4-ylidene]acetic acid and its thioxo analog, as calpain inhibitors, ” PCT Int. Appl. 2006, WO 2006064075 A1 20060622.
Khan, K. M.; Mughal, U. R.; Khan, M. T. H.; Zia-Ullah; Perveen, S.; Choudhar y , M.
I. “Oxazolones: New tyrosinase inhibitors; synthesis and their structure-activity relationships, ” Bioorg. Med. Chem. 2006, 14, 6027-6033.
Mendiola, J.; Minguez, J. M.; Alvarez-Builla, J.; Vaquero, J. J. “Reaction of 2bromomethylazoles and TosMIC: A domino process to azolopyrimidines. Synthesis of core tricycle of the variolins alkaloids, ” Org. Lett. 2000, 2, 3253-3256.
Barros, T. G.; Pinheiro, S.; Williamson, J. S.; Tanuri, A.; Gomes, M., Jr.; Pereira, H. S.; Brindeiro, R. M.; Neto, J. B. A.; Antunes, O. A. C.; Muri, E. M. F. “Pseudo-peptides derived from isomannide: inhibitors of serine proteases” Amino Acids 2010, 38, 701709, y referencias allí citadas.
Bailly, F.; Queffelec, C.; Mbemba, G.; Mouscadet, J. F.; Pommer y , N.; Pommer y , J.; Henichart, J. P.; Cotelle, P. “Synthesis and biological activities of a series of 4, 5-diar y l3-hydroxy-2 (5H) -furanones” Eur. J. Med. Chem. 2008, 43, 1222-1229.
Gong, X.; Yang, H.; Liu, H.; Jiang, Y.; Zhao, Y.; Fu, H. “Simple and Efficient Copper-Catalyzed Approach to 2, 4-Disubstituted Imidazolones, ” Org. Lett. 2010, 12, 3128-3131. 39 Granacher, Ch.; Mahler, M. “Glyoxalones and glyoxalldones as anhydride forms of amino acid derivatives, ” Helv. Chim. Acta 1927, 10, 246-62.
Stafforst, T.; Diederichsen, U. “Synthesis of alaninyl and N- (2-aminoethyl) glycinyl amino acid derivatives containing the green fluorescent protein chromophore in their side chains for incorporation into peptides and peptide nucleic acids, ”. Eur. J. Org. Chem. 2007, 899-911.
