- OR22' y OR23' respectivamente, donde R22' y R23' son independientemente hidrógeno; alquilo C1- C12 sustituido o no sustituido; un grupo COR''' (donde R''' es hidrógeno; hidroxilo; alquilo C1- C12 sustituido o no sustituido; arilo C6- C10 sustituido o no sustituido; o amino N (R') (R'') , donde R' y R'' son independientemente hidrógeno o un grupo alquilo C1- C12) ; un grupo [alquilo (C1- C12) -O-alquilo (C1- C12) -]n (donde n está comprendido entre 1 y 3) ; o trifluorometilo cuando R24 se encuentra en posición meta respecto a R20. o bien una sal, derivado, profármaco, solvato o estereoisómero farmacéuticamente aceptable del mismo.
En otro aspecto, la invención se dirige a una composición farmacéutica que comprende un compuesto de fórmula (I) , o un compuesto de fórmula (II) , o mezclas, o una sal, derivado, profármaco, solvato o estereoisómero farmacéuticamente aceptable de los mismos junto con un portador, adyuvante o vehículo farmacéuticamente aceptable, para la administración a un paciente.
En otro aspecto la invención se dirige a un compuesto de fórmula (I) , o de fórmula (II) , o mezclas, o una sal, derivado, profármaco, solvato o estereoisómero farmacéuticamente aceptable de los mismos para el tratamiento de cáncer, de enfermedades parasitarias, de enfermedades bacterianas o de enfermedades fúngicas.
En un aspecto adicional, la presente invención se relaciona con el uso de un compuesto de fórmula (I) , o de fórmula (II) , o mezclas, o una sal, derivado, profármaco, solvato o estereoisómero farmacéuticamente aceptable de los mismos, para la elaboración de un medicamento dirigido al tratamiento del cáncer.
En otro aspecto la invención hace referencia al uso de un compuesto de fórmula (I) o de fórmula (II) , o mezclas, o una sal, derivado, profármaco, solvato o estereoisómero farmacéuticamente aceptable de los mismos, para la elaboración de un medicamento dirigido al tratamiento de enfermedades parasitarias.
En otro aspecto la invención se relaciona con el uso de un compuesto de fórmula (I) , o de fórmula (II) , o mezclas, o una sal, derivado, profármaco, solvato o estereoisómero farmacéuticamente aceptable de los mismos, para la elaboración de un medicamento dirigido al tratamiento de enfermedades bacterianas.
En un último aspecto la invención se dirige al uso de un compuesto de fórmula (I) , o de fórmula (II) , o mezclas, o una sal, derivado, profármaco, solvato o estereoisómero farmacéuticamente aceptable del mismo, para la elaboración de un medicamento dirigido al tratamiento de enfermedades fúngicas.
Descripción detallada de la invención
Un objeto de la presente invención lo constituyen compuestos de fórmula general (I) :
donde:
R1, R2, R3, R4, R5, R6, R7, R8, R11 y R12 son independientemente hidrógeno; hidroxilo; halógeno; alquilo C1- C12 sustituido o no sustituido; arilo C6- C10 sustituido o no sustituido; un grupo amino N (R') (R'') , donde R' y R'' son independientemente hidrógeno o un grupo alquilo C1- C12; un grupo OCOR, donde R es (CH2) 2COOH o (CH2) 2 CO2CH2CH3; o cada pareja puede formar un grupo (C=O) junto con el carbono al que están unidos;
R9 y R10 son independientemente hidrógeno; alquilo C1- C12 sustituido o no sustituido; arilo C6- C10; un grupo COR''' (donde R''' es hidrógeno; hidroxilo; alquilo C1- C12 sustituido o no sustituido; arilo C6- C10 sustituido o no sustituido; O-alquilo C1- C12; amino N (R') (R'') , donde R' y R'' son independientemente hidrógeno o un grupo alquilo C1- C12) ; un grupo carbinol (CH2) n- OH (donde n es un número entero comprendido entre 1 y 10) , o juntos forman un grupo metileno;
el enlace \overline{\text{- - - - - -}} significa un doble enlace o un enlace simple;
y donde la estructura tricíclica
se selecciona entre las siguientes estructuras:
donde:
R13, R14, R15, R16, R21 y R22 son independientemente hidrógeno; hidroxilo; halógeno; alquilo C1- C12 sustituido o no sustituido; arilo C6- C10 sustituido o no sustituido; un grupo amino N (R') (R'') , donde R' y R'' son independientemente hidrógeno o un grupo alquilo C1- C12; o cada pareja puede formar un grupo (C=O) junto con el carbono al que están unidos;
R17 es hidrógeno o metilo;
R18 y R18' son independientemente hidrógeno; hidroxilo; halógeno; alquilo C1- C12; arilo C6- C10; COR''' (donde R''' es hidrógeno; hidroxilo; alquilo C1- C12; amino N (R') (R'') , donde R' y R'' son independientemente hidrógeno o un grupo alquilo C1- C12; o alcoxilo C1- C12) ; o trifluorometilo;
R19, R19', R20 y R20' son independientemente hidrógeno; alquilo C1- C12 sustituido o no sustituido; un grupo COR''' (donde R''' es hidrógeno; hidroxilo; alquilo C1- C12 sustituido o no sustituido; arilo C6- C10 sustituido o no sustituido; o amino N (R') (R'') , donde R' y R'' son independientemente hidrógeno o un grupo alquilo C1- C12) ; un grupo [alquilo (C1- C12) -O-alquilo (C1- C12) -]n (donde n está comprendido entre 1 y 3) ; trifluorometilo; o cada pareja 19-19' o 20-20' puede formar un grupo C=O junto con el carbono al que están unidos;
R23 y R24 son independientemente hidrógeno, hidroxilo o halógeno;
o bien una sal, derivado, profármaco, solvato o estereoisómero farmacéuticamente aceptable del mismo.
En un aspecto particular, la invención se dirige a compuestos de fórmula (Ia) :
donde
R1, R2, R3, R4, R5, R6, R7, R8, R11, R12, R13, R14, R15 y R16 son independientemente hidrógeno; hidroxilo; halógeno; alquilo C1- C12 sustituido o no sustituido; arilo C6- C10 sustituido o no sustituido; un grupo amino N (R') (R'') , donde R' y R'' son independientemente hidrógeno o un grupo alquilo C1- C12; un grupo OCOR, donde R es (CH2) 2COOH o (CH2) 2CO2CH2CH3; o cada pareja puede formar un grupo (C=O) junto con el carbono al que están unidos;
R9 y R10 son independientemente hidrógeno; alquilo C1- C12 sustituido o no sustituido; arilo C6- C10; un grupo COR''' (donde R''' es hidrógeno; hidroxilo; alquilo C1- C12 sustituido o no sustituido; arilo C6- C10 sustituido o no sustituido; O-alquilo C1- C12; o amino N (R') (R'') , donde R' y R'' son independientemente hidrógeno o un grupo alquilo C1- C12) ; un grupo carbinol (CH2) n- OH (donde n es un número entero comprendido entre 1 y 10) ; o juntos forman un grupo metileno,
R17 es hidrógeno o metilo;
R18 es hidrógeno; hidroxilo; halógeno; alquilo C1- C12; arilo C6- C10; COR''' (donde R''' es hidrógeno; hidroxilo; alquilo C1- C12; amino N (R') (R'') , donde R' y R'' son independientemente hidrógeno o un grupo alquilo C1- C12; o alcoxilo C1- C12) ; o trifluorometilo;
R19 es hidrógeno; alquilo C1- C12 sustituido o no sustituido; un grupo COR''' (donde R''' es hidrógeno; hidroxilo; alquilo C1- C12 sustituido o no sustituido; arilo C6- C10 sustituido o no sustituido; o amino N (R') (R'') , donde R' y R'' son independientemente hidrógeno o un grupo alquilo C1- C12) ; un grupo [alquilo (C1- C12) -O-alquilo (C1- C12) -]n (donde n está comprendido entre 1 y 3) ; o trifluorometilo; y
el enlace \overline{\text{- - - - - -}} significa un doble enlace o un enlace simple,
con la condición que, cuando R19 es H, entonces R11 es un halógeno o bien R10 no es hidrógeno, COOH o CO2CH3.
En una realización preferente, los compuestos de fórmula (Ia) comprenden una sub-estructura que presenta la siguiente fórmula (Ia') :
donde
R5 es hidroxilo o un grupo OCOR donde R es (CH2) 2OOOH o (CH2) 2CO2CH2CH3;
R7 y R8 son independientemente hidrógeno; hidroxilo; halógeno; alquilo C1- C12 sustituido o no sustituido; arilo C6- C10 sustituido o no sustituido; un grupo amino N (R') (R'') , donde R' y R'' son independientemente hidrógeno o un grupo alquilo C1- C12; o cada pareja puede formar un grupo (C=O) junto con el carbono al que están unidos;
R12 es independientemente hidrógeno o un halógeno; y
R19 es hidrógeno; alquilo C1- C12 sustituido o no sustituido; un grupo COR''' (donde R''' es hidrógeno; hidroxilo; alquilo C1- C12 sustituido o no sustituido; arilo C6- C10 sustituido o no sustituido; o amino N (R') (R'') , donde R' y R'' son independientemente hidrógeno o un grupo alquilo C1- C12) ; un grupo [alquilo (C1- C12) -O-alquilo (C1- C12) -]n, (donde n está comprendido entre 1 y 3) o trifluorometilo; y
el enlace \overline{\text{- - - - - -}} significa un doble enlace o un enlace simple,
con la condición que, cuando R19 es H, entonces R12 es un halógeno o R7 es un hidroxilo.
Ejemplos particulares de esta subestructura (Ia') son:
- éster del ácido 9-hidroxi-4, 6b, 8a, 11, 12b, 14a-hexametil-2, 10-dioxo-2, 6b, 7, 8, 8a, 9, 10, 11, 12, 12a, 12b, 13, 14, 14a-tetradecahidro-picen-3-il propiónico (C1) ;
- éster del ácido 4-bromo- (9-hidroxi-6b, 8a, 11, 12b, 14a-hexametil-2, 10-dioxo-2, 6b, 7, 8, 8a, 9, 10, 11, 12, 12a, 12b, 13, 14, 14a-tetradecahidro-picen-3-il) benzóico (C2) ;
- 12-bromo-3, 9-dihidroxi-4, 6b, 8a, 11, 12b, 14a-hexametil-7, 8, 8a, 11, 12, 12a, 12b, 13, 14, 14a-decahidro-6bH, 9H- pi- cen-2, 10-diona (C3) ;
- éster del ácido 12-bromo-9-hidroxi-6b, 8a, 11, 12b, 14a-hexametil-2, 10-dioxo-2, 6b, 7, 8, 8a, 9, 10, 11, 12, 12a, 12b, 13, 14, 14a-tetradecahidro-picen-3-il dimetil-carbámico (C4) ;
- éster del ácido 4-bromo- (12-bromo-9-hidroxi-6b, 8a, 11, 12b, 14a-hexametil-2, 10-dioxo-2, 6b, 7, 8, 8a, 9, 10, 11, 12, 12a, 12b, 13, 14, 14a-tetradecahidro-picen-3-il) benzóico (C5) ;
- 3, 9, 10-trihidroxi-6b, 8a, 11, 12b, 14a-hexametil-7, 8, 8a, 9, 10, 11, 12, 12a, 12b, 13, 14, 14a-dodecahidro-6bH- picen-2- ona (C6) .
En otra realización preferente, los compuestos de fórmula (Ia) comprenden una sub-estructura que presenta la siguiente fórmula (Ia'') :
donde:
R7 y R8 son independientemente hidrógeno; hidroxilo; halógeno; alquilo C1- C12 sustituido o no sustituido; arilo C6- C10 sustituido o no sustituido; un grupo amino N (R') (R'') , donde R' y R'' son independientemente hidrógeno o un grupo alquilo C1- C12; o cada pareja puede formar un grupo (C=O) junto con el carbono al que están unidos;
R15 es hidrógeno o halógeno;
R19 es hidrógeno; alquilo C1- C12 sustituido o no sustituido; un grupo COR''' (donde R''' es hidrógeno; hidroxilo; alquilo C1- C12 sustituido o no sustituido; arilo C6- C10 sustituido o no sustituido; o amino N (R') (R'') , donde R' y R'' son independientemente hidrógeno o un grupo alquilo C1- C12) ; un grupo [alquilo (C1- C12) -O-alquilo (C1- C12) -]n (donde n está comprendido entre 1 y 3) o trifluorometilo; y
el enlace \overline{\text{- - - - - -}} significa un doble enlace o un enlace simple,
con la condición que, cuando R19 es H, entonces R15 es un halógeno o R7 es un hidroxilo.
Ejemplos particulares de esta subestructura (Ia'') son:
- 14-bromo-3-hidroxi-4, 6b, 8a, 11, 12b, 14a-hexametil-7, 8, 8a, 11, 12, 12a, 12b, 13, 14, 14a-decahidro-6bH, 9H- picen-2, 10-diona (C7) ;
- éster del ácido 4, 6b, 8a, 11, 12b, 14a-hexametil-2, 10-dioxo-2, 6b, 7, 8, 8a, 9, 10, 11, 12, 12a, 12b, 13, 14, 14a-tetradecahidro-picen-3-il acético (C8) ;
- éster del ácido 4, 6b, 8a, 11, 12b, 14a-hexametil-2, 10-dioxo-2, 6b, 7, 8, 8a, 9, 10, 11, 12, 12a, 12b, 13, 14, 14a-tetradecahidro-picen-3-il nicotínico (C9) ;
- 3, 10-dihidroxi-4, 6b, 8a, 11, 12b, 14a-hexametil-7, 8, 8a, 9, 10, 11, 12, 12a, 12b, 13, 14, 14a-dodecahidro-6bH-picen-2- ona (C10) ;
- 3-hidroxi-4, 6b, 8a, 11, 12b, 14a-hexametil-7, 8, 8a, 12a, 12b, 13, 14, 14a-octahidro- 6bH, 9H- picen-2, 10-diona (C11) .
En otra realización preferente, los compuestos de fórmula (Ia) comprenden una sub-estructura que presenta la siguiente fórmula (Ia''') :
donde:
R7 es hidrógeno; hidroxilo; halógeno; alquilo C1- C12 sustituido o no sustituido; arilo C6- C10 sustituido o no sustituido; un grupo amino N (R') (R'') , donde R' y R'' son independientemente hidrógeno o un grupo alquilo C1- C12; y
R19 es hidrógeno; alquilo C1- C12 sustituido o no sustituido; un grupo COR''' (donde R''' es hidrógeno; hidroxilo; alquilo C1- C12 sustituido o no sustituido; arilo C6- C10 sustituido o no sustituido; o amino N (R') (R'') , donde R' y R'' son independientemente hidrógeno o un grupo alquilo C1- C12) ; un grupo [alquilo (C1- C12) -O-alquilo (C1- C12) -]n, (donde n está comprendido entre 1 y 3) o trifluorometilo;
con la condición que cuando R19 es hidrógeno R9 no es CH3.
Ejemplos particulares de esta subestructura (Ia''') son:
- metil éster del ácido 3, 10-dihidroxi-2, 4a, 6a, 9, 12b, 14a-hexametil-11-oxo-1, 2, 3, 4, 4a, 5, 6, 6a, 11, 12b, 13, 14, 14a, 14b-tetradecahidro-picen-2-carboxílico (C12) ;
- metil éster del ácido 2, 4a, 6a, 9, 12b, 14a-hexametil-11-oxo-10-propioniloxi- 1, 2, 3, 4, 4a, 5, 6, 6a, 11, 12b, 13, 14, 14a, 14b-tetradecahidro-picen-2-carboxílico (C13) ;
- metil éster del ácido 10-dimetilcarbamoiloxi-2, 4a, 6a, 9, 12b, 14a-hexametil-11-oxo-1, 2, 3, 4, 4a, 5, 6, 6a, 11, 12b, 13, 14, 14a, 14b-tetradecahidro-picen-2-carboxílico (C14) .
En otro aspecto particular, la invención se dirige a compuestos de fórmula (Ib) :
≠wpage donde:
R1, R2, R3, R4, R5, R6, R7, R8, R11, R12, R13, R14, R15, R16, R21, R22 y R23 son independientemente hidrógeno; hidroxilo; halógeno; alquilo C1- C12 sustituido o no sustituido; arilo C6- C10 sustituido o no sustituido; un grupo amino N (R') (R'') , donde R' y R'' son independientemente hidrógeno o un grupo alquilo C1- C12; o cada pareja puede formar un grupo (C=O) junto con el carbono al que están unidos;
R9 y R10 son independientemente hidrógeno; alquilo C1- C12 sustituido o no sustituido; arilo C6- C10; un grupo COR''' (donde R''' es hidrógeno; hidroxilo; alquilo C1- C12 sustituido o no sustituido; arilo C6- C10 sustituido o no sustituido; O-alquilo C1- C12; o amino N (R') (R'') , donde R' y R'' son independientemente hidrógeno o un grupo alquilo C1- C12) ; un grupo carbinol (CH2) n- OH (donde n es un número entero comprendido entre 1 y 10) ; o juntos forman un grupo metileno,
R17 es hidrógeno o metilo;
R18 es hidrógeno; hidroxilo; halógeno; alquilo C1- C12; arilo C6- C10; COR''' (donde R''' es hidrógeno; hidroxilo; alquilo C1- C12; amino N (R') (R'') , donde R' y R'' son independientemente hidrógeno o un grupo alquilo C1- C12; o alcoxilo C1- C12) ; o trifluorometilo;
R19 y R20 son independientemente hidrógeno; alquilo C1- C12 sustituido o no sustituido; un grupo COR''' (donde R''' es hidrógeno; hidroxilo; alquilo C1- C12 sustituido o no sustituido; arilo C6- C10 sustituido o no sustituido; o amino N (R') (R'') , donde R' y R'' son independientemente hidrógeno o un grupo alquilo C1- C12) ; un grupo [alquilo (C1- C12) -O-alquilo (C1- C12) -]n (donde n está comprendido entre 1 y 3) o trifluorometilo; y
el enlace \overline{\text{- - - - - -}} significa un doble enlace o un enlace simple,
con la condición que cuando R19 y R20 son independientemente hidrógeno o acilo, R5 o R23 son hidroxilo.
En otra realización preferente, los compuestos de fórmula (Ib) comprenden una sub-estructura que presenta la siguiente fórmula (Ib') :
donde:
R19 y R20 son independientemente alquilo C1- C12 sustituido o no sustituido; un grupo COR''' (donde R''' es hidrógeno; hidroxilo; alquilo C1- C12 sustituido o no sustituido; arilo C6- C10 sustituido o no sustituido; o amino N (R') (R'') , donde R' y R'' son independientemente hidrógeno o un grupo alquilo C1- C12) ; un grupo [alquilo (C1- C12) -O-alquilo (C1- C12) -]n (donde n está comprendido entre 1 y 3) ; o trifluorometilo.
Un ejemplo particular de esta subestructura (Ib') es el éster del ácido 4-nitro- (3-dimetilcarbamoiloxi-5, 9-dihidroxi-4, 6b, 8a, 11, 12b, 14a-hexametil-10-oxo-5, 6b, 7, 8, 8a, 9, 10, 11, 12, 12a, 12b, 13, 14, 14a-tetradecahidro-picen-2-il) benzóico (C15) .
En otra realización preferente, los compuestos de fórmula (Ib) comprenden una sub-estructura que presenta la siguiente fórmula (Ib'') :
donde:
R18 es hidrógeno; hidroxilo; halógeno; alquilo C1- C12; arilo C6- C19; COR''' (donde R''' es hidrógeno; hidroxilo; alquilo C1- C12; amino N (R') (R'') , donde R' y R'' son independientemente hidrógeno o un grupo alquilo C1- C12; o alcoxilo C1- C12) ; o trifluorometilo;
R19 es hidrógeno; alquilo C1- C12 sustituido o no sustituido; un grupo COR''' (donde R''' es hidrógeno; hidroxilo; alquilo C1- C12 sustituido o no sustituido; arilo C6- C10 sustituido o no sustituido; o amino N (R') (R'') , donde R' y R'' son independientemente hidrógeno o un grupo alquilo C1- C12) ; un grupo [alquilo (C1- C12) -O-alquilo (C1- C12) -]n (donde n está comprendido entre 1 y 3) ; o trifluorometilo;
R23 es hidrógeno; hidroxilo; halógeno; alquilo C1- C12 sustituido o no sustituido; arilo C6- C10 sustituido o no sustituido; un grupo amino N (R') (R'') , donde R' y R'' son independientemente hidrógeno o un grupo alquilo C1- C12.
Ejemplos particulares de esta subestructura (Ib'') son:
- metil éster del ácido 7, 10, 11-trihidroxi-2, 4a, 6a, 9, 12b, 14a-hexametil-8-oxo-1, 2, 3, 4, 4a, 5, 6, 6a, 8, 12b, 13, 14, 14a, 14b-tetradecahidro-picen-2-carboxílico (F16) ;
- metil éster del ácido 9-formil-10, 11-dihidroxi-2, 4a, 6a, 12b, 14a-pentametil-8-oxo-1, 2, 3, 4, 4a, 5, 6, 6a, 8, 12b, 13, 14, 14a, 14b-tetradecahidro-picen-2-carboxílico (C17) ;
- metil éster del ácido 11-hidroxi-10- (2-metoxi-etoximetoxi) -2, 4a, 6a, 9, 12b, 14a-hexametil-8-oxo-1, 2, 3, 4, 4a, 5, 6, 6a, 8, 12b, 13, 14, 14a, 14b-tetradecahidro-picen-2-carboxílico (C18) .
En otro aspecto particular, la invención se dirige a compuestos de fórmula (Ic) :
donde:
R1, R2, R3, R4, R5, R6, R7, R8, R11, R12, R13, R14, R15, R16, R21 y R22 son independientemente hidrógeno; hidroxilo; halógeno; alquilo C1- C12 sustituido o no sustituido; arilo C6- C10 sustituido o no sustituido; un grupo amino N (R') (R'') , donde R' y R'' son independientemente hidrógeno o un grupo alquilo C1- C12; o cada pareja puede formar un grupo (C=O) junto con el carbono al que están unidos;
R9 y R10 son independientemente hidrógeno; alquilo C1- C12 sustituido o no sustituido; arilo C6- C10; un grupo COR''' (donde R''' es hidrógeno; hidroxilo; alquilo C1- C12 sustituido o no sustituido; arilo C6- C10 sustituido o no sustituido; O-alquilo C1- C12; o amino N (R') (R'') , donde R' y R'' son independientemente hidrógeno o un grupo alquilo C1- C12) ; un grupo carbinol (CH2) n- OH (donde n es un número entero comprendido entre 1 y 10) ; o juntos forman un grupo metileno,
R18 es hidrógeno; hidroxilo; halógeno; alquilo C1- C12; arilo C6- C10; COR''' (donde R''' es hidrógeno; hidroxilo; alquilo C1- C12; amino N (R') (R'') , donde R' y R'' son independientemente hidrógeno o un grupo alquilo C1- C12; o alcoxilo C1- C12) ; o trifluorometilo;
R19 y R20 son independientemente hidrógeno; alquilo C1- C12 sustituido o no sustituido; un grupo COR''' (donde R' es hidrógeno; hidroxilo; alquilo C1- C12 sustituido o no sustituido; arilo C6- C10 sustituido o no sustituido; o amino N (R') (R'') , donde R' y R'' son independientemente hidrógeno o un grupo alquilo C1- C12) ; un grupo [alquilo (C1- C12) -O-alquilo (C1- C12) -]n (donde n está comprendido entre 1 y 3) ; o trifluorometilo; y
el enlace \overline{\text{- - - - - -}} significa un doble enlace o un enlace simple,
con la condición que cuando R19 y R20 son ambos CH3, R15 y R16 no forman junto con el carbono al que están unidos un grupo C=O.
En una realización preferente, los compuestos de fórmula (Ic) comprenden una sub-estructura que presenta la siguiente fórmula (Ic') :
donde:
R19 y R20 son independientemente hidrógeno; alquilo C1- C12 sustituido o no sustituido; un grupo COR''' (donde R''' es hidrógeno; hidroxilo; alquilo C1- C12 sustituido o no sustituido; arilo C6- C10 sustituido o no sustituido; o amino N (R') (R'') , donde R' y R'' son independientemente hidrógeno o un grupo alquilo C1- C12) ; un grupo [alquilo (C1- C12) -O-alquilo (C1- C12) -]n (donde n está comprendido entre 1 y 3) ; o trifluorometilo; y
el enlace \overline{\text{- - - - - -}} significa un doble enlace o un enlace simple.
Ejemplo particulares de esta subestructura (Ic') son:
- 10, 11-dihidroxi-2, 4a, 6a, 9, 14a-pentametil-1, 4, 4a, 5, 6, 6a, 13, 14, 14a, 14b-decahidro-2H- picen-3-ona (C19) ;
- 10, 11-dihidroxi-2, 4a, 6a, 9, 14a-pentametil-4a, 5, 6, 6a, 13, 14, 14a, 14b-octahidro-4H-picen-3-ona (C20) .
En otra realización preferente, los compuestos de fórmula (Ic) comprenden una sub-estructura que presenta la siguiente fórmula (Ic'') :
donde:
R19 y R20 son independientemente hidrógeno; alquilo C1- C12 sustituido o no sustituido; un grupo COR''' (donde R' es hidrógeno; hidroxilo; alquilo C1- C12 sustituido o no sustituido; arilo C6- C10 sustituido o no sustituido; o amino N (R') (R'') , donde R' y R'' son independientemente hidrógeno o un grupo alquilo C1- C12) ; un grupo [alquilo (C1- C12) -O-alquilo (C1- C12) -]n (donde n está comprendido entre 1 y 3) ; o trifluorometilo.
Un ejemplo particular de esta subestructura (Ic'') es el metil éster del ácido 10, 11-dihidroxi-2, 4a, 6a, 9, 14a-pentametil-1, 2, 3, 4, 4a, 5, 6, 6a, 13, 14, 14a, 14b-dodecahidro-picen-2-carboxílico (C21) .
En otro aspecto particular, la invención se dirige a compuestos de fórmula (Id) :
donde:
R1, R2, R3, R4, R5, R6, R7, R8, R11, R12, R13, R15, R21 y R22 son independientemente hidrógeno; hidroxilo; halógeno; alquilo C1- C12 sustituido o no sustituido; arilo C6- C10 sustituido o no sustituido; un grupo amino N (R') (R'') , donde R' y R'' son independientemente hidrógeno o un grupo alquilo C1- C12; o cada pareja puede formar un grupo (C=O) junto con el carbono al que están unidos;
R9 y R10 son independientemente hidrógeno; alquilo C1- C12 sustituido o no sustituido; arilo C6- C10; un grupo COR''' (donde R''' es hidrógeno; hidroxilo; alquilo C1- C12 sustituido o no sustituido; arilo C6- C10 sustituido o no sustituido; O-alquilo C1- C12; o amino N (R') (R'') , donde R' y R'' son independientemente hidrógeno o un grupo alquilo C1- C12) ; un grupo carbinol (CH2) n- OH (donde n es un número entero comprendido entre 1 y 10) ; o juntos forman un grupo metileno,
R18 es hidrógeno; hidroxilo; halógeno; alquilo C1- C12; arilo C6- C10; COR''' (donde R''' es hidrógeno; hidroxilo; alquilo C1- C12; amino N (R') (R'') , donde R' y R'' son independientemente hidrógeno o un grupo alquilo C1- C12; o alcoxilo C1- C12) ; o trifluorometilo;
R19, R19', R20 y R20' son independientemente hidrógeno; alquilo C1- C12 sustituido o no sustituido; un grupo COR''' (donde R''' es hidrógeno; hidroxilo; alquilo C1- C12 sustituido o no sustituido; arilo C6- C10 sustituido o no sustituido; o amino N (R') (R'') , donde R' y R'' son independientemente hidrógeno o un grupo alquilo C1- C12) ; un grupo [alquilo (C1- C12) -O-alquilo (C1- C12) -]n (donde n está comprendido entre 1 y 3) ; trifluorometilo; o cada pareja 19-19' o 20-20' puede formar un grupo C=O junto con el carbono al que están unidos;
R23 y R24 son independientemente hidrógeno, hidroxilo o halógeno; y
el enlace \overline{\text{- - - - - -}} significa un doble enlace o un enlace simple.
En una realización preferente, los compuestos de fórmula (Id) comprenden una sub-estructura que presenta la siguiente fórmula (Id') :
donde:
R5 y R6 son independientemente hidrógeno; hidroxilo; halógeno; alquilo C1- C12 sustituido o no sustituido; arilo C6- C10 sustituido o no sustituido; un grupo amino N (R') (R'') , donde R' y R'' son independientemente hidrógeno o un grupo alquilo C1- C12; o cada pareja puede formar un grupo (C=O) junto con el carbono al que están unidos;
R19, R19', R20 y R20' son independientemente hidrógeno; alquilo C1- C12 sustituido o no sustituido; un grupo COR''' (donde R''' es hidrógeno; hidroxilo; alquilo C1- C12 sustituido o no sustituido; arilo C6- C10 sustituido o no sustituido; o amino N (R') (R'') , donde R' y R'' son independientemente hidrógeno o un grupo alquilo C1- C12) ; un grupo [alquilo (C1- C12) -O-alquilo (C1- C12) -]n (donde n está comprendido entre 1 y 3) ; trifluorometilo; o cada pareja 19-19' o 20-20' puede formar un grupo C=O junto con el carbono al que están unidos;
R23 y R24 son independientemente hidrógeno, hidroxilo o halógeno.
Ejemplos particulares de esta subestructura (Id') son:
- 1-bromo-9-hidroxi-4, 6b, 8a, 11, 12b, 14b-hexametil-6b, 7, 8, 8a, 9, 11, 12, 12a, 12b, 14b-decahidro-1H- picen-2, 3, 10- triona (C22) ;
- 1-bromo-4, 6b, 8a, 11, 12b, 14b-hexametil-6b, 7, 8, 8a, 9, 11, 12, 12a, 12b, 14b-decahidro-1H- picen-2, 3, 10-triona (C23) .
En otra realización preferente, los compuestos de fórmula (Id) comprenden una sub-estructura que presenta la siguiente fórmula (Id'') :
donde:
R19, R19', R20 y R20' son independientemente hidrógeno; alquilo C1- C12 sustituido o no sustituido; un grupo COR''' (donde R''' es hidrógeno; hidroxilo; alquilo C1- C12 sustituido o no sustituido; arilo C6- C10 sustituido o no sustituido; o amino N (R') (R'') , donde R' y R'' son independientemente hidrógeno o un grupo alquilo C1- C12) ; un grupo [alquilo (C1- C12) -O-alquilo (C1- C12) -]n (donde n está comprendido entre 1 y 3) ; trifluorometilo; o cada pareja 19-19' o 20-20' puede formar un grupo C=O junto con el carbono al que están unidos;
R23 y R24 son independientemente hidrógeno, hidroxilo o halógeno.
Un ejemplo particular de esta subestructura (Id'') es el metil éster del ácido 12-bromo-2, 4a, 6a, 9, 12a, 14a-hexametil-10, 11-dioxo-1, 2, 3, 4, 4a, 5, 6, 6a, 10, 11, 12, 12a, 14a, 14b-tetradecahidro-picen-2-carboxílico (C24) .
En otro aspecto particular, la invención se dirige a compuestos de fórmula (Ie) :
donde:
R1, R2, R3, R4, R5, R6, R7, R8, R11, R12, R13, R14, R15, R16, R21 y R22 son independientemente hidrógeno; hidroxilo; halógeno; alquilo C1- C12 sustituido o no sustituido; arilo C6- C10 sustituido o no sustituido; un grupo amino N (R') (R'') , donde R' y R'' son independientemente hidrógeno o un grupo alquilo C1- C12; o cada pareja puede formar un grupo (C=O) junto con el carbono al que están unidos;
R9 y R10 son independientemente hidrógeno; alquilo C1- C12 sustituido o no sustituido; arilo C6- C10; un grupo COR''' (donde R''' es hidrógeno; hidroxilo; alquilo C1- C12 sustituido o no sustituido; arilo C6- C10 sustituido o no sustituido; O-alquilo C1- C12; o amino N (R') (R'') , donde R' y R'' son independientemente hidrógeno o un grupo alquilo C1- C12) ; un grupo carbinol (CH2) n- OH (donde n es un número entero comprendido entre 1 y 10) ; o juntos forman un grupo metileno;
R18, R18', R19, R19', R20 y R20' son independientemente hidrógeno; alquilo C1- C12 sustituido o no sustituido; un grupo COR''' (donde R' es hidrógeno; hidroxilo; alquilo C1- C12 sustituido o no sustituido; arilo C6- C10 sustituido o no sustituido; o amino N (R') (R'') , donde R' y R'' son independientemente hidrógeno o un grupo alquilo C1- C12) ; un grupo [alquilo (C1- C12) -O-alquilo (C1- C12) -]n (donde n está comprendido entre 1 y 3) ; trifluorometilo; o cada pareja 19-19' o 20-20' puede formar un grupo C=O junto con el carbono al que están unidos;
R23 es hidrógeno, hidroxilo o halógeno; y
el enlace \overline{\text{- - - - - -}} significa un doble enlace o un enlace simple.
En una realización preferente, los compuestos de fórmula (Ie) comprenden una sub-estructura que presenta la siguiente fórmula (Ie') :
donde:
R18, R18', R19, R19', R20 y R20', son independientemente hidrógeno; alquilo C1- C12 sustituido o no sustituido; un grupo COR''' (donde R''' es hidrógeno; hidroxilo; alquilo C1- C12 sustituido o no sustituido; arilo C6- C10 sustituido o no sustituido; o amino N (R') (R'') , donde R' y R'' son independientemente hidrógeno o un grupo alquilo C1- C12) ; un grupo [alquilo (C1- C12) -O-alquilo (C1- C12) -]n (donde n está comprendido entre 1 y 3) ; trifluorometilo; o cada pareja 19-19' o 20-20' puede formar un grupo C=O junto con el carbono al que están unidos;
R23 es hidrógeno, hidroxilo o halógeno.
Un ejemplo particular de esta subestructura (Ie') es el metil éster del ácido 9-hidroxi-2, 4a, 6a, 9, 12b-hexametil-10, 11-dioxo-1, 2, 3, 4, 4a, 5, 6, 6a, 9, 10, 11, 12b, 13, 14, 14a, 14b-hexadecahidro-picen-2-carboxílico (C25) .
En otro aspecto particular, la invención se dirige a compuestos de fórmula (If) :
donde:
R1, R2, R3, R4, R5, R6, R7, R8, R11, R12, R13, R14, R15, R21 y R22 son independientemente hidrógeno; hidroxilo; halógeno; alquilo C1- C12 sustituido o no sustituido; arilo C6- C10 sustituido o no sustituido; un grupo amino N (R') (R'') , donde R' y R'' son independientemente hidrógeno o un grupo alquilo C1- C12; o cada pareja puede formar un grupo (C=O) junto con el carbono al que están unidos;
R9 y R10 son independientemente hidrógeno; alquilo C1- C12 sustituido o no sustituido; arilo C6- C10; un grupo COR''' (donde R''' es hidrógeno; hidroxilo; alquilo C1- C12 sustituido o no sustituido; arilo C6- C10 sustituido o no sustituido; O-alquilo C1- C12; o amino N (R') (R'') , donde R' y R'' son independientemente hidrógeno o un grupo alquilo C1- C12) ; un grupo carbinol (CH2) n- OH (donde n es un número entero comprendido entre 1 y 10) ; o juntos forman un grupo metileno,
R18, R18', R19, R19', R20 y R20', son independientemente hidrógeno; alquilo C1- C12 sustituido o no sustituido; un grupo COR''' (donde R''' es hidrógeno; hidroxilo; alquilo C1- C12 sustituido o no sustituido; arilo C6- C10 sustituido o no sustituido; o amino N (R') (R'') , donde R' y R'' son independientemente hidrógeno o un grupo alquilo C1- C12) ; un grupo [alquilo (C1- C12) -O-alquilo (C1- C12) -]n (donde n está comprendido entre 1 y 3) ; trifluorometilo; o cada pareja 19-19' o 20-20' puede formar un grupo C=O junto con el carbono al que están unidos;
R23 es hidrógeno, hidroxilo o halógeno; y
el enlace \overline{\text{- - - - - -}} significa un doble enlace o un enlace simple.
En una realización preferente, los compuestos de fórmula (If) comprenden una sub-estructura que presenta la siguiente fórmula (If') :
donde:
R18, R18', R19, R19', R20 y R20' son independientemente hidrógeno; alquilo C1- C12 sustituido o no sustituido; un grupo COR''' (donde R''' es hidrógeno; hidroxilo; alquilo C1- C12 sustituido o no sustituido; arilo C6- C10 sustituido o no sustituido; o amino N (R') (R'') , donde R' y R'' son independientemente hidrógeno o un grupo alquilo C1- C12) ; un grupo [alquilo (C1- C12) -O-alquilo (C1- C12) -]n (donde n está comprendido entre 1 y 3) ; o trifluorometilo; o cada pareja 19-19' o 20-20' puede formar un grupo C=O junto con el carbono al que están unidos;
R23 es hidrógeno, hidroxilo o halógeno.
Un ejemplo particular de esta subestructura (If') es el metil éster del ácido 9-hidroxi-2, 4a, 6a, 6b, 9-hexametil-10, 11-dioxo-1, 2, 3, 4, 4a, 5, 6, 6a, 6b, 8a, 9, 10, 11, 14, 14a, 14b-hexadecahidro-picen-2-carboxílico (C26) .
Otro aspecto de la invención lo constituyen compuestos de fórmula (II) :
donde:
R1, R2, R3, R4, R5, R6, R9, R10, R11, R12, R13, R14, R15, R16, R17, R18, R19 y R20 son independientemente hidrógeno; hidroxilo; halógeno; alquilo C1- C12 sustituido o no sustituido; arilo C6- C10 sustituido o no sustituido; un grupo amino N (R') (R'') , donde R' y R'' son independientemente hidrógeno o un grupo alquilo C1- C12; o cada pareja puede formar un grupo carboxilo (C=O) junto con el carbono al que están unidos;
R7 y R8 son independientemente hidrógeno; alquilo C1- C12 sustituido o no sustituido; arilo C6- C10; un grupo COR''' (donde R''' es hidrógeno; hidroxilo; alquilo C1- C12 sustituido o no sustituido; arilo C6- C10 sustituido o no sustituido; O-alquilo C1- C12; o amino N (R') (R'') , donde R' y R'' son independientemente hidrógeno o un grupo alquilo C1- C12) ; un grupo carbinol (CH2) n- OH (donde n es un número entero comprendido entre 1 y 10) ; o juntos forman un grupo metileno,
R21 y R24 son independientemente alquilo C1- C12 sustituido o no sustituido; un grupo COR''' (donde R''' es hidrógeno; hidroxilo; alquilo C1- C12 sustituido o no sustituido; arilo C6- C10 sustituido o no sustituido; o amino N (R') (R'') , donde R' y R'' son independientemente hidrógeno o un grupo alquilo C1- C12) ; un grupo [alquilo (C1- C12) -O-alquilo (C1- C12) -]n (donde n está comprendido entre 1 y 3) ; o trifluorometilo;
R22 y R23 son:
- hidrógeno; alquilo C1- C12 sustituido o no sustituido; un grupo COR''' (donde R' es hidrógeno; hidroxilo; alquilo C1- C12 sustituido o no sustituido; arilo C6- C10 sustituido o no sustituido; o amino N (R') (R'') , donde R' y R'' son independientemente hidrógeno o un grupo alquilo C1- C12) ; un grupo [alquilo (C1- C12) -O-alquilo (C1- C12) -]n (donde n está comprendido entre 1 y 3) ; o trifluorometilo cuando R24 se encuentra en posición para respecto a R20; o - OR22' y OR23' respectivamente, donde R22' y R23' son independientemente hidrógeno; alquilo C1- C12 sustituido o no sustituido; un grupo COR''' (donde R''' es hidrógeno; hidroxilo; alquilo C1- C12 sustituido o no sustituido; arilo C6- C10 sustituido o no sustituido; o amino N (R') (R'') , donde R' y R'' son independientemente hidrógeno o un grupo alquilo C1- C12) ; un grupo [alquilo (C1- C12) -O-alquilo (C1- C12) -]n, (donde n está comprendido entre 1 y 3) ; o trifluorometilo cuando R24 se encuentra en posición meta respecto a R20. o bien una sal farmacéuticamente aceptable, un profármaco o un solvato del mismo.
En un aspecto particular, la invención se dirige a compuestos de fórmula (IIa) :
donde:
R1, R2, R3, R4, R5, R6, R9, R10, R11, R12, R13, R14, R15, R16, R17, R18, R19 y R20 son independientemente hidrógeno; hidroxilo; halógeno; alquilo C1- C12 sustituido o no sustituido; arilo C6- C10 sustituido o no sustituido; un grupo amino N (R') (R'') , donde R' y R'' son independientemente hidrógeno o un grupo alquilo C1- C12; o cada pareja puede formar un grupo carboxilo (C=O) junto con el carbono al que están unidos;
R7 y R8 son independientemente hidrógeno; alquilo C1- C12 sustituido o no sustituido; arilo C6- C10; un grupo COR''' (donde R''' es hidrógeno; hidroxilo; alquilo C1- C12 sustituido o no sustituido; arilo C6- C10 sustituido o no sustituido; O-alquilo C1- C12; o amino N (R') (R'') , donde R' y R'' son independientemente hidrógeno o un grupo alquilo C1- C12) ; un grupo carbinol (CH2) n- OH (donde n es un número entero comprendido entre 1 y 10) ; o juntos forman un grupo metileno,
R21 y R24 son independientemente alquilo C1- C12 sustituido o no sustituido; un grupo COR''' (donde R''' es hidrógeno; hidroxilo; alquilo C1- C12 sustituido o no sustituido; arilo C6- C10 sustituido o no sustituido; o amino N (R') (R'') , donde R' y R'' son independientemente hidrógeno o un grupo alquilo C1- C12) ; un grupo [alquilo (C1- C12) -O-alquilo (C1- C12) -]n (donde n está comprendido entre 1 y 3) ; o trifluorometilo;
R22 y R23 son:
- hidrógeno, alquilo C1- C12 sustituido o no sustituido; un grupo COR''' (donde R''' es hidrógeno; hidroxilo; alquilo C1- C12 sustituido o no sustituido; arilo C6- C10 sustituido o no sustituido; o amino N (R') (R'') , donde R' y R'' son independientemente hidrógeno o un grupo alquilo C1- C12) ; un grupo [alquilo (C1- C12) -O-alquilo (C1- C12) -]n (donde n está comprendido entre 1 y 3) ; o trifluorometilo cuando R24 se encuentra en posición para respecto a R20; o - OR22' y OR23' respectivamente, donde R22' y R23' son independientemente hidrógeno; alquilo C1- C12 sustituido o no sustituido; un grupo COR''' (donde R''' es hidrógeno; hidroxilo; alquilo C1- C12 sustituido o no sustituido; arilo C6- C10 sustituido o no sustituido; o amino N (R') (R'') , donde R' y R'' son independientemente hidrógeno o un grupo alquilo C1- C12) ; un grupo [alquilo (C1- C12) -O-alquilo (C1- C12) -]n (donde n está comprendido entre 1 y 3) ; o trifluorometilo cuando R24 se encuentra en posición meta respecto a R20. En una realización preferente, los compuestos de fórmula (IIa) comprenden una sub-estructura que presenta la siguiente fórmula (IIa') :
donde:
R19, R20, R21, R22, R23 y R24 son independientemente hidrógeno; hidroxilo; halógeno; alquilo C1- C12 sustituido o no sustituido; arilo C6- C10 sustituido o no sustituido; un grupo amino N (R') (R'') , donde R' y R'' son independientemente hidrógeno o un grupo alquilo C1- C12; o cada pareja puede formar un grupo carboxilo (C=O) junto con el carbono al que están unidos;
Un ejemplo particular de esta subestructura (IIa') es:
- metil éster del ácido 8-[2- (6, 7-dihidroxi-1, 5-dimetil-naftalen-2-yl) -etil]-2, 4a-tetrametil-1, 2, 3, 4, 4a, 5, 6, 7-octahidro-naftalen-2-carboxílico (C27) .
En otro aspecto la presente invención se relaciona con un procedimiento para la preparación de compuestos de fórmula (I) que comprende las siguientes características:
a) La metodología usual para la introducción quimioselectiva en el hidroxilo en C-3 del derivado friedelánico de origen natural de la familia química de las metiléntriterpenoquinonas relacionadas con la pristimerina, requiere un análisis de las condiciones de basicidad para abstraer el protón fenólico y posterior reacción con los agentes acilantes o de otro tipo que se indican. Resulta relevante que si el control de pH no es el apropiado se producen reacciones sobre C-6 que complican el proceso sintético. b) El método para la introducción quimioselectiva en el C-23 de los grupos indicados se realizará por oxidación controlada con reactivos específicos para sistemas aromáticos alílicos y posteriores transformaciones de la funcionalidad así obtenida. c) Mediante un proceso ya estudiado el C-25 será transformado en grupo fluorometilo y las consiguientes transformaciones de grupos funcionales nos permitirán llegar a los grupos indicados. d) El uso de reacciones de halogenación heterolíticas y hemolíticas junto a procesos de oxidación quimioselectivos y la introducción de nitrógenos mediante el uso de azidas forma parte de alguno de los métodos a utilizar para la consecución de nuestros objetivos. e) Aprovechando las funcionalizaciones en C-11 se abordará con la metodología anteriormente estudiada, la obtención de dobles enlaces C11-C12 que servirán como grupo funcional para aplicar sobre ellos un TGF (Transformaciones de Grupos Funcionales) al objeto de preparar los compuestos previstos. f) Las posiciones C-15 y C16 se han funcionalizado realizando reacciones de oxidación alílicas a partir de dobles enlaces en el anillo E o bien en el anillo C y a partir de ahí, la aplicación de TGF. g) Las posiciones C-19, C-20, C-21 y C-22 pueden encontrarse funcionalizadas parcialmente en algunos de los sustratos de partida y la química de introducción de grupos funcionales en este anillo la hemos elaborado muy ampliamente. Ejemplos particulares de la presente invención se describen en el apartado de ejemplos preparativos, no obstante un experto en la materia lograría sintetizar cualquiera de los compuestos descritos por métodos sintéticos convencionales del estado de la técnica.
El término "sales, solvatos, profármacos farmacéuticamente aceptables" se refiere a cualquier sal, éster, solvato farmacéuticamente aceptable, o cualquier otro compuesto que, cuando se administra a un receptor es capaz de proporcionar (directamente o indirectamente) un compuesto según se describe en el presente documento. Sin embargo, se apreciará que las sales farmacéuticamente no aceptables también están dentro del alcance de la invención ya que éstas pueden ser útiles en la preparación de sales farmacéuticamente aceptables. La preparación de sales, profármacos y derivados puede llevarse a cabo mediante métodos conocidos en la técnica.
Por ejemplo, sales farmacéuticamente aceptables de compuestos previstos en el presente documento, se sintetizan mediante métodos químicos convencionales a partir de un compuesto original que contiene un resto básico ó ácido. Generalmente, tales sales se preparan, por ejemplo, haciendo reaccionar las formas de ácido o base libre de los compuestos con una cantidad estequiométrica de la base o ácido apropiado en agua o en un disolvente orgánico o en una mezcla de los dos. Generalmente, se prefieren medios no acuosos como éter, acetato de etilo, etanol, isopropanol o acetonitrilo. Ejemplos de sales de adición de ácidos incluyen sales de adición de ácido mineral tales como, por ejemplo, clorhidrato, bromhidrato, yodhidrato, sulfato, nitrato, fosfato y sales de adición de ácido orgánico tales como, por ejemplo, acetato, maleato, fumarato, citrato, oxalato, succinato, tartrato, malato, mandelato, metanosulfonato y p- toluensulfonato. Ejemplos de sales de adición de bases incluyen sales inorgánicas tales como, por ejemplo, sales de sodio, potasio, calcio, amonio, magnesio, aluminio y litio, y sales de bases orgánicas tales como, por ejemplo, etilenodiamina, etanolamina, N, N-dialquilenetanolamina, trietanolamina, glucamina y sales de aminoácidos básicos.
Los derivados o profármacos particularmente favoritos son aquellos que aumentan las biodisponibilidad de los compuestos de esta invención cuando se administran tales compuestos a un paciente (por ejemplo, haciendo que un compuesto administrado por vía oral se absorba más fácilmente por la sangre) , o que potencia la liberación del compuesto original en un compartimento biológico (por ejemplo, el cerebro o el sistema linfático) con relación a la especie original.
Cualquier compuesto que es un profármaco de un compuesto de fórmula (I) o de fórmula (II) está dentro del alcance de la invención. El término "profármaco" se usa en su sentido más amplio y abarca aquellos derivados que se convierten en vivo en los compuestos de la invención. Tales derivados serán evidentes para los expertos en la técnica, e incluyen, dependiendo de los grupos funcionales presentes en la molécula y sin limitación, los siguientes derivados de los compuestos presentes: ésteres, ésteres de aminoácido, ésteres de fosfato, ésteres de sulfonato de sales metálicas, carbamatos, y amidas. Ejemplos de métodos para producir una prodroga de un compuesto activo dado son conocidos por el experto en la materia y pueden encontrarse por ejemplo en Krogsgaard-Larsen et al. "Textbook of Drug design and Discover y " Taylor & Francis (April 2002) .
Los compuestos empleados en la invención pueden estar en forma cristalina como compuestos libres o como solvatos y se pretende que ambas formas están dentro del alcance de la presente invención. Los métodos de solvatación se conocen generalmente dentro de la técnica. Los solvatos adecuados son solvatos farmacéuticamente aceptables. En una realización particular, el solvato es un hidrato.
Los compuestos empleados en la presente invención representados por la fórmula (I) anteriormente descrita pueden incluir enantiómeros, dependiendo de la presencia de centros quirales sobre un C, o isómeros, dependiendo de la presencia de enlaces múltiples (por ejemplo, Z, E) . Los isómeros, enantiómeros o diastereoisómeros individuales y las mezclas de los mismos caen dentro del alcance de la presente invención.
Los diferentes sustituyentes seleccionados para los distintos compuestos de la invención aportan una serie de factores que influyen de forma notable en los valores de log P. Así, los grupos hidroxilo actúan como donantes de puentes de hidrógeno e incluso en el caso de fenoles se pueden establecer lazos intra o intermoleculares. La presencia de grupos carbonilos o carboxilos genera en la molécula grupos aceptores de protones. La presencia de halógenos genera carbonos muy deficientes y modifica de forma notable las propiedades biológicas. Los grupos amino generan buenos nucleófilos sobre la molécula y modifican significativamente en muchos casos su polaridad y polarizabilidad y la presencia de grupos alquilo y/o arilo adicionales aumenta la lipofilia de las moléculas.
La presente invención proporciona adicionalmente composiciones farmacéuticas que comprenden un compuesto de fórmula (I) , (Ia) , (Ia') , (Ia'') , (Ia''') , (Ib) , (Ib') , (Ib'') , (Ic) , (Ic') , (Ic'') , (Id) , (Id') , (Id'') , (Ie) , (Ie') , (If) , (If') , (II) , (IIa) , (IIa') o mezclas de los mismos, una sal, derivado, profármaco, solvato o esteroisómero farmacéuticamente aceptable del mismo junto con un portador, adyuvante, o vehículo farmacéuticamente aceptable, para la administración a un paciente.
Las composiciones farmacéuticas se pueden administrar por cualquier vía de administración adecuada, por ejemplo oral, tópica, rectal o parenteral (incluyendo subcutánea, intraperitoneal, intradérmica, intramuscular e intraveno- sa) .
Formas farmacéuticas adecuadas para la administración oral incluyen cualquier composición sólida (comprimidos, pastillas, cápsulas, gránulos, etc.) o líquida (soluciones, suspensiones, emulsiones, jarabes, etc.) y pueden contener excipientes convencionales conocidos en la técnica, tales como agentes aglutinantes, por ejemplo sirope, acacia, gelatina, sorbitol, tragacanto, o polivinilpirrolidona; cargas, por ejemplo lactosa, azúcar, almidón de maíz, fosfato cálcico, sorbitol o glicina; lubricantes para la preparación de comprimidos, por ejemplo estearato de magnesio; disgregantes, por ejemplo almidón, polivinilpirrolidona, glicolato sódico de almidón o celulosa microcristalina; o agentes humectantes farmacéuticamente aceptable tales como laurilsulfato sódico.
Las composiciones sólidas orales pueden prepararse mediante métodos convencionales de mezclado, relleno o preparación de comprimidos. Las operaciones de mezclado repetidas pueden usarse para distribuir el principio activo por la totalidad de esas composiciones empleando grandes cantidades de agentes de carga. Tales operaciones son convencionales en la técnica. Los comprimidos pueden prepararse, por ejemplo, mediante granulación en húmedo o en seco, y recubrirse de forma opcional según métodos bien conocidos en la práctica farmacéutica normal, en particular con un recubrimiento entérico.
Las composiciones farmacéuticas, también pueden adaptarse para la administración parenteral, tales como soluciones estériles, suspensiones o productos liofilizados en una forma farmacéutica unitaria apropiada. Pueden usarse excipientes adecuados, tales como agentes de granel, agentes tamponantes o tensioactivos.
Las formulaciones mencionadas se prepararán usando métodos habituales tales como aquellos descritos o referidos en las Farmacopeas Española y de los Estados Unidos y en textos de referencia similares.
La administración de los compuestos o composiciones empleados en la presente invención puede ser mediante cualquier método adecuado, tal como infusión intravenosa, preparaciones orales y administración intraperitoneal e intravenosa. No obstante, la vía de administración preferente dependerá del estado del paciente. Se prefiere la administración oral debido a la comodidad para el paciente y al carácter crónico de las enfermedades que se van a tratar.
Para su aplicación en terapia los compuestos de fórmula (I) y fórmula (II) se encontrarán preferiblemente en una forma farmacéuticamente aceptable o sustancialmente pura, es decir, que los compuestos de fórmula (I) y fórmula (II) tienen un nivel de pureza farmacéuticamente aceptable excluyendo los excipientes farmacéuticamente aceptables y no incluyendo material considerado tóxico a los niveles de dosificación normales. Los niveles de pureza para un compuesto de fórmula (I) o para un compuesto de fórmula (II) son preferiblemente superiores al 50%, más preferiblemente, superiores al 70%, más preferiblemente, superiores al 90%. En una realización preferida, son superiores al 95%.
En general, la cantidad terapéuticamente efectiva del compuesto de fórmula (I) o del compuesto de fórmula (II) a administrar dependerá, entre otros factores, del individuo que vaya a ser tratado, de la severidad de la enfermedad que padezca dicho individuo, de la forma de administración elegida, etc. Por este motivo, las dosis mencionadas en esta invención deben ser consideradas tan solo como guías para el experto en la materia, y éste debe ajustar las dosis en función de las variables citadas anteriormente. No obstante, se puede administrar un compuesto de fórmula (I) , una o más veces al día, por ejemplo, 1, 2, 3 ó 4 veces al día, en una cantidad típica total diaria comprendida entre 1 y 200 mg/kg masa corporal/día, preferentemente 1-10 mg/kg masa corporal/día. De la misma manera se puede administrar un compuesto de fórmula (II) , una o más veces al día, por ejemplo, 1, 2, 3 ó 4 veces al día, en una cantidad típica total diaria comprendida entre 1 y 200 mg/kg masa corporal/día, preferentemente 1-10 mg/kg masa corporal/día.
Los compuestos descritos en esta invención, sus sales farmacéuticamente aceptables, profármacos y/o solvatos, así como las composiciones farmacéuticas que los contienen pueden ser utilizados junto con otros fármacos adicionales para proporcionar una terapia de combinación. Dichos fármacos adicionales pueden formar parte de la misma composición farmacéutica o, alternativamente, pueden ser proporcionados en forma de una composición separada para su administración simultánea o no a la de la composición farmacéutica que comprende un compuesto de fórmula (I) o de fórmula (II) , o un profármaco, solvato o una sal farmacéuticamente aceptable de los mismos.
Los otros fármacos pueden formar parte de la misma composición o facilitarse como una composición separada para su administración al mismo tiempo o en momentos diferentes.
Los compuestos de la invención actúan como bloqueantes de la biosíntesis de fosforilcolina mediante bloqueo selectivo de la enzima colina quinasa (ChoK) y han demostrado un efecto selectivo sobre rutas de señalización necesarias para la transformación por determinados oncogenes, que no afectan a las células normales con la misma intensidad y, por tanto, dejan margen suficiente a una mayor eficacia en el tratamiento tumoral.
Así, otro objeto de la presente invención se refiere al uso de un compuesto de fórmula (I) , (Ia) , (Ia') , (Ia'') , (Ia''') , (Ib) , (Ib') , (Ib'') , (Ic) , (Ic') , (Ic'') , (Id) , (Id') , (Id'') , (Ie) , (Ie') , (If) , (If') , (II) , (IIa) o (IIa') para la elaboración de un medicamento dirigido al tratamiento del cáncer, y de forma preferente al tratamiento del cáncer de mama, pulmón, colorectal o de páncreas.
Por otra parte, los ensayos biológicos realizados permiten extender el empleo de los compuestos descritos en la presente invención para el tratamiento de afecciones virales, parasitarias, bacterianas y fúngicas, debido a que algunos parásitos, como Plasmodium falciparum o Tripanosoma cruci, algunos virus como adenovirus, bacterias como Streptococcus pneumoniae y hongos, como Candida albicans, requieren la ruta metabólica de síntesis de fosfatidilcolina a través de la colina quinasa para completar sus ciclos infectivos en humanos y animales. En este sentido, los antecedentes bibliográficos apoyan el papel de la enzima ChoK en el metabolismo intracelular de determinados nucleósidos en células Hep-G2, la utilización de dicha enzima como marcador enzimático en enfermedades parasitarias, y la participación de la misma en la biosíntesis de importantes fosfolípidos en virus, bacterias y hongos.
Consecuentemente, otro objeto de la invención proporciona el uso de un compuesto de fórmula (I) , (Ia) , (Ia') , (Ia'') , (Ia''') , (Ib) , (Ib') , (Ib'') , (Ic) , (Ic') , (Ic'') , (Id) , (Id') , (Id'') , (Ie) , (Ie') , (If) , (If') , (II) , (IIa) , (IIa') o mezclas de los mismos para la elaboración de un medicamento dirigido al tratamiento de enfermedades víricas, preferentemente aquellas producidas por Adenovirus.
En otro aspecto la invención se dirige al uso de un compuesto de fórmula (I) , (Ia) , (Ia') , (Ia'') , (Ia''') , (Ib) , (Ib') , (Ib'') , (Ic) , (Ic') , (Ic'') , (Id) , (Id') , (Id'') , (Ie) , (Ie') , (If) , (If') , (II) , (IIa) , (IIa') o mezclas de los mismos para la elaboración de un medicamento dirigido al tratamiento de enfermedades parasitarias, preferentemente aquellas producidas por Plasmodium o Tripanosoma.
Un siguiente aspecto de la invención lo constituye el uso de un compuesto de fórmula (I) , (Ia) , (Ia') , (Ia'') , (Ia''') , (Ib) , (Ib') , (Ib'') , (Ic) , (Ic') , (Ic'') , (Id) , (Id') , (Id'') , (Ie) , (Ie') , (If) , (If') , (II) , (IIa) , (IIa') o mezclas de los mismos para la elaboración de un medicamento dirigido al tratamiento de enfermedades bacterianas, preferentemente aquellas producidas por Streptococus.
Un objeto adicional de la presente invención se dirige al uso de un compuesto de fórmula (I) , (Ia) , (Ia') , (Ia'') , (Ia''') , (Ib) , (Ib') , (Ib'') , (Ic) , (Ic') , (Ic'') , (Id) , (Id') , (Id'') , (Ie) , (Ie') , (If) , (If') , (II) , (IIa) , (IIa') o mezclas de los mismos para la elaboración de un medicamento dirigido al tratamiento de enfermedades fúngicas, preferentemente aquellas producidas por Candida.
Un último objeto de la invención lo constituye un compuesto de fórmula (I) , (Ia) , (Ia') , (Ia'') , (Ia''') , (Ib) , (Ib') , (Ib'') , (Ic) , (Ic') , (Ic'') , (Id) , (Id') , (Id'') , (Ie) , (Ie') , (If) , (If') , (II) , (IIa) , (IIa') o mezclas de los mismos, o una sal, derivado, profármaco, solvato o estereoisómero farmacéuticamente aceptable del mismo, para el tratamiento del cáncer, de enfermedades parasitarias, de enfermedades bacterianas o de enfermedades fúngicas.
Los siguientes ejemplos se dan solo como una ilustración adicional de la invención, no deben de ser interpretados como limitantes de la invención tal como está definida en las reivindicaciones.
Ejemplos
Ejemplos preparativos
Ejemplo 1
Compuesto C3: 12-bromo-3, 9-dihidroxi-6b, 8a, 11, 12b, 14a-hexametil-7, 8, 8a, 11, 12, 12a, 12b, 13, 14, 14a-decahidro-6bH, 9H-picen-2, 10-diona
300 g de la corteza de raíz de Maytenus amazonica fueron extraídos en 2 litros de una mezcla de disolventes n- hexano-éter etílico 1:1, en un equipo soxhlet a reflujo durante 48 horas, obteniéndose 70 gramos de un sólido rojizo, después de evaporar el disolvente. El extracto fue cromatografiado sobre una columna de sephadex LH-20, usando como eluyente una mezcla de n- hexano-CHCl3- MeOH 2:1:1. Se obtuvieron un total de 41 fracciones que se reunieron según cromatografía de capa fina en siete grupos (A, B, C, D, E, F y G) . Estos grupos, a su vez, fueron fraccionados en columnas de sephadex LH-20, en columnas de gel de sílice de media presión y en placas preparativas, de las cuales se obtuvo el compuesto de partida 22β-hidroxi-tingenona o [3, 9-dihidroxi-6b, 8a, 11, 12b, 14a-hexametil-7, 8, 8a, 11, 12, 12a, 12b, 13, 14, 14a-decahidro-6bH, 9H-picen-2, 10-diona].
342 mg (0.78 mmoles) de 22β-hidroxi-tingenona en 50 ml de CH2Cl2 seco, bajo atmósfera inerte y a 0°C fueron tratados con 1, 5 eq de BBr3 (1M) . La mezcla de reacción se siguió por cromatografía de capa fina, dejándose en agitación durante 30 minutos, hasta que se agotó el producto de partida. Transcurrido este tiempo se añadieron 50 ml de agua destilada fría y la mezcla se agitó durante otros 30 minutos. Seguidamente se procedió a una extracción con CH2Cl2. Las fases orgánicas se secaron con sulfato de magnesio anhidro y el disolvente se evaporó a presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía de sephadex LH-20, usando como eluyente la mezcla n- hexano:cloroformo:metanol 2:1:1 y en columna de cromatografía en gel de sílice, usando como eluyente n- hexano-acetato de etilo 7:3. Se obtuvieron 111 mg (27%) del producto C3.
1H RMN (300 MHz, CDCl3) δ 0.50 (3H, s, Me-27) ; 1.16 (3H, d, J= 5.9 Hz, Me-30) ; 1.29 (3H, s, Me-26) ; 1.36 (3H, s, Me-28) ; 1.44 (3H, s, Me-25) ; 2.20 (3H, s, Me-23) ; 2.61 (1H, m, H-20) ; 3.70 (1H, d, J= 2.9 Hz, H-22) ; 4.03 (1H, dd, J1= 2.6, J2= 10.2 Hz, H-19) ; 6.32 (1H, d, J= 7.2 Hz, H-7) ; 6.50 (1H, d, J= 1.3 Hz, H-1) ; 7.00 (1H, dd, J1= 1.3, J2= 7.1 Hz, H-6) . 13C RMN (75 MHz, CDCl3) δ 10.2 (c, C-23) ; 20.3 (c, C-27) ; 20.9 (c, C-30) ; 21.7 (c, C-26) ; 27.9 (t, C-16) ; 28.0 (t, C-15) ; 28.9 (t, C-12) ; 30.9 (c, C-28) ; 33.4 (t, C-11) ; 37.9 (c, C-25) ; 40.0 (d, C-20) ; 40.4 (s, C-14) ; 42.7 (s, C-9) ; 44.4 (s, C-13) ; 45.5 (s, C-17) ; 48.7 (d, C-18) ; 76.6 (d, C-19) ; 77.2 (d, C-22) ; 118.6 (d, C-7) ; 119.6 (d, C-1) ; 127.7 (s, C-5) ; 133.7 (d, C-6) ; 146.1 (s, C-4) ; 149.5 (s, C-3) ; 164.1 (s, C-10) ; 167.9 (s, C-8) ; 178.4 (s, C-2) ; 216.5 (s, C-21) . EM de alta resolución Calculado para (M+- Br) C28H36O4 436.2614, observado 436.2695.
Ejemplo 2
Compuesto C7: 14-Bromo-3-hydroxy-4, 6b, 8a, 11, 12b, 14a-hexamethyl-7, 8, 8a, 11, 12, 12a, 12b, 13, 14, 14a-decahydro- 6bH, 9H-picene-2, 10-dione
100 mg (0.23 mmoles) de 22β-hidroxi-tingenona, obtenida según el ejemplo 1, se disolvieron en 10 ml de CH2Cl2 y fueron tratados con 82 mg de NBS (2 eq) durante 2 h a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se siguió por CCF y cuando no quedó más producto de partida se procedió a realizar una extracción con CH2Cl2. La fase orgánica se secó con sulfato de magnesio anhidro y el disolvente se evaporó a presión reducida. El residuo se purificó por cromatografía de columna sobre gel de sílice, usando como eluyente mezclas de n- hexano:AcOEt en polaridad creciente desde 10% hasta 60%, para obtener: 1.2 mg (1%) del compuesto C7 y mezcla de otros compuestos.
1H RMN (300 MHz, CDCl3) δ 0.99 (3H, s, Me-28) ; 1.00 (3H, d, J= 5.2 Hz, Me-30) ; 1.01 (3H, s, Me-27) ; 1.38 (3H, s, Me-26) ; 1.76 (3H, s, Me-25) ; 2.20 (3H, s, Me-23) ; 4.81 (1H, dd, J1= 6.7 Hz, J2= 12.0 Hz, H-11) ; 6.28 (1H, d, J= 7.0 Hz, H-7) ; 6.89 (1H, d, J= 7.0 Hz, H-6) ; 7.35 (1H, s, H-1) . 13C RMN (75 MHz, CDCl3) δ 10.2 (c, C-23) ; 14.9 (c, C-30) ; 19.5 (c, C-27) ; 21.2 (c, C-26) ; 28.3 (t, C-15) ; 31.7 (t, C-16) ; 32.0 (c, C-28) ; 35.0 (t, C-19) ; 37.6 (c, C-25) ; 38.1 (s, C-13) ; 41.6 (d, C-18) ; 42.4 (s, C-14) ; 42.8 (d, C-20) ; 44.3 (s, C-17) ; 44.9 (t, C-12) ; 46.8 (s, C-9) ; 51.6 (t, C-22) ; 58.3 (d, C-11) ; 117.9 (s, C-4) ; 118.4 (d, C-7) ; 121.1 (d, C-1) ; 129.6 (s, C-5) ; 131.4 (d, C-6) ; 152.9 (s, C-3) ; 162.7 (s, C-10) ; 165.4 (s, C-8) ; 178.3 (s, C-2) ; 212.8 (s, C-21) . EM de alta resolución Calculado para C28H35BrO3 498.1770, observado 498.1801.
Ejemplo 3
Compuesto C8: Éster de ácido (4, 6b, 8a, 11, 12b, 14a-hexametil-2, 10-dioxo-2, 6b, 7, 8, 8a, 9, 10, 11, 12, 12a, 12b, 13, 14, 14a-tetradecahidro-picen-3-il) acético
300 g de la corteza de raíz de Maytenus amazonica fueron extraídos en 2 litros de una mezcla de disolventes n- hexano-éter etílico 1:1, en un equipo soxhlet a reflujo durante 48 horas, obteniéndose 70 gramos de un sólido rojizo, después de evaporar el disolvente. El extracto fue cromatografiado sobre una columna de sephadex LH-20, usando como eluyente una mezcla de n- hexano-CHCl3- MeOH 2:1:1. Se obtuvieron un total de 41 fracciones que se reunieron según cromatografía de capa fina en siete grupos (A, B, C, D, E, F y G) . Estos grupos, a su vez, fueron fraccionados en columnas de sephadex LH-20, en columnas de gel de sílice de media presión y en placas preparativas, de las cuales se obtuvo el compuesto de partida denominado tingenona.
mg (0.096 mmoles) de tingenona en 10 ml de CH2Cl2 seco fueron tratados con 0.04 ml (3 eq) de Et3N seca y 0.01 ml (1.5 eq) de cloruro de acetilo. La reacción se llevó a cabo a temperatura ambiente, se siguió por CCF y se agitó durante 2 h. Se siguió con el procedimiento descrito en las reacciones anteriores. El crudo se purificó por cromatografía preparativa sobre gel de sílice usando como fase móvil n- hexano:AcOEt (2:3) , para dar 24 mg (54%) del producto C8. El resto fue producto de partida.
1H RMN (300 MHz, CDCl3) δ 7.08 (1H, dd, J1= 1.3, J2= 7.0 Hz, H-6) ; 6.50 (1H, d, J=1.4 Hz, H-1) ; 6.35 (1H, d, J= 7.1 Hz, H-7) ; 2.49 (1H, m, H-20) ; 2.36 (3H, s, Me-COO) ; 2.16 (3H, s, Me-23) ; 1.52 (3H, s, Me-25) ; 1.35 (3H, s, Me-26) ; 1.00 (3H, s, Me-27) ; 0.99 (3H, d, J= 6.2 Hz, Me-30) ; 0.98 (3H, s, Me-28) . 13C RMN (75 MHz, CDCl3) δ 11.1 (c, C-23) ; 14.8 (c, C-30) ; 19.5 (c, C-27) ; 20.3 (c, CH3COO) ; 21.6 (c, C-26) ; 28.2 (t, C-15) ; 29.6 (t, C-12) ; 31.8 (t, C-19) ; 32.3 (c, C-28) ; 33.6 (t, C-11) ; 35.2 (t, C-16) ; 37.9 (s, C-17) ; 38.8 (c, C-25) ; 40.2 (s, C-13) ; 41.7 (d, C-20) ; 42.2 (s, C-9) ; 43.3 (d, C-18) ; 44.6 (s, C-14) ; 52.3 (t, C-22) ; 117.6 (d, C-7) ; 122.9 (d, C-1) ; 126.4 (s, C-5) ; 133.5 (s, C-4) ; 134.9 (d, C-6) ; 142.8 (s, C-3) ; 162.9 (s, C-10) ; 168.5 (s, CH3COO) ; 170.4 (s, C-8) ; 177.3 (s, C-2) ; 213.4 (s, C-21) . EM de alta resolución Calculado para C30H38O4 462.2770, observado 462.2784.
Ejemplo 4
Compuesto C9: Éster de ácido (4, 6b, 8a, 11, 12b, 14a-hexametil-2, 10-dioxo-2, 6b, 7, 8, 8a, 9, 10, 11, 12, 12a, 12b, 13, 14, 14a-tetradecahidro-picen-3-il) nicotínico
mg (0.23 mmoles) de tingenona (obtenida según el ejemplo 3) se disolvieron en 10 ml de CH2Cl2 seco y fueron tratados con 0.097 ml (3 eq) de Et3N seca, 62.12 mg (1.5 eq) de cloruro de nicotilo y cantidades catalíticas de DMAP. La reacción se llevó a cabo a temperatura ambiente, se siguió por CCF y se agitó durante 20 minutos. Se siguió con el procedimiento descrito en las reacciones anteriores y el crudo se purificó por cromatografía preparativa sobre gel de sílice usando como fase móvil CH2Cl2:AcOEt (1:1) , para dar 55 mg (46%) del producto C9. El resto fue producto de partida.
1H RMN (300 MHz, CDCl3) δ 9.37 (1H, dd, J1= 0.9, J2= 2.1 Hz, Ha) ; 8.81 (1H, dd, J1= 1.7, J2= 4.9 Hz, Hd) ; 8.43 (1H, dd, J1= 1.9, J2= 8.2 Hz, Hb) ; 7.44 (1H, m, Ha) ; 7.13 (1H, dd, J1= 1.2, J2= 7.0 Hz, H-6) ; 6.53 (1H, d, J=1.3 Hz, H-1) ; 6.38 (1H, d, J= 7.1 Hz, H-7) ; 2.49 (1H, m, H-20) ; 2.22 (3H, s, Me-23) ; 1.54 (3H, s, Me-25) ; 1.35 (3H, s, Me-26) ; 0.99 (3H, s, Me-27) ; 0.97 (3H, d, J= 6.6 Hz, Me-30) ; 0.95 (3H, s, Me-28) . 13C RMN (75 MHz, CDCl3) δ 11.23 (c, C-23) ; 14.84 (c, C-30) ; 19.54 (c, C-27) ; 21.59 (c, C-26) ; 28.26 (t, C-15) ; 29.63 (t, C-12) ; 31.78 (t, C-19) ; 32.30 (c, C-28) ; 33.69 (t, C-11) ; 35.23 (t, C-16) ; 37.91 (s, C-17) ; 38.81 (c, C-25) ; 40.23 (s, C-13) ; 41.65 (d, C-20) ; 42.29 (s, C-9) ; 43.26 (d, C-18) ; 44.64 (s, C-14) ; 52.26 (t, C-22) ; 117.6 (d, C-7) ; 123.0 (d, C-1) ; 123.2 (d, CH-Ar) ; 125.0 (s, C-Ar) ; 126.3 (s, C-5) ; 133.8 (s, C-4) ; 135.2 (d, C-6) ; 137.6 (d, CH-Ar) ; 142.7 (s, C-3) ; 151.3 (d, N-CH) ; 153.7 (d, N-CH) ; 162.8 (s, C-10) ; 162.9 (s, OCO-Nic) ; 170.7 (s, C-8) ; 176.8 (s, C-2) ; 213.3 (s, C-21) . EM de alta resolución Calculado para C34H39NO4 525.2879, observado 525.2899.
Ejemplo 5
Compuesto C12: Éster metílico del ácido 3, 10-dihidroxi-2, 4a, 6a, 9, 12b, 14a-hexametil-11-oxo-1, 2, 3, 4, 4a, 5, 6, 6a, 11, 12b, 13, 14, 14a, 14b-tetradecahidro-picen-2- carboxílico
1500 g de la corteza de raíz de Salacia fueron extraídos en 2 una mezcla de disolventes n- hexano-éter etílico 1:1, obteniéndose 5 gramos de un extracto rojizo, después de evaporar el disolvente. El extracto fue cromatografiado sobre varias columnas de gel de sílice, de las cuales se obtuvo el compuesto C12.
Ejemplo 6
Compuesto C14: Éster metílico del ácido 10-Dimetilcarbamoiloxi-2, 4a, 6a, 9, 12b, 14a-hexametil-11-oxo-1, 2, 3, 4, 4a, 5, 6, 6a, 11, 12b, 13, 14, 14a, 14b-tetradecahidro-picen-2-carboxílico
300 g de la corteza de raíz de Maytenus amazonica fueron extraídos en 2 litros de una mezcla de disolventes n- hexano-éter etílico 1:1, en un equipo soxhlet a reflujo durante 48 horas, obteniéndose 70 gramos de un sólido rojizo, después de evaporar el disolvente. El extracto fue cromatografiado sobre una columna de sephadex LH-20, usando como eluyente una mezcla de n- hexano-CHCl3- MeOH 2:1:1. Se obtuvieron un total de 41 fracciones que se reunieron según cromatografía de capa fina en siete grupos (A, B, C, D, E, F y G) . Estos grupos, a su vez, fueron fraccionados en columnas de sephadex LH-20, en columnas de gel de sílice de media presión y en placas preparativas, de las cuales se obtuvo el compuesto de partida denominado pristimerina.
mg (0.14 mmoles) de pristimerina en 5 ml de CH2Cl2 seco fueron tratados con 0.062 ml (3 eq) de Et3N seca, 0.02 ml (1.5 eq) de cloruro de N, N-dimetilcarbamoilo y cantidades catalíticas de DMAP. La reacción se llevó a cabo a 0ºC y bajo atmósfera inerte, se siguió por CCF y se agitó durante 24 h. A continuación se añadió ácido clorhídrico diluido al 5% hasta neutralizar. Entonces la fase orgánica se extrajo con CH2Cl2 y se secó con sulfato de magnesio anhidro. Se filtró y se concentró a presión reducida. El crudo se purificó por cromatografía preparativa usando como fase móvil n- hexano:AcOEt (2:3) para rendir 36 mg (48%) del producto C14. El resto se correspondió con producto de partida.
1H RMN (300 MHz, CDCl3) δ 7.00 (1H, dd, fi= 1.4, J2= 7.0 Hz, H-6) ; 6.46 (1H, d, J= 1.4 Hz, H-1) ; 6.29 (1H, d, J= 7.2 Hz, H-7) ; 3.56 (3H, s, OMe) ; 3.13 (s, N-CH3) ; 3.00 (s, N-CH3) ; 2.17 (3H, s, Me-23) ; 1.46 (3H, s, Me-25) ; 1.26 (3H, s, Me-26) ; 1.17 (3H, s, Me-30) ; 1.09 (3H, s, Me-28) ; 0.54 (3H, s, Me-27) . 13C RMN (75 MHz, CDCl3) δ 10.97 (c, C-23) ; 18.09 (c, C-27) ; 21.63 (c, C-26) ; 28.39 (t, C-15) ; 29.38 (t, C-12) ; 29.67 (t, C-21) ; 30.29 (s, C-17) ; 30.61 (t, C-19) ; 31.34 (c, C-28) ; 32.40 (c, C-30) ; 33.45 (t, C-11) ; 34.49 (t, C-22) ; 36.15 (t, C-16) ; 36.57 (c, N-CH3) ; 36.58 (c, N-CH3) ; 37.99 (c, C-25) ; 38.99 (s, C-13) ; 40.14 (s, C-20) ; 42.23 (s, C-9) ; 44.07 (d, C-18) ; 44.87 (s, C-14) ; 51.34 (q, OCH3) ; 117.5 (d, C-7) ; 122.9 (d, C-1) ; 126.5 (s, C-4) ; 133.1 (s, C-5) ; 134.5 (d, C-6) ; 143.0 (s, C-3) ; 153.9 (s, OCON) ; 162.6 (s, C-10) ; 170.8 (s, C-8) ; 178.3 (s, C-2) ; 178.4 (s, C-29) . EM de alta resolución Calculado para C33H45NO5 535.3298, observado 535.3294.
Ensayos ex vivo de la actividad de la ChoK humana
Para los ensayos ex vivo se utilizó colina quinasa alfa-1 humana recombinante expresada en E. coli en el ensayo del tampón (100 mM Tris-HCl pH 8.0, 100 mM MgCl2, 10 mM ATP y 200 μM de colina en presencia de cloruro de metil[14C]-colina (50-60 μCi/mmol) . Las reacciones se llevaron a cabo a 37°C durante 30 min y se detuvieron con ácido tricloroacético enfriado al hielo a una concentración final del 16%. Las muestras se lavaron con éter dietílico saturado con agua y se liofilizaron. Los derivados hidrofílicos de la colina se resolvieron en placas de cromatografía de capa fina según un procedimiento descrito [Ramírez, A., Penalva, V., Lucas, L., Lacal, J.C. Oncogene 21, 937-946 (2002) ].
Estos ensayos se realizaron con los compuestos de la invención C3, C7, C8, C9, C10, C12 y C14 así como con otros ocho compuestos conocidos del estado de la técnica (ES 2 117 950) . Los resultados se resumen en la tabla I.
De los resultados obtenidos se concluye que los compuestos de la invención permiten reducir de forma notable y selectiva la actividad de la enzima colina quinasa (ChoK) en modelos celulares.
Ensayos de la proliferación celular
Las células HT-29 se sembraron en placas de 24 pocillos (35 H 103 células/pocillo) y se incubaron durante 24 h. A continuación, las células se trataron con diferentes concentraciones de los inhibidores de ChoK en el medio de cultivo habitual. Tres días más tarde, los pocillos se aspiraron y se adicionaron tanto medio fresco como más cantidad de fármaco, y las células se mantuvieron durante 3 días más. La cuantificación de las células que quedan en cada pocillo se llevó a cabo mediante el método del Violeta de Cristal [Gillies, R. J., Didier, N., Denton, M. Anal. Biochem. 159, 109-113 (1986) ], con algunas modificaciones [Hernández-Alcoceba, R., Saniger, L., Campos, J., Núñez, M. C., Khaless, F., Gallo, M. Á., Espinosa, A., Lacal, J. C. Oncogene, 15, 2289-2301 (1997) ]. Brevemente, las células se lavaron con el tampón TD y se fijaron con glutaraldehido al 1% durante 15 min. Tras lavado de nuevo con TD, los núcleos celulares se colorearon con Violeta de Cristal al 0.1% durante al menos 30 min y se lavaron 3 veces con agua destilada. El colorante adsorbido se resuspendió en ácido acético al 10%, y se determinó la absorbancia a 595 nm en un espectrómetro. Los resultados obtenidos se resumen en forma de un valor de CI50, es decir, la concentración del compuesto que se requiere para producir una inhibición del 50%; Este valor se determina mediante ajuste iterativo de la curva. Se determinaron dos valores para cada punto de la curva, el experimento se repitió dos o tres veces y se estimaron los valores medios. En los pocos casos en los que los dos valores diferían más del 50%, se llevó a cabo una tercera experiencia para determinar el valor real. El valor de CI50 como medida de la potencia se utiliza para relacionar la actividad biológica de los compuestos con su estructura química.
Estos ensayos se realizaron con los compuestos de la invención C3, C7, C8, C9, C10, C12 y C14 así como con otros ocho compuestos conocidos del estado de la técnica (ES 2 117 950) . Los resultados se resumen en la tabla I.
La siguiente tabla resume los resultados obtenidos en los ensayos realizados y que se muestran como ejemplo.
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TABLA I 
De los datos de la tabla I se aprecia que los compuestos de la presente invención presentan valores similares de actividad antiproliferativa frente a células derivadas de tumores en cultivo.
